高低油脂含量大豆成熟期胚抑制消减cDNA文库构建及差异基因分析
| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-16页 |
| ·植物脂肪酸代谢的研究概况 | 第11-12页 |
| ·抑制性消减杂交技术产生的背景 | 第12-13页 |
| ·抑制性消减杂交的主要原理 | 第13页 |
| ·抑制性消减杂交的基本过程 | 第13-14页 |
| ·抑制性消减杂交的主要优缺点 | 第14-15页 |
| ·抑制性消减杂交的主要优点 | 第14页 |
| ·抑制性消减杂交的主要缺点 | 第14-15页 |
| ·抑制性消减杂交的应用 | 第15页 |
| ·研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-24页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-24页 |
| ·材料标记 | 第16页 |
| ·取材 | 第16-17页 |
| ·总RNA的提取 | 第17页 |
| ·mRNA的纯化 | 第17-18页 |
| ·RNA的反转录 | 第18页 |
| ·抑制性消减杂交 | 第18-21页 |
| ·连接转化 | 第21页 |
| ·克隆涂板 | 第21-22页 |
| ·菌液PCR筛选 | 第22页 |
| ·点杂交 | 第22-23页 |
| ·克隆测序及分析 | 第23页 |
| ·实时荧光定量PCR校正内参 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-40页 |
| ·大豆种子成分测定 | 第24-25页 |
| ·总RNA的提取 | 第25-28页 |
| ·构建消减杂交文库的总RNA提取 | 第26-27页 |
| ·检测时序特异的总RNA提取 | 第27页 |
| ·检测组织特异的总RNA提取 | 第27-28页 |
| ·用于特异性检测的样品的反转录 | 第28-29页 |
| ·组织特异模板反转录检测 | 第28-29页 |
| ·时序特异模板反转录检测 | 第29页 |
| ·消减杂交文库构建 | 第29-32页 |
| ·接头连接效率分析 | 第29-30页 |
| ·消减杂交效率的PCR检测 | 第30-32页 |
| ·PCR检测克隆片段插入状况 | 第32页 |
| ·阳性克隆的点杂交筛选 | 第32-33页 |
| ·测序结果统计 | 第33-34页 |
| ·特异基因信息 | 第34-37页 |
| ·实时荧光定量PCR内参的校正 | 第37页 |
| ·差异基因的RT-PCR检测 | 第37-40页 |
| ·差异基因的组织特异性检测 | 第37-38页 |
| ·差异基因的时序特异性检测 | 第38-39页 |
| ·胚特异表达基因的荧光定量检测 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-44页 |
| ·脂肪酸代谢调控基因 | 第40-41页 |
| ·蛋白质合成调控基因 | 第41页 |
| ·糖类的合成降解调控基因 | 第41-42页 |
| ·能量和物质贮藏转运调控基因 | 第42页 |
| ·胁迫响应调控基因 | 第42-43页 |
| ·发育调控相关基因 | 第43-44页 |
| ·其它差异基因 | 第44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 下一步工作设想 | 第53页 |
| 作者简历 | 第53页 |
| 研究生在读期间发表文章 | 第53页 |
