毕赤酵母表达皮蝇素C蛋白及牛皮蝇蛆病诊断技术的研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-20页 |
| ·牛皮蝇蛆病概述 | 第11-12页 |
| ·牛皮蝇的分类 | 第11-12页 |
| ·牛皮蝇的生活史 | 第12页 |
| ·牛皮蝇蛆病的流行及危害 | 第12页 |
| ·牛皮蝇蛆病的诊断 | 第12-16页 |
| ·临床诊断 | 第12-13页 |
| ·免疫学诊断 | 第13-16页 |
| ·牛皮蝇蛆病的预防与治疗 | 第16-17页 |
| ·牛皮蝇蛆病的预防 | 第16页 |
| ·牛皮蝇蛆病的治疗 | 第16-17页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第17-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-38页 |
| ·材料与试剂 | 第20-26页 |
| ·实验器材 | 第20页 |
| ·试验材料 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要工具酶 | 第21页 |
| ·主要溶液的配制 | 第21-26页 |
| ·重组质粒的构建 | 第26-30页 |
| ·HC基因的扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR产物的电泳检测和回收 | 第27页 |
| ·纯化PCR产物和pMD18-T载体连接 | 第27页 |
| ·重组载体pMD18-T/HC的转化 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第28页 |
| ·重组质粒pPIC9k-HC的构建 | 第28-29页 |
| ·重组质粒pPIC9k-HC的转化及鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的转化和筛选 | 第30-32页 |
| ·重组质粒的转化 | 第30-31页 |
| ·含多拷贝重组质粒菌株的筛选 | 第31-32页 |
| ·蛋白诱导分泌 | 第32页 |
| ·表达产物的生物特性鉴定 | 第32-34页 |
| ·分子量测定 | 第32-33页 |
| ·抗原性检测 | 第33-34页 |
| ·酶活性检测 | 第34页 |
| ·目的蛋白的分离和纯化 | 第34-35页 |
| ·表达条件优化的研究 | 第35页 |
| ·甲醇浓度对HC表达的影响 | 第35页 |
| ·甘油浓度对HC表达的影响 | 第35页 |
| ·培养基pH值对HC表达的影响 | 第35页 |
| ·蛋白浓度检测 | 第35页 |
| ·诊断技术的研究 | 第35-38页 |
| ·间接ELISA的操作程序 | 第35-36页 |
| ·ELISA最佳工作条件的确定 | 第36-37页 |
| ·交叉反应试验 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第38-50页 |
| ·结果 | 第38-46页 |
| ·HC基因的克隆、表达、纯化和鉴定 | 第38-42页 |
| ·表达条件优化的研究 | 第42-43页 |
| ·诊断技术的研究 | 第43-46页 |
| ·讨论 | 第46-50页 |
| ·多种表达系统表达HC蛋白的比较 | 第46-47页 |
| ·关于毕赤酵母表达HC蛋白的研究 | 第47页 |
| ·关于HC蛋白生物活性的研究 | 第47-48页 |
| ·牛皮蝇蛆病诊断技术的研究 | 第48-50页 |
| 第四章 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 附录 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简历 | 第65页 |
