| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-31页 |
| ·Axin 是参与多个信号通路的构架蛋白 | 第13-21页 |
| ·Axin 的发现 | 第13-14页 |
| ·Axin 可以与Wnt 通路的多个成员相互作用 | 第14-17页 |
| ·Axin | 第14页 |
| ·β-catenin | 第14-15页 |
| ·GSK-3β | 第15页 |
| ·APC | 第15页 |
| ·Casein Kinases I | 第15-16页 |
| ·PP2A | 第16页 |
| ·Dishevelled | 第16页 |
| ·LRP | 第16-17页 |
| ·Axin 的生物学功能 | 第17-18页 |
| ·Axin 的体轴抑制作用 | 第17页 |
| ·Axin 在细胞骨架重排中的作用 | 第17页 |
| ·Axin 与神经元分化 | 第17-18页 |
| ·Axin 与 JNK 信号途径 | 第18-21页 |
| ·简介 | 第18-19页 |
| ·JNK 的作用底物 | 第19页 |
| ·JNK 信号传导通路 | 第19页 |
| ·JNK 信号通路的生物学功能 | 第19-20页 |
| ·Axin 与JNK 信号途径 | 第20-21页 |
| ·Axin与TGF-β信号通路 | 第21页 |
| ·PML | 第21-29页 |
| ·PML 的基本特征 | 第21-22页 |
| ·PML 与nuclear body 的形成 | 第22-23页 |
| ·病理状态下的 PML-nuclear body | 第23页 |
| ·PML-NB 构成了一个前凋亡网络 | 第23-25页 |
| ·p53 | 第23-24页 |
| ·HIPKs | 第24页 |
| ·Daxx | 第24-25页 |
| ·PML 的生物学功能 | 第25-28页 |
| ·PML 是干扰素和免疫自稳功能的介质 | 第25-26页 |
| ·PML 在多条凋亡途径中的作用 | 第26-27页 |
| ·PML 在细胞增值与衰老中的作用 | 第27页 |
| ·PML 在 DNA 损伤修复和维持基因组稳定方面的作用 | 第27-28页 |
| ·PML 对于癌症发病机理和治疗的意义 | 第28-29页 |
| ·立题背景和立题意义 | 第29-31页 |
| 第二章 材料与方法 | 第31-48页 |
| ·常用药品和试剂 | 第31页 |
| ·DNA 相关实验方法 | 第31-40页 |
| ·质粒载体 | 第31-33页 |
| ·pBluescript II SK (-) | 第31-32页 |
| ·pCMV5 | 第32页 |
| ·pSUPER | 第32-33页 |
| ·pCEP4 | 第33页 |
| ·大肠杆菌( E.coli )感受态细胞的制备和 DNA 转化 | 第33-34页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第33-34页 |
| ·DNA 转化 | 第34页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第34-36页 |
| ·小规模质粒 DNA 的提取(STET 煮沸法) | 第34-35页 |
| ·中等规模质粒 DNA 的提取 | 第35页 |
| ·大规模质粒 DNA 的提取(CsCl 超速离心法) | 第35-36页 |
| ·质粒 DNA 的工具酶处理 | 第36-37页 |
| ·DNA 的限制性内切酶消化 | 第36页 |
| ·线性 DNA 的末端平滑化 | 第36-37页 |
| ·线性 DNA 5′端的磷酸化 | 第37页 |
| ·线性 DNA 5′端磷酸基团的去除 | 第37页 |
| ·纯化 DNA 片段 | 第37-38页 |
| ·DNA 的琼脂糖电泳 | 第37-38页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收 DNA | 第38页 |
| ·从溶液中回收 DNA | 第38页 |
| ·DNA 连接反应 | 第38-39页 |
| ·PCR 相关实验 | 第39页 |
| ·PCR 反应 | 第39页 |
| ·PCR 产物的克隆 | 第39页 |
| ·哺乳动物细胞表达质粒的构建 | 第39-40页 |
| ·Axin1 全长表达质粒的构建 | 第39页 |
| ·PML 全长表达质粒的构建 | 第39页 |
| ·PML 突变体表达质粒的构建 | 第39-40页 |
| ·细胞培养及转染 | 第40-42页 |
| ·细胞培养 | 第40-41页 |
| ·细胞培养及相关溶液的配制 | 第40-41页 |
| ·细胞的传代和接种 | 第41页 |
| ·瞬时转染 | 第41-42页 |
| ·磷酸钙转染 | 第41-42页 |
| ·Lipofectamine 2000 转染试剂转染 | 第42页 |
| ·蛋白质相关实验方法 | 第42-45页 |
| ·免疫共沉淀反应实验 | 第42-43页 |
| ·蛋白质的SDS-PAGE 电泳与Western blotting 分析 | 第43-45页 |
| ·RNA 干扰实验 | 第45页 |
| ·PML siRNA 和control siRNA 表达质粒的构建 | 第45页 |
| ·RNA 干扰试验 | 第45页 |
| ·免疫荧光染色 | 第45-46页 |
| ·转录活性检测 | 第46页 |
| ·凋亡分析 | 第46-47页 |
| ·克隆形成实验 | 第47-48页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第48-69页 |
| ·UV 辐射促使 Axin 和 PML 核内共定位 | 第48-51页 |
| ·UV 辐射刺激能引起 Axin 的重新分布 | 第48-49页 |
| ·UV 处理不会影响 PML 的定位 | 第49页 |
| ·UV 辐射促使 Axin 和 PML 在核内共定位 | 第49-50页 |
| ·UV 处理不会引起 Axin 与 PML-ΔPrb 在 NB 上的共定位 | 第50-51页 |
| ·Axin 能与 PML 相互作用 | 第51-52页 |
| ·Axin 激活的p53 磷酸化需要 PML | 第52-57页 |
| ·PML 的显性负作用突变体抑制 Axin 激活p53 的磷酸化 | 第52-54页 |
| ·PML 的 siRNA 可以抑制 Axin 激活 p53 的磷酸化 | 第54-56页 |
| ·PML 的siRNA 可以抑制UV 引起的p53 磷酸化 | 第56-57页 |
| ·Axin 促进p53 的转录活性需要 PML 的参与 | 第57-60页 |
| ·PML 和 Axin 协同促进p53 的转录活性 | 第57-58页 |
| ·PML~(-/-) 细胞中 Axin 不能活化p53 的转录活性 | 第58页 |
| ·PML 的siRNA 能够抑制 Axin 对p53 的转录活化 | 第58-59页 |
| ·PML 的显性负作用突变体抑制 Axin 对p53 的转录活化 | 第59-60页 |
| ·Axin 诱导细胞死亡需要 PML 参与 | 第60-61页 |
| ·PML 参与 UV 诱导的 Axin 介导的细胞死亡 | 第61-64页 |
| ·Axin 和 PML 都参与 UV 辐射引起的细胞死亡 | 第61-62页 |
| ·PML siRNA 可以抑制 Axin 引起的细胞死亡 | 第62-63页 |
| ·UV 和 Axin 都不能诱导 PML~(-/-) 细胞的死亡 | 第63-64页 |
| ·UV 辐射引起的 Axin 诱导的 PML 介导的p53 活化模型 | 第64-66页 |
| ·p53 和 HIPK2 与 PML 有共定位 | 第64-65页 |
| ·UV 辐射引起的 Axin 诱导的 PML 介导的p53 活化模型 | 第65-66页 |
| ·讨论与总结 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-89页 |
| 图表索引 | 第89-91页 |
| 缩略语及中英文对照 | 第91-94页 |
| 在学期间发表论文 | 第94页 |
