| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-18页 |
| ·卵透明带避孕疫苗概述 | 第9-10页 |
| ·mrhZP3在毕赤酵母中的表达 | 第10-12页 |
| ·粘膜免疫 | 第12-14页 |
| ·mrhZP3诱导人精子顶体反应的临床意义 | 第14-15页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| ·本研究的技术路线 | 第16-18页 |
| 2 实验材料、试剂与仪器 | 第18-20页 |
| ·实验材料与试剂 | 第18-19页 |
| ·主要实验仪器 | 第19-20页 |
| 3 实验方法 | 第20-28页 |
| ·酵母工程菌的筛选及目的蛋白的诱导表达 | 第20页 |
| ·高密度发酵生产mrhZP3 | 第20-21页 |
| ·mrhZP3的分离纯化 | 第21-22页 |
| ·mrhZP3纯化条件的优化 | 第22-23页 |
| ·SDS-PAGE | 第23页 |
| ·免疫印迹(Western blotting)鉴定目的蛋白 | 第23-24页 |
| ·mrhZP3蛋白免疫小鼠 | 第24-25页 |
| ·抗卵透明带抗体的测定 | 第25页 |
| ·小鼠抗生育实验 | 第25页 |
| ·小鼠卵巢组织结构的观察 | 第25页 |
| ·mrhZP3诱导人精子顶体反应 | 第25-28页 |
| 4 实验结果 | 第28-36页 |
| ·不同载体mrhZP3酵母工程菌株的鉴定和筛选 | 第28页 |
| ·mrhZP3的金属螯合层析 | 第28-29页 |
| ·不同上样浓度对纯化效果的影响 | 第29-30页 |
| ·不同pH测试方法对纯化效果的影响 | 第30页 |
| ·mrhZP3的Western blotting分析 | 第30-31页 |
| ·免疫组小鼠血清抗ZP3 IgG抗体反应结果 | 第31-33页 |
| ·空白对照组小鼠血清抗ZP3抗体反应结果 | 第33页 |
| ·小鼠的抗生育结果 | 第33页 |
| ·卵巢的组织学观察 | 第33-34页 |
| ·mrhZP3诱导人精子顶体反应结果 | 第34-36页 |
| 5 讨论 | 第36-44页 |
| ·毕赤酵母表达mrhZP3 | 第36-37页 |
| ·mrhZP3蛋白的纯化 | 第37-38页 |
| ·mrhZP3诱发人精子顶体反应活性测定 | 第38-40页 |
| ·注射免疫和生殖道粘膜免疫 | 第40-42页 |
| ·免疫对小鼠卵巢的影响 | 第42-43页 |
| ·结论和展望 | 第43-44页 |
| 6 参考文献 | 第44-50页 |
| 附录 | 第50-58页 |
| 附录Ⅰ 本研究中所用常规实验方法 | 第50-51页 |
| 附录Ⅱ 本研究中所用试剂配方 | 第51-57页 |
| 附录Ⅲ 英文缩略词索引 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |