| 内容提要 | 第1-5页 |
| 缩写词表 | 第5-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-34页 |
| 第一节 Ⅱ型糖尿病发病机理及治疗药物的研究进展 | 第12-15页 |
| 一、Ⅱ型糖尿病发病机理 | 第12-14页 |
| 1. 胰岛素受体学说 | 第13页 |
| 2. 葡萄糖受体学说 | 第13-14页 |
| 3. 双激素学说 | 第14页 |
| 4. 神经多肽学说 | 第14页 |
| 二、治疗Ⅱ型糖尿病药物的研究进展 | 第14-15页 |
| 第二节 GLP-1 及其受体激动剂exendin-4 的研究进展 | 第15-24页 |
| 一、GLP-1 | 第15-17页 |
| 二、Exendin-4 | 第17-24页 |
| 1. Exendin-4 的优越性 | 第17-18页 |
| 2. Exendin-4 治疗T2DM 的作用机制 | 第18-21页 |
| ·IRS2/PI3-K/PKB 信号途径 | 第18-19页 |
| ·cAMP/PKA 信号途径 | 第19-20页 |
| ·Exendin-4 抑制游离脂肪酸诱导的胰岛细胞凋亡 | 第20-21页 |
| 3. 治疗T2DM 的模拟物类药物 | 第21-24页 |
| ·GLP-1 受体激动剂 | 第21-23页 |
| ·DPP-Ⅳ抑制剂类 | 第23-24页 |
| 第三节 天然肽类和模拟肽类药物 | 第24-33页 |
| 一、天然肽的修饰及改造 | 第24页 |
| 二、β-肽及其研究现状 | 第24-31页 |
| 1. 天然产物中存在的β-氨基酸 | 第25-26页 |
| 2. 受体的激动剂和拮抗剂的β取代 | 第26-29页 |
| 3. 蛋白酶抑制剂的的β取代 | 第29-31页 |
| 4. T细胞受体拮抗剂的β取代 | 第31页 |
| 三、β-肽的二级结构 | 第31-33页 |
| 第四节 多肽合成 | 第33-34页 |
| 本文的设计思想 | 第34-35页 |
| 第二章 材料与方法 | 第35-45页 |
| 第一节 Exendin-4 及模拟肽合成 | 第35-37页 |
| 一、实验材料 | 第35-36页 |
| 二、实验方法 | 第36-37页 |
| 1. Fmoc固相合成和纯化 | 第36页 |
| 2. 合成肽的质谱鉴定 | 第36-37页 |
| 第二节 Exendin-4 及其模拟肽活性测定 | 第37-42页 |
| 一、实验材料 | 第37-39页 |
| 1. 细胞培养 | 第37页 |
| 2. 体外细胞增殖活性测定 | 第37-38页 |
| 3. 体内细胞增殖活性测定 | 第38页 |
| 4. 流式细胞技术测定细胞凋亡及其细胞周期时相分布 | 第38页 |
| 5. 总RNA 提取，RT-PCR 和Real-time PCR | 第38-39页 |
| 二、实验方法 | 第39-42页 |
| 1. Exendin-4 及其模拟肽体外活性测定 | 第39页 |
| 2. 天然exendin-4 与其模拟肽体内葡萄糖活性测定 | 第39-40页 |
| 3. 流式细胞技术测定细胞周期 | 第40页 |
| 4. 总 RNA 提取,逆转录 PCR 和 real-time PCR | 第40-42页 |
| 第三节 Exendin-4 及其模拟肽结构与稳定性测定 | 第42-45页 |
| 一、实验材料 | 第42页 |
| 1. 圆二色谱分析测定 | 第42页 |
| 2. 半衰期的测定 | 第42页 |
| ·体外半衰期测定 | 第42页 |
| ·体内半衰期测定 | 第42页 |
| 二、实验方法 | 第42-45页 |
| 1. Exendin-4 及其模拟肽圆二色谱测定 | 第42-43页 |
| 2. Exendin-4 及其模拟肽的半衰期测定 | 第43-45页 |
| ·Exendin-4 在体外血浆代谢及水解位点的解析 | 第43-44页 |
| ·Exendin-4 模拟肽体外半衰期测定 | 第44页 |
| ·Exendin-4 及其模拟肽体内半衰期测定 | 第44-45页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第45-99页 |
| 第一节 Exendin-4 的合成及活性测定 | 第45-59页 |
| 一、天然序列exendin-4 的合成及产物鉴定 | 第45-46页 |
| 二、Exendin-4 体外促进β-细胞增殖活性的测定 | 第46页 |
| 三、Exendin-4 体内生物学活性测定 | 第46-52页 |
| 1. Exendin-4 对糖尿病小鼠血糖的影响 | 第46-48页 |
| 2. Exendin-4 对小鼠的胰腺重量的影响 | 第48-49页 |
| 3. 形态学观察及胰岛β细胞计数 | 第49-52页 |
| 四、Exendin-4 抑制β-细胞凋亡活性的测定 | 第52-59页 |
| 1. Exendin-4 抑制RINm-5F 细胞凋亡的活性测定 | 第52-53页 |
| 2. Exendin-4 抑制β细胞凋亡信号途径的初步探讨 | 第53-59页 |
| ·凋亡相关基因mRNA 表达的测定 | 第53-54页 |
| ·细胞周期因子mRNA 表达的测定 | 第54-55页 |
| ·Exendin-4 可阻止FFA 诱导RINm-5F 细胞周期阻滞 | 第55-59页 |
| 第二节 Exendin-4 在体外人血浆中水解位点的解析 | 第59-67页 |
| 一、Exendin-4 血浆孵育样品的HPLC 鉴定 | 第59-60页 |
| 二、Exendin-4 标准曲线及药时曲线绘制 | 第60-61页 |
| 三、Exendin-4 水解产物的收集及MS 鉴定 | 第61-67页 |
| 第三节模拟肽的设计、合成、稳定性及活性测定 | 第67-98页 |
| 一、模拟肽的设计 | 第67-68页 |
| 二、模拟肽的合成 | 第68-79页 |
| 三、Exendin-4 及其模拟肽体外活性、结构及稳定性测定 | 第79-93页 |
| 1. Exendin-4 及其模拟肽活性测定 | 第79-82页 |
| 2. 圆二色谱测定 exendin-4 及其模拟肽二级结构 | 第82-84页 |
| 3. Exendin-4 及其模拟肽体外血浆稳定性测定 | 第84-93页 |
| 四、Exendin-4 及其模拟肽体内降血糖活性与半衰期测定 | 第93-98页 |
| 1. Exendin-4 及其模拟肽体内活性测定 | 第93-95页 |
| 2. Exendin-4 及 analogueA 体内半衰期测定 | 第95-98页 |
| 第四节 结论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-110页 |
| 博士期间发表论文 | 第110-111页 |
| 中文摘要 | 第111-114页 |
| Abstract | 第114-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
