农杆菌介导的Bt、CBF1基因对马铃薯的遗传转化
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-23页 |
| ·研究目的和意义 | 第11-12页 |
| ·文献综述 | 第12-23页 |
| ·根癌农杆菌介导的植物基因转化的研究进展 | 第12-13页 |
| ·基因工程技术在马铃薯育种中的应用 | 第13-16页 |
| ·Bt基因的基因工程研究进展 | 第16-18页 |
| ·转录因子CBF1的基因工程研究进展 | 第18-20页 |
| ·转基因植物的安全性评价 | 第20-22页 |
| ·技术路线图 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-34页 |
| ·材料与试剂 | 第23-25页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·菌株和质粒 | 第23-24页 |
| ·农杆菌培养基 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·仪器设备 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-28页 |
| ·马铃薯再生体系的建立 | 第25-27页 |
| ·遗传转化系统的优化 | 第27页 |
| ·农杆菌转化方法及菌种保存 | 第27-28页 |
| ·转化体的筛选与鉴定 | 第28-34页 |
| ·筛选方式和时间的确定 | 第28页 |
| ·选择压力的确定 | 第28页 |
| ·PCR检测 | 第28-32页 |
| ·PCR-Southern杂交(地高辛法) | 第32-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-45页 |
| ·马铃薯再生体系的建立 | 第34-37页 |
| ·薯块再生培养基的确定 | 第34-35页 |
| ·蔗糖和琼脂浓度的确定 | 第35-36页 |
| ·微型薯休眠期的确定 | 第36-37页 |
| ·遗传转化影响因素的探讨 | 第37-39页 |
| ·农杆菌浓度及侵染时间对遗传转化的影响 | 第37-38页 |
| ·共培养时间对遗传转化的影响 | 第38页 |
| ·头孢噻肟钠(Cef)对遗传转化的影响 | 第38-39页 |
| ·转化体的筛选与鉴定 | 第39-45页 |
| ·筛选方式和时间的确定 | 第39-40页 |
| ·选择压力的确定 | 第40-41页 |
| ·PCR检测 | 第41-42页 |
| ·PCR-Southern杂交 | 第42-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 图版 | 第58-61页 |
| 图版说明 | 第61-63页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第63页 |
