| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 缩写词表 | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-16页 |
| ·启动子的特点及研究进展 | 第8-12页 |
| ·组成型启动子 | 第9页 |
| ·组织特异性启动子 | 第9-12页 |
| ·诱导型启动子 | 第12页 |
| ·玉米醇溶蛋白基因启动子研究进展 | 第12-13页 |
| ·报告基因GUS(β-葡糖苷酸酶基因) | 第13-14页 |
| ·课题研究的目的意义及技术路线 | 第14-16页 |
| 第二章 ze19启动子的克隆与植物表达载体构建 | 第16-30页 |
| ·材料 | 第16-17页 |
| ·植物材料 | 第16页 |
| ·菌株和制粒 | 第16页 |
| ·酶及试剂 | 第16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16-17页 |
| ·培养基及溶液配制 | 第17页 |
| ·试验方法 | 第17-23页 |
| ·玉米基因组DNA的提取 | 第17-18页 |
| ·ze19基因启动子的PCR扩增 | 第18页 |
| ·目的DNA片段的琼脂糖凝胶回收 | 第18-19页 |
| ·重组质粒pMD18-ze19构建 | 第19页 |
| ·重组质粒pMD18-ze19转化大肠杆菌 | 第19-20页 |
| ·转化质粒pMD18-ze19的提取 | 第20页 |
| ·转化质粒pMD18-ze19的PCR及酶切鉴定 | 第20-21页 |
| ·启动子基因片段的序列测定 | 第21页 |
| ·ze19启动子表达载体构建 | 第21-23页 |
| ·结果与分析 | 第23-30页 |
| ·玉米基因组DNA的提取 | 第23页 |
| ·ze19启动子PCR扩增 | 第23页 |
| ·启动子序列与克隆载体连接及序列分析 | 第23-26页 |
| ·ze19启动子表达载体构建 | 第26-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 烟草的遗传转化及转化植株的检测 | 第30-48页 |
| ·材料 | 第30-32页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·菌株及质粒 | 第30页 |
| ·酶与试剂 | 第30-31页 |
| ·主要仪器和设备 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·溶液配置 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-40页 |
| ·土壤杆菌LBA4404感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·重组质粒转化土壤杆菌 | 第33页 |
| ·重组土壤杆菌的鉴定 | 第33页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第33-35页 |
| ·烟草转化苗的基因组提取 | 第35页 |
| ·烟草转基因植株的PCR检测 | 第35-36页 |
| ·转基因植株的southern bloting检测 | 第36-38页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第38页 |
| ·GUS活性的荧光测定 | 第38-40页 |
| ·转基因阳性植株T_0代遗传稳定性检测 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-48页 |
| ·重组载体转化土壤杆菌的PCR鉴定 | 第40-41页 |
| ·烟草转化与转基因植株的获得 | 第41-43页 |
| ·转基因烟草的分子生物学鉴定 | 第43-44页 |
| ·GUS活性定性分析 | 第44-45页 |
| ·GUS活性定量分析 | 第45-46页 |
| ·转基因阳性植株T_0代遗传稳定性检测 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 附硕士期间发表论文 | 第55页 |