| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-20页 |
| ·类人胶原蛋白Ⅱ | 第8-9页 |
| ·增加外源蛋白的表达 | 第9-15页 |
| ·发酵工艺条件优化 | 第9-11页 |
| ·减少抑制外源蛋白表达的抑制物 | 第11-15页 |
| ·类人胶原蛋白Ⅱ的氨基酸含量及其表达 | 第15-17页 |
| ·大肠杆菌和类人胶原蛋白Ⅱ的氨基酸含量 | 第15-16页 |
| ·蛋白质负担 | 第16-17页 |
| ·应用Design-Expert7.0软件进行响应面优化 | 第17-18页 |
| ·响应面优化法 | 第17-18页 |
| ·用Design-Expert7.0软件响应面优化法简介 | 第18页 |
| ·本研究的目的、意义及内容 | 第18-20页 |
| 第二章 实验材料及方法 | 第20-31页 |
| ·菌种 | 第20页 |
| ·仪器和试剂 | 第20-22页 |
| ·试验方法 | 第22-24页 |
| ·菌种活化 | 第22页 |
| ·种子培养 | 第22页 |
| ·摇瓶实验 | 第22-23页 |
| ·发酵罐分批-补料培养 | 第23页 |
| ·菌体收集 | 第23-24页 |
| ·目标蛋白的分离 | 第24页 |
| ·分析方法 | 第24-31页 |
| ·菌体浓度(OD)测定方法 | 第24页 |
| ·菌体干重测定 | 第24页 |
| ·残糖测定 | 第24-25页 |
| ·乙酸含量的测定 | 第25页 |
| ·有机酸检测(HPLC法) | 第25-26页 |
| ·类人胶原蛋白Ⅱ含量测定 | 第26-31页 |
| 第三章 添加丙酮酸的摇瓶优化 | 第31-52页 |
| ·引言 | 第31页 |
| ·单因素实验 | 第31-32页 |
| ·丙酮酸添加量对类人胶原蛋白产量的影响 | 第31-32页 |
| ·丙酮酸添加时间对类人胶原蛋白产量的影响 | 第32页 |
| ·磷酸缓冲盐(K_2HPO_4-NaH_2PO_4)浓度对类人胶原蛋白产量的影响 | 第32页 |
| ·响应曲面优化法 | 第32-33页 |
| ·Planckett-Burman实验 | 第32-33页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第33页 |
| ·中心复合实验 | 第33页 |
| ·验证实验 | 第33页 |
| ·实验结果与分析 | 第33-51页 |
| ·单因素实验 | 第33-36页 |
| ·Planckett-Burman实验结果与分析 | 第36-38页 |
| ·最陡爬坡实验结果与分析 | 第38页 |
| ·中心复合实验结果与分析 | 第38-41页 |
| ·丙酮酸的添加对生物量的影响 | 第41-47页 |
| ·丙酮酸的添加对乙酸的影响 | 第47-50页 |
| ·验证实验 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 第四章 发酵罐培养 | 第52-60页 |
| ·发酵实验设计 | 第52-55页 |
| ·发酵参数及发酵方式的选择 | 第52-55页 |
| ·添加丙酮酸的实验设计 | 第55页 |
| ·实验结果与分析 | 第55-59页 |
| ·丙酮酸的添加量 | 第55-58页 |
| ·丙酮酸的添加时间 | 第58-59页 |
| ·本章小结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
