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鹅卵泡差异显示表达序列标签(ESTs)的筛选及分析

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-8页
引言第8-10页
文献综述第10-21页
 1. mRNA 差异显示方法的原理第10页
 2. mRNA 差异显示方法的优缺点及改进第10-16页
   ·mRNA 差异显示方法的优缺点第10-11页
   ·mRNA 差异显示方法的改进第11-16页
     ·mRNA 差异显示降低假阳性的策略第11-14页
     ·非放射性同位素银染差异显示方法的建立第14-16页
 3. mRNA 差异显示方法的应用第16-18页
   ·mRNA 差异显示技术克隆 FSH/LH 应答基因第16-17页
   ·mRNA 差异显示技术克隆排卵特异表达基因第17页
   ·mRNA 差异显示技术在禽类卵泡发育中的应用第17-18页
 4. mRNA 差异显示方法同其他方法的比较第18-20页
   ·mRNA 差异显示与消减杂交类技术第18-19页
   ·mRNA差异显示与基因表达的系列分析技术第19页
   ·mRNA差异显示和基因芯片第19-20页
 5. 结语第20-21页
试验研究第21-35页
 1 材料与方法第21-27页
   ·试验对象第21-23页
     ·样品采集第21页
     ·主要试剂第21-22页
     ·主要仪器第22页
     ·主要溶液的配制第22-23页
   ·总RNA的提取及RNA完整性检测第23页
     ·总 RNA 提取第23页
     ·RNA 的 DNase 消化第23页
   ·反转录第23页
   ·PCR 扩增第23-24页
   ·聚丙烯酰氨凝胶电泳及银染第24页
     ·非变性1096聚丙烯酰氨凝胶的配制第24页
     ·电泳第24页
     ·银染第24页
   ·差异片段的回收与再扩增第24页
   ·差异片段的克隆第24-26页
     ·DH5α感受态细胞的制备第24-25页
     ·连接第25页
     ·转化第25页
     ·质粒筛选第25页
     ·插入片段鉴定第25-26页
   ·差异片段的序列分析(Dot Blot 杂交)第26页
   ·Dot Blot 杂交第26-27页
     ·探针标记第26页
     ·预杂交第26页
     ·杂交第26页
     ·洗膜第26页
     ·检测第26-27页
 2 结果与分析第27-31页
   ·总RNA完整性检测第27页
   ·银染差异显示条件的优化第27-28页
   ·mRNA差异显示第28-29页
   ·差异片段的再扩增与产物回收第29页
   ·阳性克隆的 PCR 鉴定第29-30页
   ·序列分析与比对第30页
   ·Dot-blot 检测所扩片断的假阳性第30-31页
 3 讨论第31-33页
 4. 总结第33-35页
参考文献第35-43页
致谢第43-44页
附录第44-51页

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