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Beclin 1蛋白通过核定位以一种不依赖于自噬的方式参与辐照引起的DNA损伤修复

中文摘要第4-7页
abstract第7-10页
前言第13-17页
材料与方法第17-36页
    一、材料第17-20页
        1、主要试剂与耗材第17-18页
        2、主要仪器第18-19页
        3、药物和试剂配制第19-20页
        4.实验细胞第20页
    二、方法第20-36页
        1、细胞培养第20页
        2、Western blotting检测蛋白表达第20-23页
        3、CRISPR/ Cas9质粒的构建与扩增提取第23-27页
        4、质粒转染细胞及稳转细胞系的建立第27页
        5、成像流式细胞仪检测自噬水平以及DNA双链断裂水平第27页
        6、冰冻切片制作及扫描共聚焦显微镜拍摄第27-28页
        7、电镜的制样与观察第28页
        8、胞质及核蛋白的分离提取第28-29页
        9、彗星电泳第29页
        10、免疫共沉淀第29-30页
        11、流式细胞仪检测细胞周期第30页
        12、荧光定量PCR第30-32页
        13、siRNA干扰第32页
        14、构建突变质粒第32-35页
        15、统计学分析第35-36页
实验结果第36-61页
    一、Beclin 1 在小鼠发育过程中存在动态的核转位现象第36-38页
    二、构建beclin1基因敲除细胞系第38-40页
    三、beclin1敲除使细胞DNA双链断裂损伤增加第40-47页
    四、1-50 及 254-278 位氨基酸是介导Beclin 1 蛋白入核的入核序列第47-49页
    五、Beclin 1 在 DNA 损伤修复中的作用不依赖于其在自噬途径中的功能第49-56页
    六、Beclin 1 在细胞核中与DNA拓扑异构酶IIβ 存在结合作用第56-58页
    七、Beclin 1 参与DNA损伤修复作用依赖于DNA拓扑异构酶IIβ第58-61页
讨论第61-64页
综述第64-70页
参考文献第70-84页
博士学位期间公开发表的论文第84-86页
附录第86-87页
中英文缩略词汇表第87-88页
致谢第88-90页

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