摘要 | 第1-13页 |
ABSTRACT | 第13-15页 |
1 引言 | 第15-36页 |
·RNA 沉默介导的病毒抗性 | 第15-28页 |
·生物界RNA 沉默现象的发现 | 第15-17页 |
·RNA 沉默的机制 | 第17-19页 |
·RNA 沉默的重要特征 | 第19-20页 |
·参与RNA 沉默的细胞组分 | 第20-25页 |
·温度对于RNA 沉默的影响 | 第25-28页 |
·植物中RNA 沉默的病毒抑制 | 第28-35页 |
·植物编码的沉默抑制子的发现 | 第28页 |
·植物编码的沉默抑制子的特点 | 第28-29页 |
·植物病毒运动蛋白与RNA 沉默 | 第29-33页 |
·病毒沉默抑制子的应用 | 第33-35页 |
·本研究的立题依据和主要研究内容 | 第35-36页 |
2 材料与方法 | 第36-47页 |
·实验材料 | 第36-37页 |
·植物材料 | 第36页 |
·病毒毒源 | 第36页 |
·PCR 引物 | 第36-37页 |
·菌株 | 第37页 |
·各种生化试剂 | 第37页 |
·常用缓冲液及培养基的配制 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-47页 |
·植株材料的处理 | 第37页 |
·病毒蛋白含量的ELISA 检测 | 第37-38页 |
·小分子RNA 的NORTHERN BLOT 检测 | 第38-41页 |
·小分子RNA 的分离提取及电泳检测 | 第38-39页 |
·小分子RNA 的电泳 | 第39页 |
·转膜及烘膜 | 第39-40页 |
·探针的合成 | 第40-41页 |
·预杂交及杂交 | 第41页 |
·农杆菌介导转化烟草 | 第41-42页 |
·转基因植株的PCR 检测 | 第42页 |
·转基因植株的NORTHERN BLOT 检测 | 第42-46页 |
·植物总RNA 的提取 | 第42-44页 |
·在含有甲醛的凝胶上进行RNA 电泳 | 第44-45页 |
·转膜及烘膜 | 第45页 |
·探针的合成 | 第45页 |
·预杂交及杂交 | 第45-46页 |
·检测抗性传导的嫁接试验 | 第46-47页 |
3 结果与分析 | 第47-59页 |
·温度对病毒侵染引起的RNA 沉默的影响 | 第47-50页 |
·不同温度处理植株感病症状 | 第47-48页 |
·不同温度处理植株体内病毒蛋白含量变化 | 第48-49页 |
·临界温度植株体内小分子RNA 的NORTHERN BLOT 分析 | 第49-50页 |
·RNA 沉默介导病毒抗性的传导 | 第50-59页 |
·非翻译的马铃薯X 病毒25KD 运动蛋白转基因植株的获得 | 第50-53页 |
·转基因植株的获得 | 第50-52页 |
·PCR 鉴定 | 第52-53页 |
·PVX 抗病性鉴定 | 第53页 |
·转基因MRNA 表达与抗病性的关系 | 第53-55页 |
·RNA 介导的病毒抗性传导 | 第55-59页 |
·利用单嫁接研究RNA 介导抗性在不同抗病型植株间的传导 | 第55-57页 |
·利用双嫁接研究病毒在RNA 介导的抗性植株中的传播 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-64页 |
·温度对于病毒诱导的RNA 沉默的影响 | 第59-60页 |
·转基因MRNA 表达与抗病性 | 第60-61页 |
·RNA 介导抗性的传导 | 第61-62页 |
·病毒在RNA 介导的高度抗病植株中的传送 | 第62-64页 |
5 结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-77页 |
附录Ⅰ 常用缓冲液及培养基的配制 | 第77-83页 |
附录Ⅱ 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第83-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
硕士研究生阶段发表的综述及论文 | 第86页 |