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温度对病毒介导的RNA沉默的影响及转基因植株病毒抗性的传导

摘要第1-13页
ABSTRACT第13-15页
1 引言第15-36页
   ·RNA 沉默介导的病毒抗性第15-28页
     ·生物界RNA 沉默现象的发现第15-17页
     ·RNA 沉默的机制第17-19页
     ·RNA 沉默的重要特征第19-20页
     ·参与RNA 沉默的细胞组分第20-25页
     ·温度对于RNA 沉默的影响第25-28页
   ·植物中RNA 沉默的病毒抑制第28-35页
     ·植物编码的沉默抑制子的发现第28页
     ·植物编码的沉默抑制子的特点第28-29页
     ·植物病毒运动蛋白与RNA 沉默第29-33页
     ·病毒沉默抑制子的应用第33-35页
   ·本研究的立题依据和主要研究内容第35-36页
2 材料与方法第36-47页
   ·实验材料第36-37页
     ·植物材料第36页
     ·病毒毒源第36页
     ·PCR 引物第36-37页
     ·菌株第37页
     ·各种生化试剂第37页
     ·常用缓冲液及培养基的配制第37页
   ·实验方法第37-47页
     ·植株材料的处理第37页
     ·病毒蛋白含量的ELISA 检测第37-38页
     ·小分子RNA 的NORTHERN BLOT 检测第38-41页
       ·小分子RNA 的分离提取及电泳检测第38-39页
       ·小分子RNA 的电泳第39页
       ·转膜及烘膜第39-40页
       ·探针的合成第40-41页
       ·预杂交及杂交第41页
     ·农杆菌介导转化烟草第41-42页
     ·转基因植株的PCR 检测第42页
     ·转基因植株的NORTHERN BLOT 检测第42-46页
       ·植物总RNA 的提取第42-44页
       ·在含有甲醛的凝胶上进行RNA 电泳第44-45页
       ·转膜及烘膜第45页
       ·探针的合成第45页
       ·预杂交及杂交第45-46页
     ·检测抗性传导的嫁接试验第46-47页
3 结果与分析第47-59页
   ·温度对病毒侵染引起的RNA 沉默的影响第47-50页
     ·不同温度处理植株感病症状第47-48页
     ·不同温度处理植株体内病毒蛋白含量变化第48-49页
     ·临界温度植株体内小分子RNA 的NORTHERN BLOT 分析第49-50页
   ·RNA 沉默介导病毒抗性的传导第50-59页
     ·非翻译的马铃薯X 病毒25KD 运动蛋白转基因植株的获得第50-53页
       ·转基因植株的获得第50-52页
       ·PCR 鉴定第52-53页
       ·PVX 抗病性鉴定第53页
     ·转基因MRNA 表达与抗病性的关系第53-55页
     ·RNA 介导的病毒抗性传导第55-59页
       ·利用单嫁接研究RNA 介导抗性在不同抗病型植株间的传导第55-57页
       ·利用双嫁接研究病毒在RNA 介导的抗性植株中的传播第57-59页
4 讨论第59-64页
   ·温度对于病毒诱导的RNA 沉默的影响第59-60页
   ·转基因MRNA 表达与抗病性第60-61页
   ·RNA 介导抗性的传导第61-62页
   ·病毒在RNA 介导的高度抗病植株中的传送第62-64页
5 结论第64-65页
参考文献第65-77页
附录Ⅰ 常用缓冲液及培养基的配制第77-83页
附录Ⅱ 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器第83-85页
致谢第85-86页
硕士研究生阶段发表的综述及论文第86页

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