| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-31页 |
| 1 我国水产养殖概况 | 第11-12页 |
| 2 鱼类细菌性疾病研究情况 | 第12-13页 |
| 3 鱼类哈维氏弧菌的研究概况 | 第13-15页 |
| ·哈维氏弧菌的感染途径 | 第13页 |
| ·哈维氏弧菌研究历史及分布 | 第13-14页 |
| ·哈维氏弧菌的致病因子 | 第14-15页 |
| 4 鱼类细菌病的诊断及病原菌鉴定技术 | 第15-18页 |
| ·表型快速鉴定技术——选择性培养基 | 第15页 |
| ·血清学快速检测技术溶血素 | 第15-16页 |
| ·细菌凝集试验 | 第15页 |
| ·葡萄球菌蛋白A 协同凝集试验 | 第15-16页 |
| ·免疫荧光抗体技术 | 第16页 |
| ·酶联免疫吸附检测方法（ELISA 法） | 第16页 |
| ·免疫印记技术（Immunoblotting, Western-blot） | 第16页 |
| ·分子生物学检测技术 | 第16-17页 |
| ·PCR 技术 | 第16-17页 |
| ·核酸杂交技术 | 第17页 |
| ·快速细菌鉴定的方法 | 第17-18页 |
| ·API-20E 系统 | 第17页 |
| ·BIOLOG 系统 | 第17页 |
| ·FAME（Fatty Acid Methyl Ester）系统 | 第17-18页 |
| 5 鱼类弧菌病的致病因子 | 第18-29页 |
| ·弧菌中的主要致病因子 | 第18-23页 |
| ·toxR,zot, toxS, tcpA, flaB, flaC 等在弧菌中的研究进展 | 第23-29页 |
| ·toxR 与toxS 基因 | 第23-25页 |
| ·zot 基因 | 第25-26页 |
| ·tcpA 基因 | 第26页 |
| ·flgB、flgC 基因 | 第26-29页 |
| 6 本论文研究的目的和意义 | 第29-31页 |
| 第二章 利用toxR 检测哈维氏弧菌方法的建立 | 第31-46页 |
| 1 实验材料和仪器 | 第32-36页 |
| ·菌株 | 第32-35页 |
| ·试剂和仪器 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35-36页 |
| 2 实验方法 | 第36-41页 |
| ·模板DNA 的制备 | 第36页 |
| ·哈维氏弧菌toxR 基因的PCR 扩增 | 第36-38页 |
| ·敏感性实验 | 第38页 |
| ·海水养殖病鱼中哈维氏弧菌检测 | 第38页 |
| ·对PCR 鉴定的哈维氏弧菌用165 rRNA 测序验证 | 第38-41页 |
| ·哈维氏弧菌的165 rRNA 基因的PCR 扩增 | 第38-39页 |
| ·PCR 扩增产物的检测回收 | 第39页 |
| ·PCR 扩增产物的连接反应 | 第39页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第39-40页 |
| ·质粒的转化,蓝白斑筛选阳性克隆及质粒提取 | 第40-41页 |
| ·转化质粒的鉴定、测序，并建立系统关系进化树 | 第41页 |
| 3 结果 | 第41-44页 |
| ·敏感性实验 | 第41页 |
| ·toxR 基因的PCR 扩增结果 | 第41-43页 |
| ·海水养殖病鱼中哈维氏弧菌检测 | 第43页 |
| ·用PCR 鉴定的哈维氏弧菌的165 rRNA 测序验证 | 第43-44页 |
| ·转化质粒的鉴定、测序 | 第43-44页 |
| ·建立系统关系进化树 | 第44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 toxR 基因的克隆测序 | 第46-55页 |
| 1 实验材料和仪器 | 第47页 |
| ·菌株 | 第47页 |
| ·试剂和仪器 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| 2 实验方法 | 第47-55页 |
| ·LAPCR 的原理 | 第47-48页 |
| ·具体步骤 | 第48-50页 |
| ·LAPCR 扩增片段的克隆测序 | 第50-51页 |
| ·PCR 扩增产物的检测回收 | 第50页 |
| ·PCR 扩增产物的连接反应 | 第50页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第50页 |
| ·质粒的转化,蓝白斑的筛选阳性克隆,质粒提取 | 第50页 |
| ·pUCm-T/toxR 转化质粒的鉴定 | 第50-51页 |
| 3 实验结果 | 第51-53页 |
| ·用限制性内切酶Sau3AI 将V18645DNA 酶切的结果 | 第51页 |
| ·LAPCR 扩增结果 | 第51-52页 |
| ·克隆测序结果 | 第52页 |
| ·哈维氏弧菌的toxR 与其他弧菌的toxR 序列的比较分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 五种弧菌毒力基因－zot, toxS, tcpA,flaB, flaC 在哈维氏弧菌中分布情的研究 | 第55-69页 |
| 1 材料与方法 | 第57-59页 |
| ·实验菌株 | 第57页 |
| ·DNA 提取 | 第57页 |
| ·zot, toxS, tcpA,flaB, flaC 的PCR 扩增 | 第57-59页 |
| ·引物设计 | 第57-58页 |
| ·PCR 组成体系及循环参数 | 第58-59页 |
| ·注射斑马鱼的感染实验 | 第59页 |
| 2 结果 | 第59-67页 |
| ·zot, toxS, tcpA,flaB, flaC 的PCR 扩增结果 | 第59-67页 |
| ·注射斑马鱼的结果 | 第67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-84页 |
| 发表和撰写的文章 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
