引言 | 第1-11页 |
文献回顾 | 第11-19页 |
一、抗菌肽 | 第11-15页 |
二、Cathelicidins 家族 | 第15页 |
三、hCAP-18/LL-37 的发现及其基因结构 | 第15-16页 |
四、hCAP-18/LL-37 的表达与分布 | 第16页 |
五、hCAP-18/LL-37 的蛋白质结构及功能 | 第16-19页 |
第一章 实验研究 | 第19-52页 |
第一节 hCAP-18/LL-37 基因克隆及真核表达载体 pEGFP-c1-LL-37的构建 | 第19-33页 |
一、实验材料 | 第19-21页 |
二、实验方法 | 第21-27页 |
1. hCAP-18/LL-37 特异性PCR 引物设计与合成 | 第21-22页 |
2. hCAP-18/LL-37 基因的PCR 扩增 | 第22页 |
3. hCAP-18/LL-37 基因片段的TA 克隆 | 第22-25页 |
4. 真核表达载体pEGFP-c1-LL-37 重组基因的构建 | 第25-26页 |
5. pEGFP-c1-LL-37 重组基因的纯化 | 第26-27页 |
三、实验结果 | 第27-33页 |
1. hCAP-18/LL-37cDNA 的获得 | 第27页 |
2. PMD18-T-LL-37 重组基因的鉴定 | 第27-29页 |
3. 真核表达载体pEGFP-c1-LL-37 重组基因的鉴定 | 第29-32页 |
4. pEGFP-c1-LL-37 重组基因的纯化 | 第32-33页 |
第二节 重组基因pEGFP-c1-LL-37 瞬时转染MCF-7 及对人乳腺癌细胞MCF-7 生长的影响 | 第33-52页 |
一、实验材料 | 第33-35页 |
二、实验方法 | 第35-42页 |
1. 检测hCAP-18/LL-37 细胞内表达的特异性 PCR 引物设计与合成 | 第35页 |
2. 不同肿瘤细胞株中抗菌肽hCAP-18/LL-37 表达检测 | 第35-37页 |
3. 重组基因pEGFP-c1-LL-37 瞬时转染MCF-7 细胞 | 第37-39页 |
4. 重组基因pEGFP-c1-LL-37 瞬时转染对MCF-7 生长影响的测定 | 第39-42页 |
三、实验结果 | 第42-52页 |
1. 肿瘤细胞中hCAP-18/LL-37 基因的表达 | 第42-43页 |
2. 重组基因瞬时转染情况 | 第43-46页 |
3. 重组基因pEGFP-c1-LL-37瞬时转染对MCF-7生长的影响 | 第46-52页 |
讨论 | 第52-59页 |
小结 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
中文摘要 | 第65-68页 |
Abstract | 第68-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
攻读硕士期间已(待)发表的文章 | 第72页 |