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葡萄糖氧化酶基因植物表达载体的构建及对马铃薯的初步转化

1 引言第1-15页
   ·马铃薯晚疫病研究进展第6-9页
     ·马铃薯晚疫病的发生、传播、危害第6-8页
     ·马铃薯晚疫病的防治第8页
     ·马铃薯抗晚疫病育种研究第8-9页
   ·转基因技术在马铃薯晚疫病抗病育种中的应用第9-11页
     ·转基因技术在植物遗传育种中的特点与方法第9-10页
     ·转基因技术在马铃薯晚疫病抗病育种中的应用第10-11页
   ·农杆菌介导的基因转化机理第11-13页
     ·T-DNA 转移机理第12-13页
     ·农杆菌Ti 质粒载体系统第13页
   ·葡萄糖氧化酶基因(GOD 基因)研究进展第13-15页
     ·葡萄糖氧化酶及其应用第13-14页
     ·葡萄糖氧化酶基因(GOD 基因)的应用第14-15页
   ·研究的目的和意义第15页
2 材料与方法第15-32页
   ·实验材料第15-16页
     ·供试马铃薯品种第16页
     ·供试质粒及药剂第16页
     ·引物第16页
   ·实验使用的主要仪器、设备第16页
   ·试验方法第16-32页
     ·葡萄糖氧化酶基因植物表达载体的构建第16-22页
     ·重组质粒pROKII/GO 转入农杆菌LBA4404第22-25页
     ·农杆菌LBA4404 介导将目的基因GO 转入马铃薯第25-32页
3 结果与分析第32-44页
   ·葡萄糖氧化酶基因植物表达载体的构建第32-36页
     ·pMD18-T/GO 转化DH5α感受态细胞第32-33页
     ·pMD18-T/GO 质粒 HindⅢ酶切、Klenow 补平后再用 BamHI 对其进行酶切,以切取GO 基因第33页
     ·pROKII 的BamHI/SmaI 双酶切第33-34页
     ·pROKII/GO 植物表达载体的构建第34-35页
     ·重组质粒pROKII/GO 的PCR 检测第35-36页
   ·重组质粒pROKII/GO 转化农杆菌LBA4404第36-37页
     ·重组质粒pROKII/GO 转入农杆菌LBA4404 感受态细胞第36页
     ·转入农杆菌LBA4404 感受态细胞的重组质粒pROKII/GO 的PCR 检测第36-37页
   ·采用叶盘法转化马铃薯第37-38页
   ·采用茎段侵染法转化马铃薯第38-39页
   ·采用叶盘法结合不同培养基配方转化马铃薯第39-41页
   ·侵染时间对马铃薯转化的影响第41-42页
   ·预培养对马铃薯转化的影响第42-43页
   ·愈伤组织的鉴定第43-44页
4 讨论第44-47页
   ·使用HindⅢ酶对pMD18-T/GO 质粒进行酶切第44-45页
   ·PCR 反应中采用LA Taq DNA 聚合酶的效果更明显第45页
   ·利用农杆菌介导的方法转化植物的影响因素第45-47页
5 结论第47-48页
致谢第48-49页
参考文献第49-54页
附录第54-56页
作者简介第56页

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