Abstract | 第1-12页 |
摘要 | 第12-14页 |
一.文献综述 | 第14-32页 |
1 卡拉胶 | 第14-20页 |
·卡拉胶的结构与分类 | 第14-17页 |
·卡拉胶的来源 | 第17页 |
·卡拉胶的生物合成 | 第17页 |
·卡拉胶的胶凝特性 | 第17-18页 |
·卡拉胶的应用 | 第18-20页 |
·卡拉胶在医药方面的应用 | 第18-20页 |
·卡拉胶在工业、食品方面的应用 | 第20页 |
2 卡拉胶酶 | 第20-31页 |
·卡拉胶酶的分类及来源 | 第21页 |
·酶解卡拉胶 | 第21页 |
·卡拉胶酶的作用机理 | 第21-25页 |
·卡拉胶酶酶活性的检测方法 | 第25页 |
·卡拉胶酶的分离纯化与性质研究 | 第25-30页 |
·卡拉胶酶的应用 | 第30-31页 |
3 小结 | 第31-32页 |
二、菌株的分离鉴定 | 第32-41页 |
1 材料与方法 | 第32-37页 |
·材料 | 第32页 |
·样品的采集 | 第32页 |
·菌种的分离 | 第32-33页 |
·富集培养 | 第32页 |
·初筛 | 第32-33页 |
·复筛 | 第33页 |
·卡拉胶酶活力测定 | 第33页 |
·菌株形态的观察 | 第33页 |
·16S rRNA基因的克隆与序列测定 | 第33-37页 |
·细菌DNA的制备 | 第33-34页 |
·质粒pBlue-script Ⅱ KS(+)的制备 | 第34-35页 |
·pBlue-script Ⅱ KS(+)—T载体的制备 | 第35-36页 |
·16S rRNA基因的PCR扩增及PCR产物的克隆 | 第36页 |
·序列测定 | 第36-37页 |
·数据分析 | 第37页 |
2 结果 | 第37-40页 |
·筛选结果 | 第37页 |
·形态特征 | 第37页 |
·生长条件 | 第37-38页 |
·16S rRNA基因的克隆 | 第38页 |
·16S rRNA基因序列分析和系统发育 | 第38-40页 |
3 讨论 | 第40-41页 |
三、菌株QY201的发酵条件优化 | 第41-45页 |
1 材料与方法 | 第41-42页 |
·材料 | 第41页 |
·培养条件 | 第41页 |
·培养时间、培养基体积、转速的正交实验 | 第41页 |
·培养基成分的正交实验 | 第41页 |
·卡拉胶酶活力测定 | 第41-42页 |
2 结果 | 第42-44页 |
·培养时间、培养基体积、转速优化 | 第42页 |
·培养基成分优化 | 第42-44页 |
3 讨论 | 第44-45页 |
四、卡拉胶酶的分离纯化与性质分析 | 第45-60页 |
1 材料和方法 | 第45-50页 |
·材料和仪器 | 第45页 |
·粗酶液的制备 | 第45-46页 |
·酶的分离纯化 | 第46-47页 |
·丙酮沉淀粗分离 | 第46页 |
·离子交换层析 | 第46页 |
·凝胶过滤层析 | 第46-47页 |
·酶活检测方法 | 第47页 |
·蛋白质浓度测定方法 | 第47页 |
·SDS-PAGE | 第47页 |
·PAGE糖电泳 | 第47-48页 |
·卡拉胶酶的生化性质检测 | 第48-49页 |
·反应最适温度 | 第48页 |
·温度对酶活稳定性的影响 | 第48页 |
·反应最适pH | 第48页 |
·pH对酶活稳定性的影响 | 第48页 |
·EDTA、金属离子对酶活性的影响 | 第48-49页 |
·底物特异性实验 | 第49页 |
·Zomygram法测定酶活 | 第49页 |
·DNS法、紫外吸收法测定酶活 | 第49页 |
·Km值的测定 | 第49页 |
·卡拉胶酶的产物分析 | 第49-50页 |
2 结果 | 第50-58页 |
·ι-卡拉胶酶分离纯化 | 第50-52页 |
·离子交换层析 | 第50-51页 |
·凝胶过滤层析 | 第51-52页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第52页 |
·卡拉胶酶的性质分析 | 第52-57页 |
·温度对酶活性的影响 | 第52-54页 |
·pH对酶活性的影响 | 第54页 |
·EDTA、金属离子对酶活性的影响 | 第54-55页 |
·酶的底物特异性 | 第55-57页 |
·Zomygram法测定酶活 | 第55-56页 |
·酶活力测定 | 第56-57页 |
·Km值的测定 | 第57页 |
·卡拉胶酶的降解产物分析 | 第57-58页 |
3 讨论 | 第58-60页 |
五、总结与展望 | 第60-61页 |
六、参考文献 | 第61-67页 |
七、致谢 | 第67-68页 |
八、发表文章 | 第68页 |