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海洋细菌Cellulophaga sp. QY201的卡拉胶酶研究

Abstract第1-12页
摘要第12-14页
一.文献综述第14-32页
 1 卡拉胶第14-20页
   ·卡拉胶的结构与分类第14-17页
   ·卡拉胶的来源第17页
   ·卡拉胶的生物合成第17页
   ·卡拉胶的胶凝特性第17-18页
   ·卡拉胶的应用第18-20页
     ·卡拉胶在医药方面的应用第18-20页
     ·卡拉胶在工业、食品方面的应用第20页
 2 卡拉胶酶第20-31页
   ·卡拉胶酶的分类及来源第21页
   ·酶解卡拉胶第21页
   ·卡拉胶酶的作用机理第21-25页
   ·卡拉胶酶酶活性的检测方法第25页
   ·卡拉胶酶的分离纯化与性质研究第25-30页
   ·卡拉胶酶的应用第30-31页
 3 小结第31-32页
二、菌株的分离鉴定第32-41页
 1 材料与方法第32-37页
   ·材料第32页
   ·样品的采集第32页
   ·菌种的分离第32-33页
     ·富集培养第32页
     ·初筛第32-33页
     ·复筛第33页
   ·卡拉胶酶活力测定第33页
   ·菌株形态的观察第33页
   ·16S rRNA基因的克隆与序列测定第33-37页
     ·细菌DNA的制备第33-34页
     ·质粒pBlue-script Ⅱ KS(+)的制备第34-35页
     ·pBlue-script Ⅱ KS(+)—T载体的制备第35-36页
     ·16S rRNA基因的PCR扩增及PCR产物的克隆第36页
     ·序列测定第36-37页
     ·数据分析第37页
 2 结果第37-40页
   ·筛选结果第37页
   ·形态特征第37页
   ·生长条件第37-38页
   ·16S rRNA基因的克隆第38页
   ·16S rRNA基因序列分析和系统发育第38-40页
 3 讨论第40-41页
三、菌株QY201的发酵条件优化第41-45页
 1 材料与方法第41-42页
   ·材料第41页
   ·培养条件第41页
   ·培养时间、培养基体积、转速的正交实验第41页
   ·培养基成分的正交实验第41页
   ·卡拉胶酶活力测定第41-42页
 2 结果第42-44页
   ·培养时间、培养基体积、转速优化第42页
   ·培养基成分优化第42-44页
 3 讨论第44-45页
四、卡拉胶酶的分离纯化与性质分析第45-60页
 1 材料和方法第45-50页
   ·材料和仪器第45页
   ·粗酶液的制备第45-46页
   ·酶的分离纯化第46-47页
     ·丙酮沉淀粗分离第46页
     ·离子交换层析第46页
     ·凝胶过滤层析第46-47页
   ·酶活检测方法第47页
   ·蛋白质浓度测定方法第47页
   ·SDS-PAGE第47页
   ·PAGE糖电泳第47-48页
   ·卡拉胶酶的生化性质检测第48-49页
     ·反应最适温度第48页
     ·温度对酶活稳定性的影响第48页
     ·反应最适pH第48页
     ·pH对酶活稳定性的影响第48页
     ·EDTA、金属离子对酶活性的影响第48-49页
     ·底物特异性实验第49页
       ·Zomygram法测定酶活第49页
       ·DNS法、紫外吸收法测定酶活第49页
     ·Km值的测定第49页
   ·卡拉胶酶的产物分析第49-50页
 2 结果第50-58页
   ·ι-卡拉胶酶分离纯化第50-52页
     ·离子交换层析第50-51页
     ·凝胶过滤层析第51-52页
     ·SDS-PAGE电泳第52页
   ·卡拉胶酶的性质分析第52-57页
     ·温度对酶活性的影响第52-54页
     ·pH对酶活性的影响第54页
     ·EDTA、金属离子对酶活性的影响第54-55页
     ·酶的底物特异性第55-57页
       ·Zomygram法测定酶活第55-56页
       ·酶活力测定第56-57页
     ·Km值的测定第57页
   ·卡拉胶酶的降解产物分析第57-58页
 3 讨论第58-60页
五、总结与展望第60-61页
六、参考文献第61-67页
七、致谢第67-68页
八、发表文章第68页

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