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番茄叶霉菌基因CfHNNI1诱导植物非寄主抗病性的功能分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 植物非寄主抗性研究进展:文献综述第11-17页
 1 植物非寄主抗性第11-14页
   ·非寄主抗性概念第11页
   ·病原物和非寄主植物互作相关因子第11-13页
   ·非寄主抗性产生机制第13-14页
 2 番茄叶霉菌诱导的非寄主抗性第14-17页
   ·番茄和叶霉菌互作第14-15页
   ·番茄叶霉菌基因CfHNNI1对寄主和非寄主植物坏死和抗病性的诱导作用第15-17页
第二章 番茄叶霉菌基因CfHNNI1的表达诱导非寄主植物产生坏死第17-24页
 1 材料与方法第17-20页
   ·材料第17-18页
     ·供试植物第17-18页
     ·菌种、质粒、酶与抗生素第18页
     ·培养基第18页
   ·方法第18-20页
     ·番茄叶霉菌cDNA CfHNNI1与His标签的融合序列His-CfHNNI1的克隆第18-20页
     ·His-CfHNNI1植物表达载体的构建第20页
     ·农杆菌接种液的准备第20页
     ·农杆菌接种第20页
 2 结果与分析第20-23页
   ·pYL156::His-CfHNNI1载体的构建第20-21页
   ·CfHNNI1基因的表达导致非寄主植物表现坏死反应第21-23页
 3 讨论第23-24页
   ·CfHNNI1能诱发非茄科非寄主植物产生坏死反应第23页
   ·CfHNNI1诱发植物产生坏死反应的可能机制第23-24页
第三章 CfHNNI1转基因烟草表现对烟草黑胫病的强烈抗性第24-36页
 1 材料与方法第24-30页
   ·材料第24-26页
     ·转化的受体植物及无菌苗的培养第24页
     ·培养基第24-25页
     ·菌种、质粒、酶与抗生素第25页
     ·供试病原菌第25-26页
   ·方法第26-30页
     ·CTAB法提取烟草基因组DNA第26页
     ·烟草HSR203J基因启动子序列的PCR扩增第26页
     ·含HSR203J基因启动子序列的pCHF_3载体pCHF_3-hsr的构建第26-27页
     ·双元表达载体pCHF_3-hsr::His-CfHNNI1的构建第27页
     ·CfHNNI1转基因烟草的获得第27-28页
     ·转基因烟草植株的PCR检测分析第28页
     ·转基因烟草植株的Southern检测分析第28-29页
     ·CfHNNI1转基因烟草植株的抗病性测定第29页
       ·烟草黑胫病菌的培养第29页
       ·烟草黑胫病菌的接种第29页
     ·Northern分析第29-30页
 2 结果与分析第30-34页
   ·CfHNNI1转基因结构pCHF_3-hsr::His-CfHNNI1的构建及鉴定第30页
   ·CfHNNI1转基因烟草植株的获得与分子鉴定第30-33页
   ·接种烟草黑胫病菌诱导CfHNNI1,HSR203J和PR基因的表达,并提高对烟草黑胫病菌侵染的抗性第33-34页
 3 讨论第34-36页
第四章 番茄叶霉菌CJHNNI1中不同开放阅读框坏死诱导功能分析第36-41页
 1 材料与方法第36-37页
   ·材料第36页
   ·方法第36-37页
     ·CfHNNI1不同ORF序列的克隆第36-37页
     ·农杆菌接种方法第37页
 2 结果与分析第37-39页
 3 讨论第39-41页
第五章 番茄叶霉菌基因CfHNNI1的原核表达第41-49页
 1 材料与方法第41-46页
   ·材料第41-43页
     ·菌种、质粒第41页
     ·酶、抗生素第41页
     ·试剂及其配制第41-43页
   ·方法第43-46页
     ·原核表达载体pET-30a::CfHNNI1的构建第43页
     ·CfHNNI1蛋白的诱导表达及纯化第43-46页
       ·CfHNNI1蛋白的诱导表达第43-44页
       ·SDS聚丙烯酰胺凝胶的灌制与SDS-PAGE电泳第44-45页
       ·CfHNNI1融合蛋白的纯化第45-46页
 2 结果与分析第46-48页
   ·番茄叶霉菌基因CfHNNI1在大肠杆菌中的表达第46-48页
   ·CfHNNI1蛋白的纯化第48页
 3 讨论第48-49页
参考文献第49-54页

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