摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 植物非寄主抗性研究进展:文献综述 | 第11-17页 |
1 植物非寄主抗性 | 第11-14页 |
·非寄主抗性概念 | 第11页 |
·病原物和非寄主植物互作相关因子 | 第11-13页 |
·非寄主抗性产生机制 | 第13-14页 |
2 番茄叶霉菌诱导的非寄主抗性 | 第14-17页 |
·番茄和叶霉菌互作 | 第14-15页 |
·番茄叶霉菌基因CfHNNI1对寄主和非寄主植物坏死和抗病性的诱导作用 | 第15-17页 |
第二章 番茄叶霉菌基因CfHNNI1的表达诱导非寄主植物产生坏死 | 第17-24页 |
1 材料与方法 | 第17-20页 |
·材料 | 第17-18页 |
·供试植物 | 第17-18页 |
·菌种、质粒、酶与抗生素 | 第18页 |
·培养基 | 第18页 |
·方法 | 第18-20页 |
·番茄叶霉菌cDNA CfHNNI1与His标签的融合序列His-CfHNNI1的克隆 | 第18-20页 |
·His-CfHNNI1植物表达载体的构建 | 第20页 |
·农杆菌接种液的准备 | 第20页 |
·农杆菌接种 | 第20页 |
2 结果与分析 | 第20-23页 |
·pYL156::His-CfHNNI1载体的构建 | 第20-21页 |
·CfHNNI1基因的表达导致非寄主植物表现坏死反应 | 第21-23页 |
3 讨论 | 第23-24页 |
·CfHNNI1能诱发非茄科非寄主植物产生坏死反应 | 第23页 |
·CfHNNI1诱发植物产生坏死反应的可能机制 | 第23-24页 |
第三章 CfHNNI1转基因烟草表现对烟草黑胫病的强烈抗性 | 第24-36页 |
1 材料与方法 | 第24-30页 |
·材料 | 第24-26页 |
·转化的受体植物及无菌苗的培养 | 第24页 |
·培养基 | 第24-25页 |
·菌种、质粒、酶与抗生素 | 第25页 |
·供试病原菌 | 第25-26页 |
·方法 | 第26-30页 |
·CTAB法提取烟草基因组DNA | 第26页 |
·烟草HSR203J基因启动子序列的PCR扩增 | 第26页 |
·含HSR203J基因启动子序列的pCHF_3载体pCHF_3-hsr的构建 | 第26-27页 |
·双元表达载体pCHF_3-hsr::His-CfHNNI1的构建 | 第27页 |
·CfHNNI1转基因烟草的获得 | 第27-28页 |
·转基因烟草植株的PCR检测分析 | 第28页 |
·转基因烟草植株的Southern检测分析 | 第28-29页 |
·CfHNNI1转基因烟草植株的抗病性测定 | 第29页 |
·烟草黑胫病菌的培养 | 第29页 |
·烟草黑胫病菌的接种 | 第29页 |
·Northern分析 | 第29-30页 |
2 结果与分析 | 第30-34页 |
·CfHNNI1转基因结构pCHF_3-hsr::His-CfHNNI1的构建及鉴定 | 第30页 |
·CfHNNI1转基因烟草植株的获得与分子鉴定 | 第30-33页 |
·接种烟草黑胫病菌诱导CfHNNI1,HSR203J和PR基因的表达,并提高对烟草黑胫病菌侵染的抗性 | 第33-34页 |
3 讨论 | 第34-36页 |
第四章 番茄叶霉菌CJHNNI1中不同开放阅读框坏死诱导功能分析 | 第36-41页 |
1 材料与方法 | 第36-37页 |
·材料 | 第36页 |
·方法 | 第36-37页 |
·CfHNNI1不同ORF序列的克隆 | 第36-37页 |
·农杆菌接种方法 | 第37页 |
2 结果与分析 | 第37-39页 |
3 讨论 | 第39-41页 |
第五章 番茄叶霉菌基因CfHNNI1的原核表达 | 第41-49页 |
1 材料与方法 | 第41-46页 |
·材料 | 第41-43页 |
·菌种、质粒 | 第41页 |
·酶、抗生素 | 第41页 |
·试剂及其配制 | 第41-43页 |
·方法 | 第43-46页 |
·原核表达载体pET-30a::CfHNNI1的构建 | 第43页 |
·CfHNNI1蛋白的诱导表达及纯化 | 第43-46页 |
·CfHNNI1蛋白的诱导表达 | 第43-44页 |
·SDS聚丙烯酰胺凝胶的灌制与SDS-PAGE电泳 | 第44-45页 |
·CfHNNI1融合蛋白的纯化 | 第45-46页 |
2 结果与分析 | 第46-48页 |
·番茄叶霉菌基因CfHNNI1在大肠杆菌中的表达 | 第46-48页 |
·CfHNNI1蛋白的纯化 | 第48页 |
3 讨论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |