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鸡类胰岛素生长因子-Ⅰ基因单碱基突变对该基因转录、表达以及对生长、屠体性状的影响

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
缩略词语表第10-12页
第一章 文献综述第12-41页
   ·类胰岛素生长因子-I(IGF-I)相关知识介绍第12-28页
     ·IGF的发现及总体功能第12-19页
     ·IGF对多种组织、器官生长、发育的调节作用第19-28页
   ·有关数量性状座位(QTL)及QTL基因相关知识的介绍第28-32页
   ·荧光定量PCR技术的原理与应用第32-38页
     ·荧光定量PCR的发展第32页
     ·实时荧光定量PCR原理第32-38页
   ·转录因子CDXA相关知识简介第38-41页
第二章 材料与方法第41-62页
   ·实验材料第41-45页
     ·实验动物第41页
     ·菌株及质粒第41页
     ·实验用酶第41页
     ·其它药品及试剂第41-42页
     ·培养基的配制第42页
     ·试剂的配制第42-44页
     ·主要仪器设备第44-45页
   ·实验方法第45-62页
     ·12%非变性聚丙烯酰胺凝胶(25ml体积,0.1cm胶条)制作及电泳第45页
     ·硝酸银染色方法第45-46页
     ·感受态细胞的制备、效价的测定及质粒DNA的转化第46-48页
     ·质粒DNA的制备第48-52页
     ·外源片段的回收方法第52-53页
     ·连接反应体系的确定第53页
     ·重组质粒的快速鉴定Cracking法:第53-54页
     ·测序反应程序:第54-55页
     ·外源蛋白在大肠杆菌内的诱导表达回收第55-56页
     ·组织DNA的提取:第56-57页
     ·SDS-PAGE电泳第57页
     ·利用TRIZOL试剂盒提取总RNA第57-58页
     ·cDNA合成第58-59页
     ·Southern blotting第59-61页
     ·统计模型与分析第61-62页
第三章 实验结果第62-79页
   ·突变检测以及突变与生长、屠体性状之间的关系第62-64页
   ·突变导致IGF-I基因转录因子结合位点发生变化第64-73页
     ·突变位点附近碱基序列在几个物种中高度保守,突变可能导致增加转录因子第64-68页
     ·电泳迁移率变动实验分析第68-73页
   ·实时定量PCR技术检测IGF-I基因的转录水平。第73-77页
   ·放射性免疫方法检测IGF-I基因的蛋白水平第77页
   ·细胞培养证明IGF-I促进小肠平滑肌细胞生长第77-79页
第四章 分析与讨论第79-86页
   ·突变与生长、屠体性状之间的关系第79-82页
   ·突变导致IGF-I基因转录、表达水平上升第82-83页
   ·突变促进了肠组织的发育,进而加快了生长速度第83-84页
   ·突变与影响生长性状QTL之间的关系第84-86页
结论第86-87页
参考文献第87-98页
致谢第98-99页
个人简历第99页

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