| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-14页 |
| 缩写词 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-23页 |
| 一 文献综述 | 第15-21页 |
| 1 植物PPO基因的克隆 | 第16-17页 |
| 2 植物PPO基因的结构与特性 | 第17-20页 |
| ·多基因家族性 | 第18页 |
| ·序列的保守性 | 第18-19页 |
| ·植物绝大多数PPO基因没有内含子 | 第19页 |
| ·植物PPO基因的表达大多经过翻译后的加工过程 | 第19-20页 |
| ·时空表达的特异性 | 第20页 |
| 3.遗传转化 | 第20-21页 |
| 二 研究背景 | 第21页 |
| 三 研究内容与技术路线 | 第21-23页 |
| 1 研究内容 | 第21-22页 |
| 2 技术路线 | 第22-23页 |
| 第一章 试验材料与方法 | 第23-36页 |
| 1 试验材料 | 第23-24页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·试剂盒 | 第23-24页 |
| ·引物合成与测序 | 第24页 |
| 2 试验方法 | 第24-36页 |
| ·RT-PCR | 第24-25页 |
| ·3′RACE | 第25-27页 |
| ·染色体步移 | 第27-30页 |
| ·PCR产物的直接纯化 | 第30页 |
| ·目的片段的回收 | 第30-32页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第32页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备—CaCl_2法 | 第32-33页 |
| ·连接产物的转化 | 第33-34页 |
| ·质粒的提取与纯化 | 第34-35页 |
| ·重组质粒的PCR检测 | 第35-36页 |
| 第二章 (木奈) 基因组DNA提取与纯化方法的建立 | 第36-42页 |
| 1 试验材料 | 第36-37页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·试剂、酶与引物 | 第36-37页 |
| 2 试验方法 | 第37-39页 |
| ·(木奈) 基因组DNA提取与纯化方法的建立 | 第37-38页 |
| ·(木奈) 基因组DNA含量和纯度的测定 | 第38页 |
| ·电泳分析 | 第38页 |
| ·(木奈) 嫩芽PPO基因保守区的PCR扩增 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-42页 |
| 第三章 (木奈) 嫩芽和果肉总RNA提取与纯化方法的建立 | 第42-49页 |
| 1 材料与方法 | 第42-45页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·(木奈) 嫩芽总RNA提取与纯化方法的建立 | 第42-43页 |
| ·(木奈) 果肉总RNA提取与纯化方法的建立 | 第43-45页 |
| ·电泳分析 | 第45页 |
| ·总RNA纯度和含量的测定 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-49页 |
| ·不同提取方法对(木奈) 嫩芽总RNA产量和质量的影响 | 第45-47页 |
| ·不同提取方法对(木奈) 肉总RNA产量和质量的影响 | 第47-49页 |
| 第四章 (木奈) 嫩芽多酚氧化酶基因及5′端调控序列的克隆 | 第49-74页 |
| 1.试验材料 | 第49页 |
| ·植物材料 | 第49页 |
| ·试剂盒 | 第49页 |
| 2 试验方法 | 第49-53页 |
| ·(木奈) 嫩芽多酚氧化酶保守区cDNA的克隆 | 第49-50页 |
| ·(木奈) 嫩芽多酚氧化酶cDNA的3′RACE | 第50-51页 |
| ·(木奈) 嫩芽多酚氧化酶基因5′端的克隆 | 第51-52页 |
| ·(木奈) 嫩芽多酚氧化酶基因5′端调控序列的克隆 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-74页 |
| ·(木奈) 嫩芽多酚氧化酶保守区cDNA的克隆与序列分析 | 第53-57页 |
| ·(木奈) 嫩芽多酚氧化酶cDNA的3′RACE | 第57-58页 |
| ·(木奈) 嫩芽多酚氧化酶基因5′端的克隆与序列分析 | 第58-60页 |
| ·(木奈) 嫩芽多酚氧化酶基因编码区序列的获得与序列分析53 | 第60-62页 |
| ·(木奈) 嫩芽多酚氧化酶基因编码的蛋白结构分析 | 第62-70页 |
| ·(木奈) 嫩芽多酚氧化酶基因5′端调控序列的获得与序列分析 | 第70-74页 |
| 第五章 (木奈) 果肉多酚氧化酶基因的克隆 | 第74-90页 |
| 1 试验材料 | 第74页 |
| ·材料 | 第74页 |
| ·试剂盒 | 第74页 |
| 2 试验方法 | 第74-76页 |
| ·(木奈)果肉多酚氧化酶保守区cDNA的克隆 | 第74-75页 |
| ·(木奈)果肉多酚氧化酶cDNA的3′RACE | 第75页 |
| ·(木奈) 果肉多酚氧化酶基因5′端的克隆 | 第75-76页 |
| 3 结果与分析 | 第76-90页 |
| ·(木奈) 嫩芽多酚氧化酶保守区cDNA的PCR扩增与序列分析 | 第76-79页 |
| ·(木奈) 果肉多酚氧化酶cDNA的3′RACE与序列分析 | 第79页 |
| ·(木奈) 果肉多酚氧化酶基因5′端的克隆与序列分析 | 第79-81页 |
| ·(木奈) 果肉多酚氧化酶基因编码区序列的获得与序列分析 | 第81-83页 |
| ·(木奈) 果肉多酚氧化酶基因编码的蛋白结构分析 | 第83-90页 |
| 第六章 讨论 | 第90-95页 |
| 1 (木奈)基因组DNA提取与纯化过程中多酚、多糖等干扰物质的排除 | 第90-91页 |
| 2 (木奈)嫩芽和果肉总RNA提取与纯化过程中多酚、多糖等干扰物质的排除 | 第91-93页 |
| 3 (木奈)PPO多基因家族与序列的保守性 | 第93页 |
| 4 植物PPO基因是否存在内含子 | 第93-94页 |
| 5 (木奈)嫩芽PPO基因5′端调控的顺式作用元件分析 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-100页 |
| 附录1 | 第100-101页 |
| 附录2 | 第101-104页 |
| 附录3 | 第104-105页 |
| 附录4 | 第105-106页 |
| 附录5 | 第106-107页 |
| 附录6 | 第107-109页 |
| 附录7 | 第109-110页 |
| 附录8 | 第110-117页 |
| 附录9 | 第117-118页 |
| 附录10 | 第118-119页 |
| 附录11 | 第119-120页 |
| 附录12 | 第120-122页 |
| 附录13 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 博士在学期间发表论文情况 | 第124页 |
