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SARS冠状病毒S糖蛋白基因片段的表达及初步应用

摘要第1-13页
Abstract第13-17页
1 引言第17-39页
   ·非典型性肺炎(SARS)研究概况第17-27页
     ·SARS 病原学第17-21页
     ·SARS 流行病学、病理学及致病机制第21-22页
     ·SARS 诊断、治疗及免疫预防第22-27页
     ·SARS 动物模型及自然宿主第27页
   ·SARS-CoV 主要结构蛋白及其表位研究第27-32页
     ·S蛋白第27-31页
     ·N蛋白第31页
     ·M蛋白第31-32页
     ·E蛋白第32页
   ·SARS-CoV 重组结构蛋白与SARS 血清学检测试剂的研制第32-35页
     ·S蛋白第32-33页
     ·N蛋白第33-34页
     ·其他第34-35页
   ·SARS-CoV 重组结构蛋白与SARS 疫苗研制第35-37页
     ·S蛋白第35-36页
     ·N蛋白第36-37页
     ·其他第37页
   ·本研究的目的和意义第37-39页
2 材料与方法第39-51页
   ·试验材料第39-41页
     ·含S 基因片段质粒及cDNA第39页
     ·载体、感受态细胞、引物第39页
     ·细胞培养用试剂第39-40页
     ·血清样品及酶标抗体第40页
     ·常规化学试剂第40页
     ·主要仪器设备第40-41页
   ·方法第41-51页
     ·SARS-CoV S 基因8 个片段重组pFastBacHTa-SX 载体构建及鉴定第41-42页
     ·重组pFastBacHTa-SX 的转座及重组Bacmid-SX 鉴定第42-43页
     ·重组Bacmid-SX 转染昆虫细胞及重组病毒繁殖与滴定第43-44页
     ·各重组蛋白的表达分析及鉴定第44-45页
     ·以SARS 阳性多克隆抗体筛选免疫反应性优势片段第45页
     ·基于重组蛋白的间接ELISA 方法建立与应用第45-48页
     ·间接免疫荧光方法建立与应用第48-51页
3 结果第51-71页
   ·重组pFastBacHTa-SX 载体鉴定第51-56页
     ·SARS-CoV SB 与SD 基因克隆及重组T 载体鉴定第51-52页
     ·pFastBacHTa 载体酶切、回收产物电泳鉴定第52-53页
     ·重组pFastBacHTa-SX 载体PCR 及酶切鉴定第53-56页
   ·重组Bacmid-SX(A,B,C,D,E,F,G1,G3)的PCR 鉴定第56-57页
   ·Sf9 细胞适应普通血清及各重组病毒滴度测定第57-58页
   ·重组蛋白的表达及Western blotting 检测第58-65页
     ·重组SA 蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定第59-60页
     ·重组SB 蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定第60页
     ·重组SC 蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定第60-61页
     ·重组SD 蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定第61-62页
     ·重组SE 蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定第62页
     ·重组SF 蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定第62-63页
     ·重组SG1 蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定第63-64页
     ·重组SG3 蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定第64-65页
   ·SARS 阳性多克隆抗体筛选免疫反应优势性片段第65-66页
   ·重组蛋白在SARS 血清学检测中初步应用第66-71页
     ·间接ELISA 试验第66-69页
     ·间接免疫荧光试验第69-71页
4 讨论第71-87页
   ·S 蛋白的免疫原性与SARS 疫苗研制第71-73页
   ·S 蛋白的免疫反应性与SARS 血清学检测试剂研制第73-75页
   ·S 蛋白表位第75-76页
   ·S 基因片段在昆虫细胞/杆状病毒系统中的分段表达第76-82页
   ·重组S 蛋白各片段免疫反应性分析第82-84页
   ·间接ELISA 与IFA 试验第84-85页
   ·后继工作第85-87页
5 结论第87-89页
参考文献第89-105页

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