一、前言 | 第1-15页 |
1 马品种资源简介 | 第6页 |
2 生长激素及其研究进展 | 第6-14页 |
·生长激素的结构、生理与功能 | 第7-9页 |
·生长激素基因定位、结构及表达与调控 | 第9-11页 |
·GH 基因多态性研究动态 | 第11-14页 |
3 本研究的目的与意义 | 第14-15页 |
二、材料和方法 | 第15-28页 |
1 实验材料 | 第15-17页 |
·材料来源 | 第15页 |
·实验主要仪器设备 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15-16页 |
·主要试剂和溶液的配制 | 第16-17页 |
2 实验方法 | 第17-28页 |
·基因组 DNA 提取 | 第17-18页 |
·PCR 过程 | 第18-20页 |
·PCR 产物回收方法(DNA 凝胶回收试剂盒) | 第20-21页 |
·感受态细胞的制备,质量的检验及质粒 DNA 的转化 | 第21-22页 |
·连接反应 | 第22页 |
·转化反应 | 第22-23页 |
·重组质粒的快速鉴定 | 第23-24页 |
·质粒的提取 | 第24页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第24-25页 |
·重组质粒的 PCR 鉴定 | 第25页 |
·测序 | 第25页 |
·向数据库提交所测到的 GH 基因全序列 | 第25-26页 |
·PCR-SSCP 分析 | 第26-27页 |
·基因多态性的统计方法 | 第27-28页 |
三、结果与分析 | 第28-36页 |
1 基因组 DNA 抽提结果 | 第28页 |
2 PCR 扩增目的基因 | 第28页 |
3 马 GH 基因 PCR 产物纯化结果 | 第28页 |
4 重组质粒的鉴定 | 第28-29页 |
5 测序结果 | 第29页 |
6 马 GH 基因全序列分析 | 第29-31页 |
7 向数据库提交蒙古马 GH 基因全序列 | 第31页 |
8 PCR-SSCP 结果 | 第31-34页 |
9 序列分析与比较 | 第34-35页 |
10 第五外显子位点的群体遗传学分析 | 第35-36页 |
四、讨论 | 第36-39页 |
1 关于实验方法 | 第36-37页 |
·引物设计及浓度对扩增结果的影响 | 第36页 |
·PCR 反应条件 | 第36-37页 |
·制作感受态需要注意的几个问题 | 第37页 |
·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第37页 |
2 关于马生长激素基因序列结构及组成特点 | 第37-39页 |
五、结论 | 第39-40页 |
附图 | 第40-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
作者简介 | 第52页 |