| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-31页 |
| ·植物细胞培养法生产次生代谢产物 | 第17-18页 |
| ·植物细胞培养法生产次生代谢产物研究现状 | 第17页 |
| ·植物细胞次生代谢产物合成信号调控规律的研究意义及现状 | 第17-18页 |
| ·NO在植物体内的信号分子作用 | 第18-30页 |
| ·NO的基本特性 | 第18-19页 |
| ·植物体内NO的来源 | 第19-22页 |
| ·NOS途径 | 第20-21页 |
| ·NR途径 | 第21页 |
| ·其它酶促途径 | 第21-22页 |
| ·非酶途径 | 第22页 |
| ·NO的生物学功能 | 第22-26页 |
| ·NO与植物生长发育 | 第22-23页 |
| ·NO与植物激素 | 第23页 |
| ·NO与非生物胁迫 | 第23-24页 |
| ·NO与生物胁迫 | 第24-25页 |
| ·NO与植物PCD | 第25-26页 |
| ·NO信号转导 | 第26-29页 |
| ·cGMP信号途径 | 第27页 |
| ·cADPR和钙调素途径 | 第27-28页 |
| ·NO和cGMP活化蛋白激酶／蛋白磷酸化酶途径 | 第28-29页 |
| ·不依赖cGMP的NO信号途径 | 第29页 |
| ·NO与其它信号途径的互作 | 第29-30页 |
| ·NO对植物次生代谢调控作用的研究现状 | 第30-31页 |
| 第二章 NO参与真菌诱导子对红豆杉细胞中紫杉醇合成和PAL活化的促进作用 | 第31-41页 |
| ·引言 | 第31-32页 |
| ·材料与方法 | 第32-33页 |
| ·红豆杉悬浮细胞系及培养条件 | 第32页 |
| ·桔青霉细胞壁诱导子的制备 | 第32页 |
| ·红豆杉悬浮细胞NO产生量测定 | 第32-33页 |
| ·PAL活性测定 | 第33页 |
| ·紫杉醇含量测定 | 第33页 |
| ·红豆杉细胞的SNP、cPITO及PBITU处理方法 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-37页 |
| ·桔青霉细胞壁诱导子诱发红豆杉悬浮细胞中PAL活化、紫杉醇合成及NO释放 | 第33-35页 |
| ·NO对红豆杉悬浮细胞中PAL活化及紫杉醇合成的诱导作用 | 第35-37页 |
| ·cPTIO、PBITU对桔青霉诱导子及NO诱发紫杉醇合成和PAL活化的抑制作用 | 第37页 |
| ·讨论与结论 | 第37-41页 |
| 第三章 NO信号途径对ROS的依赖作用 | 第41-51页 |
| ·引言 | 第41页 |
| ·材料与方法 | 第41-42页 |
| ·红豆杉悬浮细胞系及培养条件 | 第41页 |
| ·桔青霉诱导子的制备 | 第41-42页 |
| ·红豆杉悬浮细胞的H_2O_2及O_2~-产生量测定 | 第42页 |
| ·红豆杉悬浮细胞中JA含量测定 | 第42页 |
| ·红豆杉细胞中LOX活力测定 | 第42页 |
| ·红豆杉细胞紫杉醇产量测定 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-49页 |
| ·桔青霉诱导子对红豆杉细胞生长及紫杉醇产量的影响 | 第42-43页 |
| ·桔青霉诱导子诱发红豆杉细胞中NO迸发 | 第43-44页 |
| ·桔青霉诱导子诱发红豆杉细胞氧化迸发并产生活性氧中间体 | 第44-45页 |
| ·红豆杉细胞中氧化迸发与NO的关系 | 第45-46页 |
| ·桔青霉诱导子及NO诱发红豆杉细胞中紫杉醇合成对氧化迸发的依赖作用 | 第46-47页 |
| ·过氧化氢(H_2O_2)是介导NO诱发红豆杉细胞中紫杉醇合成的信号分子 | 第47-49页 |
| ·讨论与结论 | 第49-51页 |
| 第四章 NO可以依赖SA和JA信号途径促进野生型粉葛细胞和NahG转基因粉葛细胞中葛根素的合成 | 第51-65页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·材料与方法 | 第51-53页 |
| ·粉葛悬浮细胞系 | 第51-52页 |
| ·NahG转基因粉葛悬浮细胞系 | 第52页 |
| ·桔青霉诱导子的制备 | 第52页 |
| ·粉葛细胞NO测定 | 第52页 |
| ·粉葛细胞JA测定 | 第52页 |
| ·粉葛细胞SA测定 | 第52-53页 |
| ·粉葛细胞LOX活性测定 | 第53页 |
| ·葛根素含量测定 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-62页 |
| ·桔青霉诱导子诱发粉葛悬浮细胞NO迸发、SA积累和葛根素合成 | 第53页 |
| ·桔青霉诱导子诱发粉葛细胞中SA和葛根素合成积累对NO的依赖性 | 第53-56页 |
| ·桔青霉诱导子诱发NahG转基因粉葛细胞中NO迸发及葛根素合成积累 | 第56-57页 |
| ·NO和JA参与真菌诱导子对NahG转基因粉葛细胞中葛根素生物合成的促进作用 | 第57-59页 |
| ·真菌诱导子诱发NahG转基因粉葛细胞中JA生物合成对NO的依赖性 | 第59-61页 |
| ·NO依赖JA诱发NahG粉葛细胞中葛根素的生物合成 | 第61页 |
| ·SA对JA合成的抑制作用 | 第61页 |
| ·野生型粉葛细胞中NO信号途径对JA的部分依赖作用 | 第61-62页 |
| ·讨论与结论 | 第62-65页 |
| 第五章 NO通过JA信号途径诱发金丝桃细胞次生代谢产物的合成 | 第65-76页 |
| ·引言 | 第65页 |
| ·材料与方法 | 第65-67页 |
| ·金丝桃细胞系及细胞培养条件 | 第65页 |
| ·黑曲霉(Aspergillum niger)细胞壁诱导子制备 | 第65-66页 |
| ·金丝桃素含量测定 | 第66页 |
| ·NO含量测定 | 第66页 |
| ·金丝桃细胞JA含量的测定 | 第66页 |
| ·金丝桃细胞LOX活性测定 | 第66页 |
| ·金丝桃细胞一氧化氮合酶(NOS)活性测定 | 第66-67页 |
| ·金丝桃细胞的抑制剂实验 | 第67页 |
| ·结果与分析 | 第67-73页 |
| ·黑曲霉细胞诱导子诱发金丝桃素合成 | 第67-68页 |
| ·黑曲霉细胞壁诱导子诱发金丝桃细胞NO迸发 | 第68-69页 |
| ·黑曲霉细胞壁诱导子诱发金丝桃细胞茉莉酸(JA)合成积累 | 第69-70页 |
| ·黑曲霉细胞壁诱导子依赖NO和JA诱发金丝桃细胞金丝桃素合成 | 第70-72页 |
| ·黑曲霉细胞壁诱导子依赖NO诱发JA合成 | 第72-73页 |
| ·NO依赖JA诱发金丝桃素合成 | 第73页 |
| ·讨论与结论 | 第73-76页 |
| 第六章 NO与JA的自催化协同作用 | 第76-81页 |
| ·引言 | 第76页 |
| ·材料与方法 | 第76-77页 |
| ·NahG转基因粉葛细胞系及培养条件 | 第76页 |
| ·桔青霉菌细胞壁诱导子制备 | 第76页 |
| ·葛根素含量测定 | 第76页 |
| ·NO含量测定 | 第76页 |
| ·细胞中JA含量测定 | 第76页 |
| ·细胞中LOX活性测定 | 第76页 |
| ·细胞中NOS活性测定 | 第76-77页 |
| ·NahG转基因粉葛细胞的抑制剂试验 | 第77页 |
| ·结果与分析 | 第77-79页 |
| ·NO通过十八烷醇途径促进NahG转基因粉葛细胞中JA含量增加 | 第77页 |
| ·JA对NahG转基因粉葛细胞中NO合成的促进作用 | 第77页 |
| ·NO和JA对葛根素合成的协同效应 | 第77-79页 |
| ·讨论与结论 | 第79-81页 |
| 第七章 蛋白质激酶在NO信号转导途径中的作用 | 第81-92页 |
| ·引言 | 第81-82页 |
| ·材料与方法 | 第82页 |
| ·植物细胞与培养条件 | 第82页 |
| ·次生代谢产物含量检测 | 第82页 |
| ·植物细胞中NOS活性测定 | 第82页 |
| ·植物细胞处理 | 第82页 |
| ·结果与分析 | 第82-89页 |
| ·真菌诱导子依赖蛋白质激酶诱发植物细胞NO迸发 | 第82-84页 |
| ·NO对红豆杉等植物细胞生长及次生代谢产物合成积累的影响 | 第84页 |
| ·NO依赖蛋白质激酶促进植物细胞次生代谢产物合成 | 第84页 |
| ·NO依赖蛋白质激酶诱发红豆杉细胞氧化迸发和紫杉醇合成 | 第84-87页 |
| ·NO依赖蛋白质激酶促进金丝桃细胞JA合成和金丝桃素积累 | 第87-88页 |
| ·NO依赖蛋白质激酶促进粉葛细胞中SA合成和葛根素积累 | 第88-89页 |
| ·讨论与结论 | 第89-92页 |
| 第八章 NO参与Bax基因对长春花细胞次生代谢产物合成的调控作用 | 第92-102页 |
| ·引言 | 第92-94页 |
| ·材料与方法 | 第94-95页 |
| ·pER-8-Bax质粒构建及长春花细胞遗传转化 | 第94页 |
| ·长春花细胞培养 | 第94-95页 |
| ·蛋白质免疫分析 | 第95页 |
| ·RNA提取及Nothern检测 | 第95页 |
| ·长春花碱测定 | 第95页 |
| ·化学诱导 | 第95页 |
| ·NO含量测定 | 第95页 |
| ·结果与分析 | 第95-100页 |
| ·Bax基因诱导表达及其对长春花碱合成的促进作用 | 第95-96页 |
| ·Bax基因对长春花细胞中萜类吲哚碱生物合成途径的活化作用 | 第96-97页 |
| ·Bax基因诱导表达提高长春花碱产量 | 第97-98页 |
| ·NO参与Bax基因对长春花碱合成的调控作用 | 第98-100页 |
| ·讨论与结论 | 第100-102页 |
| 专用名词缩略表 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-121页 |
| 在读博士学位期间发表的论文和主持的研究课题 | 第121-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
