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原生质体融合提高玫瑰茄细胞生长速率的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-21页
第一章 绪论第21-49页
   ·植物次级代谢细胞工程的概况第21-24页
     ·植物细胞工程的兴起是历史发展的必然第21页
     ·植物细胞培养技术的优越性第21-22页
     ·植物细胞培养技术的历史回顾第22-24页
   ·植物细胞培养技术生产花青素的研究概况第24-26页
     ·花青素的研究概况第24-26页
       ·花青素的结构、性质、存在与合成代谢途径第24-25页
       ·花青素的用途及商业前景第25-26页
     ·植物细胞培养生产花青素的研究概况第26页
   ·利用玫瑰茄细胞培养生产花青素的研究进展第26-33页
     ·玫瑰茄的植物学特性第26-27页
     ·关于玫瑰茄花青素提取及应用方面的研究第27-30页
       ·pH对玫瑰茄红色素稳定性的影响第27-28页
       ·温度对玫瑰茄红色素稳定性的影响第28-29页
       ·光对玫瑰茄红色素稳定性的影响第29页
       ·金属离子对玫瑰茄红色素稳定性的影响第29页
       ·氧化剂和还原剂对玫瑰茄红色素稳定性的影响第29-30页
       ·添加剂对玫瑰茄红色素稳定性的影响第30页
     ·利用玫瑰茄细胞技术培养生产花青素的研究进展第30-33页
   ·植物原生质体融合研究进展第33-38页
     ·植物原生质体融合技术的应用现状第33-35页
       ·原生质体融合在主要农作物良种选育上应用获得很大的成功第33-34页
       ·原生质体融合在药用植物品种改良方面的应用第34页
       ·原生质体融合在经济作物品种改良方面的应用第34-35页
       ·原生质体不对称融合技术在提高植物细胞培养生长速率方面的应用第35页
     ·植物原生质体融合的操作技术第35-38页
       ·原生质体制备的细胞材料第35-36页
       ·原生质体制备方法第36页
       ·植物原生质体的保存与培养第36-37页
       ·原生质体融合亲本材料标记以及融合子的筛选方法第37页
       ·提高融合率的手段第37页
       ·融合子的鉴定手段第37-38页
     ·原生质体融合技术发展趋势第38页
   ·微甘菊研究进展第38-40页
     ·分类特征第38-39页
     ·生长特性及传播途径第39页
     ·危害情况第39页
     ·微甘菊清除方法第39-40页
     ·微甘菊的研究动态第40页
   ·本课题的研究目的和主要研究内容第40-41页
     ·研究目的第40页
     ·主要研究内容第40-41页
 参考文献第41-49页
第二章 微甘菊愈伤组织诱导与继代培养第49-64页
   ·引言第49页
   ·材料与仪器第49-50页
     ·材料第49页
     ·实验仪器第49-50页
     ·主要试剂第50页
   ·实验方法第50-52页
     ·植物细胞第50页
     ·主要培养基第50-51页
     ·微甘菊愈伤组织的诱导第51-52页
     ·微甘菊细胞的继代培养与培养基优化第52页
   ·结果与讨论第52-61页
     ·关于微甘菊愈伤组织诱导的研究第52-58页
       ·环境条件对愈伤组织诱导的影响第52-54页
       ·不同部位外植体诱导效果比较第54页
       ·不同培养基和外源激素对微甘菊愈伤组织诱导的影响第54-56页
       ·微甘菊愈伤组织诱导过程图解第56-58页
     ·关于微甘菊愈伤组织继代培养的研究第58-61页
       ·添加抗氧化剂对愈伤组织培养的影响第59页
       ·继代培养基中激素组合的优化第59-60页
       ·添加天然物质对微甘菊愈伤组织生长的影响第60-61页
       ·稳定继代培养的微甘菊愈伤组织第61页
   ·本章小结第61-62页
 参考文献第62-64页
第三章 微甘菊细胞悬浮培养第64-80页
   ·引言第64页
   ·材料与仪器第64-65页
     ·材料第64页
     ·实验仪器第64-65页
   ·实验方法第65页
     ·微甘菊细胞悬浮培养体系的建立第65页
     ·细胞生物量的测定第65页
     ·培养基组分测定第65页
       ·糖的测定第65页
       ·培养液中NO_3~-的测定第65页
       ·培养液中NH_4~+的测定第65页
       ·培养液中PO_4~(3-)的测定第65页
   ·结果与讨论第65-77页
     ·碳源对微甘菊细胞生长与营养消耗的影响第65-70页
       ·不同碳源对微甘菊细胞生长的影响第66-67页
       ·蔗糖浓度对微甘菊细胞生长的影响第67-68页
       ·不同蔗糖浓度下微甘菊细胞对培养液中残糖的消耗规律第68-69页
       ·不同蔗糖浓度下微甘菊细胞对培养液中氮源的消耗规律第69-70页
     ·氮源组合对微甘菊细胞生长的影响第70-73页
       ·氮源组合对微甘菊细胞培养液中pH值变化曲线的影响第70-71页
       ·氮源组合对微甘菊细胞生长的影响第71-73页
     ·接种量对悬浮培养微甘菊细胞生长的影响第73-75页
     ·微甘菊细胞悬浮培养的生长曲线第75-77页
   ·本章小结第77-78页
 参考文献第78-80页
第四章 微甘菊原生质体制备与培养第80-98页
   ·引言第80-81页
   ·材料、仪器与试剂第81-83页
     ·微甘菊细胞材料第81页
     ·仪器设备第81页
     ·CPW溶液和微甘菊破壁混合酶液的配制第81-82页
     ·原生质体培养基第82-83页
   ·实验方法第83-85页
     ·原生质体制备第83页
       ·材料制备第83页
       ·预处理第83页
       ·原生质体的分离第83页
       ·原生质体的纯化第83页
     ·原生质体产量的测定第83-84页
     ·活原生质体比例测定第84页
     ·原生质体的培养第84-85页
   ·结果与讨论第85-95页
     ·细胞材料与原生质体制备的关系第85-87页
       ·以愈伤组织为材料进行原生质体分离第85-87页
       ·以悬浮培养细胞系为材料进行原生质体分离第87页
     ·酶解前预处理对原生质体制备的影响第87-88页
       ·酶解因素对微甘菊原生质体产量和活力的影响第88-91页
       ·低速振荡酶解与静止酶解条件下原生质体分离效果比较第88-89页
       ·不同酶液组成对原生质体分离的影响第89-91页
     ·微甘菊细胞破壁过程观察第91页
     ·原生质体培养第91-92页
     ·原生质体分裂生长影响因素的探讨第92-95页
       ·培养密度对原生质体生长的影响第92页
       ·培养基种类对原生质体培养的影响第92-93页
       ·附加的激素组合对原生质体生长的影响第93-95页
       ·培养条件对原生质体培养的影响第95页
       ·培养方法对原生质体培养效果的影响第95页
   ·本章小结第95-96页
 参考文献第96-98页
第五章 玫瑰茄原生质体制备与培养第98-107页
   ·引言第98页
   ·材料与试剂第98-99页
     ·玫瑰茄细胞材料第98-99页
     ·CPW溶液配制第99页
     ·玫瑰茄破壁混合酶液的制备第99页
     ·原生质体培养基第99页
   ·实验方法第99-100页
     ·原生质体制备第99页
       ·原生质体制备的材料第99页
       ·预处理第99页
       ·原生质体的分离第99页
       ·原生质体的纯化第99页
     ·原生质体产量的测定第99页
     ·原生质体活力测定第99-100页
     ·原生质体的培养第100页
   ·结果与讨论第100-105页
     ·悬浮培养细胞系为材料进行原生质体分离的研究第100-101页
     ·酶解前预处理对原生质体制备的影响第101页
       ·酶解因素对玫瑰茄原生质体产量和活力的影响第101-103页
       ·低速振荡与静止条件下酶解对原生质体分离效果比较第101-102页
       ·酶液组成对原生质体分离的影响第102-103页
     ·原生质体分裂生长影响因素第103-105页
       ·激素组合对原生质体生长的影响第103-104页
       ·培养条件对原生质体培养的影响第104-105页
   ·本章小结第105页
 参考文献第105-107页
第六章 微甘菊与玫瑰茄原生质体的非对称融合第107-123页
   ·引言第107-108页
   ·材料与设备第108-109页
     ·材料第108页
     ·仪器设备第108页
     ·主要试剂第108-109页
   ·实验方法第109-111页
     ·原生质体预处理第109页
     ·原生质体活力测定第109页
     ·处理后原生质体分裂和愈伤组织再生测定第109页
     ·原生质体融合第109-110页
     ·融合体的筛选和培养第110页
     ·杂种细胞的鉴定第110-111页
   ·结果与讨论第111-120页
     ·原生质体预处理第111-113页
       ·不同UV照射时间对微甘菊原生质体活力和再生的影响第111-112页
       ·不同浓度IOA预处理对玫瑰茄原生质体活力和再生的影响第112-113页
     ·影响原生质体融合率的因素第113-118页
       ·PEG种类与浓度对原生质体融合的影响第113-114页
       ·融合液对融合率的影响第114-115页
       ·处理时间对融合率的影响第115-116页
       ·原生质体密度和融合剂滴加量对融合率的影响第116-117页
       ·促融过程图示(附图版1~5) .第117-118页
     ·融合体的愈伤组织再生第118页
     ·杂种细胞的鉴定结果第118-120页
       ·再生愈伤组织形态学特征鉴定第119页
       ·酯酶同工酶谱第119页
       ·过氧化物酶同工酶谱第119-120页
   ·本章小结第120-121页
 参考文献第121-123页
第七章 杂种细胞生长与花青素积累的初步研究第123-133页
   ·引言第123页
   ·材料与试剂第123页
     ·材料第123页
   ·实验方法第123-124页
     ·细胞生物量的测定第123页
     ·花青素含量的测定第123-124页
     ·杂种细胞的初筛第124页
     ·杂种细胞的培养基和激素组合筛选第124页
     ·杂种细胞与玫瑰茄悬浮培养的效果比较第124页
   ·结果与讨论第124-131页
     ·优良杂种细胞株的初步筛选第124-125页
     ·适合杂种细胞生长的培养基和激素组合筛选第125-127页
       ·培养基对杂种细胞生长和花青素合成的影响比较第126-127页
       ·激素对杂种细胞生长和花青素合成的影响比较第127页
     ·杂种细胞与微甘菊细胞悬浮培养的比较分析第127-128页
     ·杂种细胞与玫瑰茄悬细胞浮培养的比较分析第128-131页
     ·原生质体不对称融合技术改良细胞系的可行性探讨第131页
   ·本章小结第131-132页
 参考文献第132-133页
结论与展望第133-137页
 一 结论第133-135页
 二 本论文创新之处第135页
 三 展望第135-137页
攻读学位期间发表的与学位论文内容相关的学术论文第137-138页
致谢第138页

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