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茶树分子遗传图谱构建及多酚氧化酶基因的SNP研究

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
缩写词第13-22页
上篇第22-126页
 第一章 绪论第23-53页
  1 植物基因组图谱的发展第23-25页
   1.1 遗传图谱第23-24页
    1.1.1 遗传标记与遗传图谱第23页
    1.1.2 经典遗传图谱第23页
    1.1.3 分子连锁图谱第23-24页
   1.2 物理图谱第24-25页
    1.2.1 限制酶切图谱第24页
    1.2.2 跨叠片段图谱第24-25页
    1.2.3 DNA序列图谱第25页
  2 用于分子遗传图谱构建的主要分子标记第25-32页
   2.1 RFLP与PCR-RFLP标记第25-26页
    2.1.1 RFLP技术第25-26页
    2.1.2 PCR-RFLP技术第26页
   2.2 RAPD与SCAR标记第26-27页
   2.3 SSR与ISSR标记第27-28页
    2.3.1 SSR技术第27页
    2.3.2 ISSR技术第27-28页
   2.4 AFLP标记第28-29页
    2.4.1 AFLP技术的原理第28-29页
    2.4.2 AFLP的技术关键第29页
    2.4.3 AFLP的技术特点第29页
   2.5 SNP标记第29-32页
    2.5.1 SNP的基本概念与特点第30页
    2.5.2 SNP的检测技术第30-32页
  3 分子遗传图谱的构建第32-39页
   3.1 作图群体的建立与选择第32-37页
    3.1.1 遗传作图对作图群体的基本要求第32-33页
    3.1.2 遗传作图常用的分离群体类型第33-37页
   3.2 分子连锁图谱绘制的方法与原理第37-39页
    3.2.1 连锁基因的交换与重组第37页
    3.2.2 连锁作图的数据分析方法第37-39页
  4 分子标记连锁图谱在植物遗传研究中的应用第39-42页
   4.1 应用于基因定位第39-40页
    4.1.1 质量性状基因的定位第39-40页
    4.1.2 数量性状基因的定位第40页
   4.2 应用于图位克隆第40-41页
   4.3 应用于辅助育种第41页
   4.4 应用于比较基因组学研究第41-42页
  5 茶树分子连锁图谱及遗传亲缘关系的研究概况第42-44页
   5.1 茶树分子连锁图谱的研究概况第42-43页
   5.2 茶树种质资源遗传亲源关系的研究概况第43-44页
  6 本研究的目的与意义第44-45页
  7 本研究的技术路线第45-46页
  参考文献第46-53页
 第二章 茶树基因组DNA的高效提取与鲜叶保存方法研究第53-60页
  1 材料与方法第53-54页
   1.1 试验材料及鲜叶保存方法第53-54页
   1.2 试验方法第54页
    1.2.1 DNA提取方法第54页
    1.2.2 DNA质量检测第54页
  2 结果与分析第54-55页
   2.1 4种方法提取茶树基因组DNA的效果比较第54-55页
   2.2 鲜叶保存方法对茶树基因组DNA提取质量的影响第55页
  3 讨论第55-58页
   3.1 对4种DNA提取方法的改进第55-56页
   3.2 不同方法提取DNA的效果分析第56-57页
   3.3 不同嫩度材料对DNA提取效果的影响第57页
   3.4 检测DNA纯度的最佳方法选择第57页
   3.5 鲜叶保存方法对DNA提取效果的影响第57-58页
  4 本章小结第58-59页
  参考文献第59-60页
 第三章 茶树AFLP-银染技术体系与品种指纹图谱的建立第60-76页
  1 材料与方法第60-65页
   1.1 试验材料、仪器与试剂第60页
   1.2 试验方法第60-65页
    1.2.1 基因组DNA提取及质量检测第60-61页
    1.2.2 AFLP技术体系的优化第61-65页
  2 结果与分析第65-72页
   2.1 模板DNA的制备与纯度检测第65页
   2.2 AFLP反应体系的优化第65-66页
   2.3 AFLP反应程序的优化第66-68页
   2.4 茶树AFLP最优技术体系的建立第68-71页
    2.4.1 模板DNA双酶切与连接优化体系第68页
    2.4.2 DNA片段的预扩增优化体系第68页
    2.4.3 DNA片段的选择性扩增优化体系第68-69页
    2.4.4 茶树AFLP-银染技术体系的建立第69-71页
   2.5 茶树AFLP-银染技术在指纹图谱构建中的应用第71-72页
  3 讨论第72-74页
   3.1 茶树AFLP-银染显色技术成败的关键第72-73页
   3.2 茶树AFLP-银染显色技术的优越性第73页
   3.3 AFLP指纹技术适用于茶树种质鉴定第73-74页
  4 本章小结第74页
  参考文献第74-76页
 第四章 茶树AFLP分子连锁图谱的构建第76-97页
  1 材料与方法第76-78页
   1.1 试验材料、仪器与试剂第76-77页
   1.2 试验方法第77-78页
    1.2.1 基因组DNA提取及质量检测第77页
    1.2.2 AFLP技术与选扩引物筛选第77页
    1.2.3 数据收集、编码与方差分析第77页
    1.2.4 连锁分析与图谱构建第77-78页
  2 结果与分析第78-91页
   2.1 模板DNA的纯度检测第78页
   2.2 AFLP引物筛选第78-80页
   2.3 AFLP标记在F_1代群体的多态性第80-81页
   2.4 AFLP标记在F_1代群体中的分离方式第81-86页
    2.4.1 孟德尔分离标记第81-82页
    2.4.2 偏孟德尔分离标记第82页
    2.4.3 异常分离标记第82-86页
   2.5 茶树AFLP分子连锁图谱的构建第86-91页
    2.5.1 祁门4号AFLP分子标记图谱构建第86-89页
    2.5.2 潮安大乌叶AFLP分子标记图谱构建第89-91页
    2.5.3 父、母本AFLP分子标记图谱的同源连锁群分析第91页
  3 讨论第91-93页
   3.1 对本研究所用作图群体的评价第91页
   3.2 偏孟德尔分离与异常分离标记产生的原因第91-92页
   3.3 关于零重组率AFLP标记的检出第92-93页
   3.4 连锁群上标记分布的不均匀现象第93页
   3.5 关于连锁群与染色体的对应关系第93页
  4本章小结第93-94页
  参考文献第94-97页
 第五章 茶树RAPD与ISSR分子图谱构建及其与AFLP标记图谱的整合第97-115页
  1 材料与方法第97-99页
   1.1 试验材料、仪器与试剂第97-98页
   1.2 试验方法第98-99页
    1.2.1 基因组DNA提取及质量检测第98页
    1.2.2 ISSR技术与引物筛选第98-99页
    1.2.3 RAPD技术与引物筛选第99页
    1.2.4 数据收集、编码、方差分析及图谱构建第99页
  2 结果与分析第99-112页
   2.1 ISSR与RAPD引物筛选第99-101页
    2.1.1 ISSR引物筛选第100页
    2.1.2 RAPD引物筛选第100-101页
   2.2 ISSR、RAPD标记在F_1代群体的分离第101-105页
    2.2.1 ISSR标记在F_1代群体的分离第102-103页
    2.2.2 RAPD标记在F_1代群体的分离第103-105页
   2.3 茶树RAPD与ISSR分子图谱构建第105-108页
    2.3.1 祁门4号RAPD与ISSR分子标记图谱构建第105-106页
    2.3.2 潮安大乌叶RAPD与ISSR分子标记图谱构建第106页
    2.3.3 父、母本RAPD与ISSR分子图谱中的同源连锁群分析第106-108页
   2.4 茶树AFLP、RAPD与ISSR分子标记综合图谱构建第108-112页
    2.4.1 祁门4号AFLP、RAPD与ISSR标记综合图谱构建第108页
    2.4.2 潮安大乌叶AFLP、RAPD与ISSR标记综合图谱构建第108页
    2.4.3 父、母本分子图谱中的同源连锁群分析第108-112页
  3 讨论第112-113页
   3.1 不同分子标记方法对F_1群体多态性检出效率的比较第112页
   3.2 不同分子标记方法用于茶树遗传图谱构建的效率比较第112页
   3.3 本研究所建图谱与已发表的茶树分子图谱的比较第112-113页
  4 本章小结第113-114页
  参考文献第114-115页
 第六章 茶树种质资源遗传多样性与亲缘关系的AFLP分析第115-126页
  1 材料与方法第115-117页
   1.1 试验材料、仪器与试剂第115页
   1.2试验方法第115-117页
    1.2.1 基因组DNA提取及质量检测第115页
    1.2.2 AFLP分析第115页
    1.2.3 数据处理第115-117页
  2 结果与分析第117-122页
   2.1 AFLP扩增结果的多态性分析第117-118页
   2.2 茶树品种(株系)之间的遗传距离第118-121页
   2.3 40个茶树品种(株系)的聚类分析第121-122页
  3 讨论第122-123页
   3.1 银染-AFLP技术在茶树遗传亲缘关系研究中的高效性第122页
   3.2 统计分析结果与理论期望值的比较分析第122-123页
  4 本章小结第123-124页
  参考文献第124-126页
下篇第126-171页
 第一章 绪论第127-139页
  1 植物PPO基因的克隆第127-128页
  2 植物PPO基因的结构特点第128-132页
   2.1 PPO基因的家族特性第129页
   2.2 PPO基因编码铜离子结合区序列的高度保守性第129-132页
   2.3 PPO基因编码质体转移多肽的序列第132页
   2.4 PPO基因基本没有内含子序列第132页
  3 植物PPO基因的表达第132-134页
   3.1 PPO基因的表达大多在翻译后有一加工过程第132-133页
   3.2 PPO基因表达的时空特异性第133-134页
   3.3 PPO基因的遗传转化与修饰表达第134页
  4 茶树多酚氧化酶基因的研究第134-135页
  5 本研究的目的与意义第135-136页
  6 本研究的技术路线第136-137页
  参考文献第137-139页
 第二章 茶树多酚氧化酶基因的SNP搜寻第139-157页
  1 材料与方法第139-143页
   1.1 试验材料、仪器与试剂第139页
   1.2 试验方法第139-143页
    1.2.1 基因组DNA提取及质量检测第139页
    1.2.2 PCR-SSCP分析第139-143页
    1.2.3 DNA序列测定及同源性分析第143页
  2 结果与分析第143-154页
   2.1 PCR-SSCP方法的建立与优化第143-146页
    2.1.1 不同引物的最佳退火温度选择第143-144页
    2.1.2 不同引物的PCR扩增结果第144页
    2.1.3 SSCP检测SNP方法的优化第144-146页
   2.2 茶树多酚氧化酶基因的单链构象多态性第146页
   2.3 DNA序列分析检测SNP及酶切位点变异第146-154页
    2.3.1 引物L1/L2扩增片段中的SNP及酶切位点变异第147页
    2.3.2 引物L3/L4扩增片段中的SNP及酶切位点变异第147-149页
    2.3.3 引物L5/L6扩增片段中的SNP及酶切位点变异第149-150页
    2.3.4 引物L7/L8扩增片段中的SNP及酶切位点变异第150-152页
    2.3.5 引物L9/L10扩增片段中的SNP及酶切位点变异第152页
    2.3.6 新发现的氨基酸变异第152-154页
  3 讨论第154-155页
   3.1 关于PCR-SSCP检测方法第154-155页
   3.2 茶树多酚氧化酶基因的多态性与新等位基因第155页
  4 本章小结第155-156页
  参考文献第156-157页
 第三章 茶树多酚氧化酶基因的PCR-RFLP分析第157-171页
  1 材料与方法第157-160页
   1.1 试验材料、仪器与试剂第157页
   1.2 试验方法第157-160页
    1.2.1 引物设计第157页
    1.2.2 PCR扩增及产物检测第157-160页
    1.2.3 PCR产物的RFLP分析第160页
  2 结果与分析第160-168页
   2.1 不同引物的PCR扩增结果第160页
   2.2 多酚氧化酶基因的PCR-RFLP分析第160-168页
    2.2.1 BsuR Ⅰ酶切位点在不同品种中的多态性第160-162页
    2.2.2 HpaⅡ酶切位点在不同品种中的多态性第162-164页
    2.2.3 TaqⅠ酶切位点在不同品种中的多态性第164-166页
    2.2.4 HpaⅡ酶切位点在祁门4号×潮安大乌叶F_1代群体中的分离第166-168页
  3 讨论第168-169页
   3.1 PCR-RFLP技术在茶树基因分型研究中的应用第168页
   3.2 多酚氧化酶基因的PCR-RFLP特征与品种遗传背景的关系第168-169页
   3.3 多酚氧化酶基因在HpaⅡ酶切位点的多态性与品种适制性的关系第169页
  4 本章小结第169-170页
  参考文献第170-171页
全文总结第171-176页
 1 主要研究结果第171-173页
 2 主要创新之处第173-174页
 3 展望第174-176页
附录1 AFLP标记在F_1群体的偏分离分析统计表第176-182页
附录2 部分测序报告第182-192页
致谢第192-193页
在读期间的主要成果第193-194页

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