中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-8页 |
引言 | 第8-21页 |
1 、 表观遗传学与DNA甲基化的分子生物学研究进展 | 第8-10页 |
·表观遗传学 | 第8页 |
·DNA甲基化 | 第8-10页 |
2 、 抗病基因抗病性的分子机制及其克隆、结构、分类、进化 | 第10-19页 |
·抗病基因抗病性的分子机制 | 第10-11页 |
·抗病基因的克隆 | 第11-14页 |
·抗病基因的结构 | 第14-15页 |
·抗病基因的分类 | 第15-17页 |
·抗病基因的分子进化及其研究进展 | 第17-19页 |
3 、 菰及渐渗系 | 第19-21页 |
材料与方法 | 第21-30页 |
1 、 实验材料 | 第21页 |
2 、 实验方法 | 第21-30页 |
·植物基因组DNA的提取与纯化 | 第21-22页 |
·PCR引物设计 | 第22页 |
·NBS同源序列的扩增及PCR产物的克隆 | 第22-25页 |
·Southern杂交分析 | 第25-27页 |
·植物叶片总RNA的提取及RT-PCR | 第27-30页 |
结果与分析 | 第30-44页 |
1 、 菰中NBS-LRR类抗病基因同源序列的扩增及产物分析 | 第30页 |
2 、 重组质粒中目的片段的筛选与回收 | 第30-31页 |
·重组质粒中目的片段的PCR扩增 | 第30-31页 |
·纯化产物制备为Southern杂交的探针 | 第31页 |
3 、 重组质粒中目的片段的序列测定与分析 | 第31-36页 |
·8条RGA序列的相似性比较 | 第31-32页 |
·8条RGA与已知部分NBS-LRR类抗病基因的聚类分析 | 第32-34页 |
·这8条RGA属于非TIR类NBS-LRR类抗病基因同源序 | 第34-35页 |
·8条RGA在水稻染色体上的定位 | 第35-36页 |
4 、 RGA的Southern blot分析 | 第36-42页 |
·菰外源DNA渐渗引起的水稻基因组序列变异分析 | 第36-39页 |
·菰外源DNA渐渗引起水稻基因组中NBS-LRR类抗病基因同源序列或其侧翼序列的表观遗传变异分析 | 第39-42页 |
5 、 RGA的表达 | 第42-44页 |
·提取植物菰,松前,RZ1,RZ2,RZ6,通35的叶片总RNA | 第42页 |
·用DNaseⅠ除去RNA中残存的DNA污染 | 第42-43页 |
·RT-PCR | 第43-44页 |
讨论 | 第44-47页 |
1 、 利用根据抗病基因保守序列设计的引物却扩增到大量反转座子序列的可能原因 | 第44页 |
2 、 物种专化序列在鉴别菰与其他物种形成的远缘杂种中的应用 | 第44页 |
3 、 用保守序列候选基因方法克隆抗病基因同源序列的利弊 | 第44-45页 |
4 、 克隆及研究RGA的意义 | 第45页 |
5 、 本研究对理解渐渗系的意义 | 第45-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-59页 |
致谢 | 第59页 |