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菰(Zizania latifolia Griseb.)中NBS-LRR类抗病基因同源序列的克隆及其在渐渗杂交系中的遗传和表观遗传变异分析

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-8页
引言第8-21页
 1 、 表观遗传学与DNA甲基化的分子生物学研究进展第8-10页
   ·表观遗传学第8页
   ·DNA甲基化第8-10页
 2 、 抗病基因抗病性的分子机制及其克隆、结构、分类、进化第10-19页
   ·抗病基因抗病性的分子机制第10-11页
   ·抗病基因的克隆第11-14页
   ·抗病基因的结构第14-15页
   ·抗病基因的分类第15-17页
   ·抗病基因的分子进化及其研究进展第17-19页
 3 、 菰及渐渗系第19-21页
材料与方法第21-30页
 1 、 实验材料第21页
 2 、 实验方法第21-30页
   ·植物基因组DNA的提取与纯化第21-22页
   ·PCR引物设计第22页
   ·NBS同源序列的扩增及PCR产物的克隆第22-25页
   ·Southern杂交分析第25-27页
   ·植物叶片总RNA的提取及RT-PCR第27-30页
结果与分析第30-44页
 1 、 菰中NBS-LRR类抗病基因同源序列的扩增及产物分析第30页
 2 、 重组质粒中目的片段的筛选与回收第30-31页
   ·重组质粒中目的片段的PCR扩增第30-31页
   ·纯化产物制备为Southern杂交的探针第31页
 3 、 重组质粒中目的片段的序列测定与分析第31-36页
   ·8条RGA序列的相似性比较第31-32页
   ·8条RGA与已知部分NBS-LRR类抗病基因的聚类分析第32-34页
   ·这8条RGA属于非TIR类NBS-LRR类抗病基因同源序第34-35页
   ·8条RGA在水稻染色体上的定位第35-36页
 4 、 RGA的Southern blot分析第36-42页
   ·菰外源DNA渐渗引起的水稻基因组序列变异分析第36-39页
   ·菰外源DNA渐渗引起水稻基因组中NBS-LRR类抗病基因同源序列或其侧翼序列的表观遗传变异分析第39-42页
 5 、 RGA的表达第42-44页
   ·提取植物菰,松前,RZ1,RZ2,RZ6,通35的叶片总RNA第42页
   ·用DNaseⅠ除去RNA中残存的DNA污染第42-43页
   ·RT-PCR第43-44页
讨论第44-47页
 1 、 利用根据抗病基因保守序列设计的引物却扩增到大量反转座子序列的可能原因第44页
 2 、 物种专化序列在鉴别菰与其他物种形成的远缘杂种中的应用第44页
 3 、 用保守序列候选基因方法克隆抗病基因同源序列的利弊第44-45页
 4 、 克隆及研究RGA的意义第45页
 5 、 本研究对理解渐渗系的意义第45-47页
结论第47-48页
参考文献第48-59页
致谢第59页

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