| Abstract in Chinese | 第1-14页 |
| Abstract in English | 第14-20页 |
| Part One:Study on Mutation of p16INK4a and p15INK4b Genes in Human Primary Hepatocellular Carcinoma | 第20-51页 |
| Ⅰ.Introduction | 第20-24页 |
| Ⅱ.Material and Methods | 第24-32页 |
| ·Preparation of genomic DNA | 第26-28页 |
| ·PCR analysis | 第28-30页 |
| ·SSCP analysis | 第30页 |
| ·Cloning and sequencing | 第30-31页 |
| ·Comparative multiple PCR | 第31-32页 |
| Ⅲ.Results | 第32-41页 |
| Ⅳ.Discussion | 第41-44页 |
| Ⅴ.Summary | 第44页 |
| Ⅵ.References | 第44-51页 |
| Part Two:Impact of p16INK4a and p15INK4b on Human Hepatocellular Carcinoma Cell Proliferation and Apoptosis | 第51-93页 |
| Ⅰ.Introduction | 第51-55页 |
| Ⅱ.Material and Methods | 第55-69页 |
| 1.Material | 第55-57页 |
| ·E.coli and plasmids | 第55-56页 |
| ·Human hepatocacinoma cell line | 第56页 |
| ·Reagents | 第56页 |
| ·Instruments | 第56-57页 |
| 2.Methods | 第57-69页 |
| ·Cell culture and extraction of cell DNA | 第57页 |
| ·Deletion analysis of p16INK4a, p15INK4b and RB genes in HCC cell lines | 第57-59页 |
| ·Construction of recombinants | 第59-63页 |
| ·Transfection of eukaryoutic expression constructs DNA into HCC cell lines | 第63-64页 |
| ·Screening of the colonies containing exogenous p16 and p15 genes | 第64-65页 |
| ·Isolation of total RNA from HCC cell lines | 第65-66页 |
| ·RNA dot blot hybridization | 第66-67页 |
| ·Cell proliferation analysis | 第67-68页 |
| ·Colony formation in soft agar | 第68页 |
| ·Flow cytometry analysis | 第68-69页 |
| Ⅲ.Results | 第69-80页 |
| Ⅳ.Discussion | 第80-85页 |
| Ⅴ.Summary | 第85-86页 |
| Ⅵ.References | 第86-93页 |
| Part Three:Animal Experiment of Reversing Hepatocarcinoma Malignant Phenotype by Overexpression of p15INK4b Gene | 第93-155页 |
| Ⅰ.Introduction | 第93页 |
| Ⅱ.Material and Methods | 第93-96页 |
| ·Preparation of hepatocarcinoma cells | 第94页 |
| ·Establishment of transplanted hepatocarcinoma model in nude mice | 第94页 |
| ·Observation of tumorigenecity in nude mice | 第94-95页 |
| ·Observation of transplanted hepatocarcinoma metastasis | 第95页 |
| ·Identification of exogenous p151NK4b gene in nude mice | 第95页 |
| ·Flow cytometry analysis | 第95-96页 |
| Ⅲ.Results | 第96-100页 |
| Ⅳ.Discussion | 第100-101页 |
| Ⅴ.Summary | 第101-102页 |
| Ⅵ.References | 第102-155页 |
| Review | 第155-186页 |
| Appendix | 第186-201页 |
| Resume | 第201-205页 |
| Acknowledgements | 第205-10页 |
| 摘要 | 第10-104页 |
| 中文摘要 | 第10-14页 |
| 英文摘要 | 第14-104页 |
| 第一部分：人原发性肝癌p16INK4a和p15INK4b基因突变和p16INK4a基因缺失的研究 | 第104-124页 |
| Ⅰ．引言 | 第104-108页 |
| Ⅱ．材料和方法 | 第108-115页 |
| 2．1 组织DNA制备 | 第110-112页 |
| 2．2 PCR分析 | 第112-113页 |
| 2．3 SSCP分析 | 第113页 |
| 2．4 克隆和序列分析 | 第113-114页 |
| 2．5 多重PCR分析 | 第114-115页 |
| Ⅲ．结果 | 第115-119页 |
| Ⅳ．讨论 | 第119-122页 |
| Ⅴ．小结 | 第122-44页 |
| Ⅵ．参考文献 | 第44-124页 |
| 第二部分：p16INK4a和p15INK4b对人肝癌细胞增殖和凋亡影响的研究 | 第124-147页 |
| Ⅰ．引言 | 第124-128页 |
| Ⅱ．材料和方法 | 第128-133页 |
| 2．1 细胞培养和细胞DNA制备 | 第129页 |
| 2．2 人肝癌细胞系(BEL7402，SMMC7721)中p16INK4a、p15INK4b和RB基因缺失分析 | 第129-130页 |
| 2．3 真核表达重组质粒的构建 | 第130-131页 |
| 2．4 筛选含外源性p16和p15基因的细胞克隆 | 第131-133页 |
| 2．5 流式细胞仪检测细胞周期 | 第133页 |
| Ⅲ．结果 | 第133-140页 |
| Ⅳ．讨论 | 第140-145页 |
| Ⅴ．小结 | 第145-86页 |
| Ⅵ．参考文献 | 第86-147页 |
| 第三部分 p15INK4b基因逆转肝癌细胞恶性表型的动物 | 第147-153页 |
| 实验研究 | 第147页 |
| Ⅰ．引言 | 第147页 |
| Ⅱ．材料和方法 | 第147-149页 |
| 2．1 肝癌细胞的制备 | 第147-148页 |
| 2．2 裸鼠人肝癌移植瘤模型的建立 | 第148页 |
| 2．3 裸鼠成瘤性观察 | 第148页 |
| 2．4 裸鼠肿瘤转移观察 | 第148页 |
| 2．5 移植瘤外源性p15INK4b基因鉴定 | 第148-149页 |
| 2．6 流式细胞仪检测细胞周期 | 第149页 |
| Ⅲ．结果 | 第149-152页 |
| Ⅳ．讨论 | 第152-153页 |
| Ⅴ．小结 | 第153-102页 |
| Ⅵ．参考文献 | 第102-153页 |
| 全文总结 | 第153-155页 |
| 综述 | 第155-186页 |
| 附件 | 第186-201页 |
| 个人简历 | 第201-205页 |
| 致谢 | 第205-206页 |
| 声明 | 第206页 |
