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柑桔果实有机酸代谢生理和奉节脐橙芽变株系的AFLP分析研究

中文摘要第1-15页
英文摘要第15-23页
主要缩略词表第23-24页
第一章 文献综述第24-41页
 1.1 柑桔果实中有机酸代谢的研究第24-31页
  1.1.1 柑桔果实中有机酸的种类和含量变化第24-25页
  1.1.2 有机酸的合成部位和贮藏场所第25-26页
  1.1.3 柑桔果实汁胞中有机酸积累的生理机制第26-30页
   1.1.3.1 柠檬酸的合成机制和相关酶活性第26-28页
   1.1.3.2 有机酸的跨膜运输第28页
   1.1.3.3 有机酸的分解和利用第28-30页
  1.1.4 影响柑桔果实有机酸的环境因素第30页
   1.1.4.1 温度第30页
   1.1.4.2 水分第30页
   1.1.4.3 光照第30页
   1.1.4.4 土壤和营养元素第30页
  1.1.5 降低柑桔果实酸度的措施第30-31页
 1.2 植物生理学研究的进展—遗传标记和基因的表达与调控第31-38页
  1.2.1 遗传标记的类型与分子标记的概念第31-32页
  1.2.2 分子标记的种类第32-33页
  1.2.3 AFLP标记第33-35页
  1.2.4 基因的表达调控第35-38页
   1.2.4.1 器官与组织专一性表达的基因第35-36页
   1.2.4.2 受环境因素诱导而表达的基因第36-37页
   1.2.4.3 基因表达的调节机理第37-38页
 1.3 柑橘果树有机酸分子生物学研究进展第38-41页
  1.3.1 控制柑桔果实有机酸研究代谢的分子标记和基因表达研究进展第38-39页
  1.3.2 砷酸、亚砷酸盐降酸机理第39-40页
  1.3.3 有机酸的载体—柠檬酸结合蛋白(CBP, Citrate Binding Protein)和H~+-ATP酶的提纯和基因分离第40-41页
第二章 引言第41-44页
 2.1 柑橘果实有机酸代谢研究的意义第41页
 2.2 论文立题缘起与创新性第41-44页
第三章 柑桔果实发育过程中有机酸含量及其几种相关代谢酶活性的变化第44-56页
 3.1 材料与方法第44-47页
  3.1.1 材料第44页
  3.1.2 测定项目与方法第44-47页
   3.1.2.1 酶液的制备第44-45页
   3.1.2.2 测定方法第45-47页
 3.2 结果与分析第47-56页
  3.2.1 果实发育过程中柠檬酸含量变化第47-48页
  3.2.2 果实发育过程中糖酸比变化第48页
  3.2.3 柑橘各类型果实发育过程中柠檬酸代谢相关酶活性变化第48-56页
   3.2.3.1 柠檬酸合成酶第48-49页
   3.2.3.2 苹果酸脱氢酶第49-50页
   3.2.3.3 乌头酸酶第50-52页
    A 线粒体乌头酸酶第50-51页
    B 细胞质乌头酸酶第51-52页
   3.2.3.4 磷酸烯醇式丙酮酸脱氢酶第52-53页
   3.2.3.5 NAD-异柠檬酸脱氢酶第53-54页
   3.2.3.6 磷酸烯醇式丙酮酸脱氢酶/NAD-异柠檬酸脱氢酶第54-56页
第四章 相关性状发生差异的脐橙芽变株系的AFLP分子标记研究第56-90页
 4.1 材料与仪器第56-57页
  4.1.1 样品来源第56页
  4.1.2 主要的试剂和药品第56页
  4.1.3 主要仪器和设备第56-57页
 4.2 方法第57-66页
  4.2.1 DNA的提取第57-58页
   4.2.1.1 试剂第57页
   4.2.1.2 DNA提取步骤(粗提)第57-58页
   4.2.1.3 DNA粗提物的纯化第58页
   4.2.1.4 基因组DNA的检测第58页
   4.2.1.5 DNA样品浓度、纯度的检测第58页
  4.2.2 基因组DNA酶切第58-59页
  4.2.3 酶切产物的连接第59页
  4.2.4 预扩增反应第59-60页
  4.2.5 选择扩增反应第60页
  4.2.6 选择扩增产物的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第60-62页
  4.2.7 差异带的回收第62-63页
  4.2.8 目标片段的PCR再扩增与鉴定第63页
  4.2.9 目标片段再扩增产物的纯化克隆测序第63-66页
   4.2.9.1 目标片段再扩增产物的纯化第63页
   4.2.9.2 目标片段与载体连接第63-64页
   4.2.9.3 感受态细胞的制备与转化第64页
   4.2.9.4 阳性克隆的筛选及验证第64-66页
 4.3 结果与分析第66-90页
  4.3.1 提取柑橘DNA的质量第66页
  4.3.2 DNA的酶切第66-67页
  4.3.3 AFLP分析第67-72页
   4.3.3.1 AFLP聚丙烯酰胺电泳图谱及其带型分析第69-70页
   4.3.3.2 差异片段的回收与再扩增鉴定第70-72页
  4.3.4 目标片段的纯化克隆测序第72-73页
   4.3.4.1 目标片段的纯化第72-73页
   4.3.4.2 目标片段的克隆测序第73页
  4.3.5 目标片段测序结果分析第73-90页
   4.3.5.1 目标片段测序结果第73-76页
   4.3.5.2 目标片段测序结果与拟南芥基因库比对分析第76-90页
第五章 讨论第90-96页
 5.1 影响柑橘果实有机酸代谢的酶及其活性第90-92页
  5.1.1 柑橘果实有机酸的季节变化第90页
  5.1.2 柠檬酸合成酶(CS)对柑橘果实有机酸积累的影响第90-91页
  5.1.3 磷酸烯醇式丙酮酸脱氢酶和PEPC/NAD-IDH第91页
  5.1.4 乌头酸酶对对柑橘果实有机酸积累的影响83第91-92页
 5.2 柑橘果实有机酸代谢的分子生物学研究第92-94页
  5.2.1 影响AFLP的主要因素第92页
  5.2.2 差异片段比对结果分析第92-94页
 5.3 关于柑橘果实的糖酸比和熟性第94-96页
第六章 结论第96-97页
参考文献第97-108页
发表论文及课题一览表第108-109页
致谢第109-111页
附录(部分差异片段测序图谱)第111-113页

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