中文摘要 | 第1-15页 |
英文摘要 | 第15-23页 |
主要缩略词表 | 第23-24页 |
第一章 文献综述 | 第24-41页 |
1.1 柑桔果实中有机酸代谢的研究 | 第24-31页 |
1.1.1 柑桔果实中有机酸的种类和含量变化 | 第24-25页 |
1.1.2 有机酸的合成部位和贮藏场所 | 第25-26页 |
1.1.3 柑桔果实汁胞中有机酸积累的生理机制 | 第26-30页 |
1.1.3.1 柠檬酸的合成机制和相关酶活性 | 第26-28页 |
1.1.3.2 有机酸的跨膜运输 | 第28页 |
1.1.3.3 有机酸的分解和利用 | 第28-30页 |
1.1.4 影响柑桔果实有机酸的环境因素 | 第30页 |
1.1.4.1 温度 | 第30页 |
1.1.4.2 水分 | 第30页 |
1.1.4.3 光照 | 第30页 |
1.1.4.4 土壤和营养元素 | 第30页 |
1.1.5 降低柑桔果实酸度的措施 | 第30-31页 |
1.2 植物生理学研究的进展—遗传标记和基因的表达与调控 | 第31-38页 |
1.2.1 遗传标记的类型与分子标记的概念 | 第31-32页 |
1.2.2 分子标记的种类 | 第32-33页 |
1.2.3 AFLP标记 | 第33-35页 |
1.2.4 基因的表达调控 | 第35-38页 |
1.2.4.1 器官与组织专一性表达的基因 | 第35-36页 |
1.2.4.2 受环境因素诱导而表达的基因 | 第36-37页 |
1.2.4.3 基因表达的调节机理 | 第37-38页 |
1.3 柑橘果树有机酸分子生物学研究进展 | 第38-41页 |
1.3.1 控制柑桔果实有机酸研究代谢的分子标记和基因表达研究进展 | 第38-39页 |
1.3.2 砷酸、亚砷酸盐降酸机理 | 第39-40页 |
1.3.3 有机酸的载体—柠檬酸结合蛋白(CBP, Citrate Binding Protein)和H~+-ATP酶的提纯和基因分离 | 第40-41页 |
第二章 引言 | 第41-44页 |
2.1 柑橘果实有机酸代谢研究的意义 | 第41页 |
2.2 论文立题缘起与创新性 | 第41-44页 |
第三章 柑桔果实发育过程中有机酸含量及其几种相关代谢酶活性的变化 | 第44-56页 |
3.1 材料与方法 | 第44-47页 |
3.1.1 材料 | 第44页 |
3.1.2 测定项目与方法 | 第44-47页 |
3.1.2.1 酶液的制备 | 第44-45页 |
3.1.2.2 测定方法 | 第45-47页 |
3.2 结果与分析 | 第47-56页 |
3.2.1 果实发育过程中柠檬酸含量变化 | 第47-48页 |
3.2.2 果实发育过程中糖酸比变化 | 第48页 |
3.2.3 柑橘各类型果实发育过程中柠檬酸代谢相关酶活性变化 | 第48-56页 |
3.2.3.1 柠檬酸合成酶 | 第48-49页 |
3.2.3.2 苹果酸脱氢酶 | 第49-50页 |
3.2.3.3 乌头酸酶 | 第50-52页 |
A 线粒体乌头酸酶 | 第50-51页 |
B 细胞质乌头酸酶 | 第51-52页 |
3.2.3.4 磷酸烯醇式丙酮酸脱氢酶 | 第52-53页 |
3.2.3.5 NAD-异柠檬酸脱氢酶 | 第53-54页 |
3.2.3.6 磷酸烯醇式丙酮酸脱氢酶/NAD-异柠檬酸脱氢酶 | 第54-56页 |
第四章 相关性状发生差异的脐橙芽变株系的AFLP分子标记研究 | 第56-90页 |
4.1 材料与仪器 | 第56-57页 |
4.1.1 样品来源 | 第56页 |
4.1.2 主要的试剂和药品 | 第56页 |
4.1.3 主要仪器和设备 | 第56-57页 |
4.2 方法 | 第57-66页 |
4.2.1 DNA的提取 | 第57-58页 |
4.2.1.1 试剂 | 第57页 |
4.2.1.2 DNA提取步骤(粗提) | 第57-58页 |
4.2.1.3 DNA粗提物的纯化 | 第58页 |
4.2.1.4 基因组DNA的检测 | 第58页 |
4.2.1.5 DNA样品浓度、纯度的检测 | 第58页 |
4.2.2 基因组DNA酶切 | 第58-59页 |
4.2.3 酶切产物的连接 | 第59页 |
4.2.4 预扩增反应 | 第59-60页 |
4.2.5 选择扩增反应 | 第60页 |
4.2.6 选择扩增产物的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第60-62页 |
4.2.7 差异带的回收 | 第62-63页 |
4.2.8 目标片段的PCR再扩增与鉴定 | 第63页 |
4.2.9 目标片段再扩增产物的纯化克隆测序 | 第63-66页 |
4.2.9.1 目标片段再扩增产物的纯化 | 第63页 |
4.2.9.2 目标片段与载体连接 | 第63-64页 |
4.2.9.3 感受态细胞的制备与转化 | 第64页 |
4.2.9.4 阳性克隆的筛选及验证 | 第64-66页 |
4.3 结果与分析 | 第66-90页 |
4.3.1 提取柑橘DNA的质量 | 第66页 |
4.3.2 DNA的酶切 | 第66-67页 |
4.3.3 AFLP分析 | 第67-72页 |
4.3.3.1 AFLP聚丙烯酰胺电泳图谱及其带型分析 | 第69-70页 |
4.3.3.2 差异片段的回收与再扩增鉴定 | 第70-72页 |
4.3.4 目标片段的纯化克隆测序 | 第72-73页 |
4.3.4.1 目标片段的纯化 | 第72-73页 |
4.3.4.2 目标片段的克隆测序 | 第73页 |
4.3.5 目标片段测序结果分析 | 第73-90页 |
4.3.5.1 目标片段测序结果 | 第73-76页 |
4.3.5.2 目标片段测序结果与拟南芥基因库比对分析 | 第76-90页 |
第五章 讨论 | 第90-96页 |
5.1 影响柑橘果实有机酸代谢的酶及其活性 | 第90-92页 |
5.1.1 柑橘果实有机酸的季节变化 | 第90页 |
5.1.2 柠檬酸合成酶(CS)对柑橘果实有机酸积累的影响 | 第90-91页 |
5.1.3 磷酸烯醇式丙酮酸脱氢酶和PEPC/NAD-IDH | 第91页 |
5.1.4 乌头酸酶对对柑橘果实有机酸积累的影响83 | 第91-92页 |
5.2 柑橘果实有机酸代谢的分子生物学研究 | 第92-94页 |
5.2.1 影响AFLP的主要因素 | 第92页 |
5.2.2 差异片段比对结果分析 | 第92-94页 |
5.3 关于柑橘果实的糖酸比和熟性 | 第94-96页 |
第六章 结论 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-108页 |
发表论文及课题一览表 | 第108-109页 |
致谢 | 第109-111页 |
附录(部分差异片段测序图谱) | 第111-113页 |