| 致谢 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-6页 |
| 英文摘要 | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-24页 |
| ·早期胚胎性别鉴定 | 第10-13页 |
| ·细胞遗传学方法 | 第10页 |
| ·免疫学方法 | 第10-12页 |
| ·免疫荧光分析 | 第10-11页 |
| ·细胞毒性分析 | 第11页 |
| ·囊胚形成抑制法 | 第11-12页 |
| ·X染色体相关酶法 | 第12页 |
| ·分子生物学方法 | 第12-13页 |
| ·Y染色体特异性DNA探针杂交法 | 第12页 |
| ·荧光原位杂交技术(FISH) | 第12-13页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR)法 | 第13页 |
| ·SRY基因的研究进展 | 第13-17页 |
| ·SRY基因结构 | 第13-14页 |
| ·SOX基因家族 | 第14-15页 |
| ·其他相关基因 | 第15-17页 |
| ·AMH(anti-Müllerian hormone) | 第15页 |
| ·SF-1 | 第15页 |
| ·DAX-1／dax-1基因 | 第15-16页 |
| ·Wilms肿瘤抑制基因 | 第16-17页 |
| ·利用PCR技术进行胚胎性别鉴定 | 第17-21页 |
| ·胚胎取样技术 | 第17-19页 |
| ·取样细胞数对胚胎活力的影响 | 第17页 |
| ·胚胎的取样方法 | 第17-18页 |
| ·取样后胚胎的保存 | 第18-19页 |
| ·性别鉴定PCR引物 | 第19-20页 |
| ·利用PCR扩增特异DNA序列进行牛胚胎性别鉴定 | 第20-21页 |
| ·利用PCR扩增染色体多重复序列进行早期胚胎性别鉴定 | 第20页 |
| ·利用PCR技术扩增牛SRY序列进行胚胎性别鉴定 | 第20-21页 |
| ·利用PCR技术扩增牛SRY序列进行胚胎性别鉴定 | 第21页 |
| ·通过其他组织鉴定性别 | 第21-22页 |
| ·PCR扩增结果的检测 | 第22-24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
| ·核酸杂交 | 第22页 |
| ·直接观察 | 第22-23页 |
| ·序列分析 | 第23-24页 |
| 第二章 试验材料与方法 | 第24-36页 |
| ·试验材料 | 第24-27页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·试验样品 | 第24页 |
| ·仪器与设备 | 第24-25页 |
| ·主要试剂及溶液 | 第25-27页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·溶液 | 第25-27页 |
| ·培养液 | 第25-26页 |
| ·试剂及缓冲液的配制 | 第26-27页 |
| ·试验方法 | 第27-36页 |
| ·DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·牛早期胚胎性别鉴定 | 第28-30页 |
| ·引物的设计 | 第28页 |
| ·DNA的准备 | 第28页 |
| ·血液稀释法 | 第28页 |
| ·胚胎基因组DNA | 第28页 |
| ·PCR反应 | 第28-29页 |
| ·公牛全血基因组DNA扩增雄性特异性片段 | 第28-29页 |
| ·牛胚胎性别鉴定的连续复合式PCR反应 | 第29页 |
| ·可能出现的污染因素的影响 | 第29-30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
| ·基因组DNA扩增产物电泳 | 第30页 |
| ·牛胚胎性别鉴定结果电泳 | 第30页 |
| ·牛SRY基因的扩增、克隆和测序 | 第30-36页 |
| ·引物设计 | 第30页 |
| ·PCR反应 | 第30-31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及片段回收 | 第31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| ·DNA片段的回收与纯化 | 第31页 |
| ·DNA克隆技术 | 第31-34页 |
| ·连接方法 | 第31-32页 |
| ·感受态细胞的制备及转化 | 第32-33页 |
| ·转化 | 第33页 |
| ·筛选 | 第33页 |
| ·质粒提取 | 第33-34页 |
| ·酶切和PCR鉴定重组质粒 | 第34页 |
| ·双酶切方案 | 第34页 |
| ·PCR鉴定 | 第34页 |
| ·DNA序列测定 | 第34-35页 |
| ·网上分析测序结果 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-42页 |
| ·牛全血基因组DNA提取及浓度与纯度鉴定 | 第36页 |
| ·性别鉴定结果 | 第36-38页 |
| ·基因组DNA扩增产物电泳 | 第36-37页 |
| ·胚胎性别鉴定扩增产物电泳 | 第37页 |
| ·牛胚胎性别鉴定结果 | 第37-38页 |
| ·可能出现的污染因素的影响 | 第38页 |
| ·牛SRY基因的克隆结果 | 第38-42页 |
| ·PCR产物电泳 | 第38页 |
| ·特异性条带的回收 | 第38-39页 |
| ·感受态大肠杆菌细胞的效价测定 | 第39页 |
| ·质粒提取结果 | 第39页 |
| ·酶切与PCR鉴定重组克隆结果 | 第39-40页 |
| ·测序结果 | 第40-41页 |
| ·测序基因片段的同源性比较 | 第41-42页 |
| 第四章 讨论 | 第42-45页 |
| ·影响全血基因组DNA质量的因素 | 第42页 |
| ·优化性别鉴定的PCR反应条件 | 第42-43页 |
| ·牛SRY基因克隆 | 第43-45页 |
| 第五章 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录 | 第52-67页 |
| 个人简介 | 第67页 |