中文摘要 | 第1-8页 |
1 前言 | 第8-9页 |
2 文献综述 | 第9-13页 |
2.1 降酚菌的生态学效应的研究概况 | 第9页 |
2.2 降酚菌生理代谢特性的研究概况 | 第9-10页 |
2.3 好氧降酚菌代谢机制的研究概况 | 第10-12页 |
2.3.1 降解基因的结构和功能 | 第10-11页 |
2.3.2 降解基因的表达和调控 | 第11-12页 |
2.4 分子生物学方法用于细菌鉴定的研究概况 | 第12-13页 |
3 材料与方法 | 第13-22页 |
3.1 水样的采集 | 第13页 |
3.2 供试菌株和质粒 | 第13页 |
3.3 培养基种类 | 第13-14页 |
3.4 苯酚降解菌的分离和生理代谢特性的研究方法 | 第14-15页 |
3.4.1 苯酚降解菌的分离和纯化 | 第14页 |
3.4.2 苯酚降解菌的筛选 | 第14页 |
3.4.3 苯酚降解菌的菌落形态观察 | 第14页 |
3.4.4 菌株phen8对单一碳源的利用情况 | 第14页 |
3.4.5 接种量与phen8菌体代谢的关系 | 第14页 |
3.4.6 培养基种与对phen8菌降解苯酚的关系 | 第14-15页 |
3.4.7 菌体生长、酚降解与苯酚初浓度的关系 | 第15页 |
3.4.8 抗性检测 | 第15页 |
3.4.9 温度和pH对phen8降解苯酚的影响 | 第15页 |
3.5 Phen8菌代谢机制的研究方法 | 第15-16页 |
3.5.1 苯酚和邻苯二酚对phen8的诱导反应 | 第15页 |
3.5.2 葡萄糖对phen8降解苯酚的影响 | 第15-16页 |
3.5.3 XylR对苯酚降解的影响 | 第16页 |
3.5.4 诱导物甲苯对苯酚降解的影响 | 第16页 |
3.6 分析检测方法 | 第16-22页 |
3.6.1 苯酚降解量和菌体浓度的测定 | 第16页 |
3.6.2 质粒和基因组DNA的提取 | 第16-18页 |
3.6.2.1 质粒DNA的提取 | 第16-17页 |
3.6.2.2 基因组DNA的提取 | 第17-18页 |
3.6.3 苯酚羟化酶基因的检测 | 第18-19页 |
3.6.4 XylR向phen8菌染色体的导入和接合子的检测 | 第19页 |
3.6.5 16S rDNA基因的克隆和序列分析 | 第19-21页 |
3.6.5.1 16S rDNA基因的克隆 | 第19-20页 |
3.6.5.2 16S rDNA PCR产物的纯化、连接和转化 | 第20-21页 |
3.6.5.3 转化子的质粒鉴定 | 第21页 |
3.6.5.4 Phen8菌16S rDNA的序列分析 | 第21页 |
3.6.6 缺失酚降解功能的突变株的获得和检测 | 第21-22页 |
3.6.6.2 缺失苯酚降解功能的突变株的鉴定 | 第22页 |
4 结果与分析 | 第22-37页 |
4.1 苯酚降解菌phen8的分离筛选 | 第22-23页 |
4.1.1 苯酚降解菌的分离筛选 | 第22-23页 |
4.1.2 降解菌株的菌落形态 | 第23页 |
4.2 苯酚降解菌phen8的理化特性 | 第23-26页 |
4.2.1 单一碳源的利用情况 | 第23页 |
4.2.2 接种量与苯酚降解的关系 | 第23-24页 |
4.2.3 培养基种类与苯酚降解的关系 | 第24页 |
4.2.4 菌体代谢与酚浓度的关系 | 第24-25页 |
4.2.5 Phen8的抗性测定 | 第25页 |
4.2.6 温度和pH对苯酚降解的影响 | 第25-26页 |
4.3 苯酚降解菌phen8的代谢机制 | 第26-34页 |
4.3.1 Phen8菌株细胞中的质粒检测 | 第26页 |
4.3.2 苯酚羟化酶基因的检测 | 第26页 |
4.3.3 Phen8受底物的诱导反应 | 第26-27页 |
4.3.4 葡萄糖对苯酚降解的影响 | 第27页 |
4.3.5 XylR及其诱导物对phen8菌降解苯酚的影响 | 第27-29页 |
4.3.5.1 XylR导入假单胞菌phen8中及接合子的检测 | 第27-28页 |
4.3.5.2 XylR对接合子降解苯酚的影响 | 第28-29页 |
4.4 降解菌phen8的16S rDNA基因的克隆和序列分析 | 第29页 |
4.4.1 16S rDNA基因的克隆 | 第29页 |
4.4.2 含有16S rDNA片段的转化子的鉴定 | 第29-30页 |
4.4.3 Phen8的16S rDNA序列分析 | 第30-34页 |
4.5 缺失苯酚降解功能的的检测 | 第34-37页 |
4.5.1 Phen8菌突变体的获得 | 第34-35页 |
4.5.2 缺失苯酚降解功能的突变株的鉴定 | 第35-37页 |
5. 讨论 | 第37-39页 |
5.1 苯酚降解菌phen8的生理代谢特性 | 第37页 |
5.2 phen8菌的代谢机制 | 第37-38页 |
5.3 Phen8菌的16S rDNA基因特性和序列分析 | 第38-39页 |
6 结论 | 第39-40页 |
6.1 分离菌株phen8菌的代谢特性 | 第39-40页 |
6.2 Phen8菌的代谢机制 | 第40页 |
6.3 Phen8菌的16S rDNA序列分析 | 第40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
英文摘要 | 第45-47页 |
附图 | 第47-52页 |