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降酚菌phen8的特性、突变株的检测和16S rDNA序列分析

中文摘要第1-8页
1 前言第8-9页
2 文献综述第9-13页
 2.1 降酚菌的生态学效应的研究概况第9页
 2.2 降酚菌生理代谢特性的研究概况第9-10页
 2.3 好氧降酚菌代谢机制的研究概况第10-12页
  2.3.1 降解基因的结构和功能第10-11页
  2.3.2 降解基因的表达和调控第11-12页
 2.4 分子生物学方法用于细菌鉴定的研究概况第12-13页
3 材料与方法第13-22页
 3.1 水样的采集第13页
 3.2 供试菌株和质粒第13页
 3.3 培养基种类第13-14页
 3.4 苯酚降解菌的分离和生理代谢特性的研究方法第14-15页
  3.4.1 苯酚降解菌的分离和纯化第14页
  3.4.2 苯酚降解菌的筛选第14页
  3.4.3 苯酚降解菌的菌落形态观察第14页
  3.4.4 菌株phen8对单一碳源的利用情况第14页
  3.4.5 接种量与phen8菌体代谢的关系第14页
  3.4.6 培养基种与对phen8菌降解苯酚的关系第14-15页
  3.4.7 菌体生长、酚降解与苯酚初浓度的关系第15页
  3.4.8 抗性检测第15页
  3.4.9 温度和pH对phen8降解苯酚的影响第15页
 3.5 Phen8菌代谢机制的研究方法第15-16页
  3.5.1 苯酚和邻苯二酚对phen8的诱导反应第15页
  3.5.2 葡萄糖对phen8降解苯酚的影响第15-16页
  3.5.3 XylR对苯酚降解的影响第16页
  3.5.4 诱导物甲苯对苯酚降解的影响第16页
 3.6 分析检测方法第16-22页
  3.6.1 苯酚降解量和菌体浓度的测定第16页
  3.6.2 质粒和基因组DNA的提取第16-18页
   3.6.2.1 质粒DNA的提取第16-17页
   3.6.2.2 基因组DNA的提取第17-18页
  3.6.3 苯酚羟化酶基因的检测第18-19页
  3.6.4 XylR向phen8菌染色体的导入和接合子的检测第19页
  3.6.5 16S rDNA基因的克隆和序列分析第19-21页
   3.6.5.1 16S rDNA基因的克隆第19-20页
   3.6.5.2 16S rDNA PCR产物的纯化、连接和转化第20-21页
   3.6.5.3 转化子的质粒鉴定第21页
   3.6.5.4 Phen8菌16S rDNA的序列分析第21页
  3.6.6 缺失酚降解功能的突变株的获得和检测第21-22页
   3.6.6.2 缺失苯酚降解功能的突变株的鉴定第22页
4 结果与分析第22-37页
 4.1 苯酚降解菌phen8的分离筛选第22-23页
  4.1.1 苯酚降解菌的分离筛选第22-23页
  4.1.2 降解菌株的菌落形态第23页
 4.2 苯酚降解菌phen8的理化特性第23-26页
  4.2.1 单一碳源的利用情况第23页
  4.2.2 接种量与苯酚降解的关系第23-24页
  4.2.3 培养基种类与苯酚降解的关系第24页
  4.2.4 菌体代谢与酚浓度的关系第24-25页
  4.2.5 Phen8的抗性测定第25页
  4.2.6 温度和pH对苯酚降解的影响第25-26页
 4.3 苯酚降解菌phen8的代谢机制第26-34页
  4.3.1 Phen8菌株细胞中的质粒检测第26页
  4.3.2 苯酚羟化酶基因的检测第26页
  4.3.3 Phen8受底物的诱导反应第26-27页
  4.3.4 葡萄糖对苯酚降解的影响第27页
  4.3.5 XylR及其诱导物对phen8菌降解苯酚的影响第27-29页
   4.3.5.1 XylR导入假单胞菌phen8中及接合子的检测第27-28页
   4.3.5.2 XylR对接合子降解苯酚的影响第28-29页
  4.4 降解菌phen8的16S rDNA基因的克隆和序列分析第29页
  4.4.1 16S rDNA基因的克隆第29页
  4.4.2 含有16S rDNA片段的转化子的鉴定第29-30页
  4.4.3 Phen8的16S rDNA序列分析第30-34页
 4.5 缺失苯酚降解功能的的检测第34-37页
  4.5.1 Phen8菌突变体的获得第34-35页
  4.5.2 缺失苯酚降解功能的突变株的鉴定第35-37页
5. 讨论第37-39页
 5.1 苯酚降解菌phen8的生理代谢特性第37页
 5.2 phen8菌的代谢机制第37-38页
 5.3 Phen8菌的16S rDNA基因特性和序列分析第38-39页
6 结论第39-40页
 6.1 分离菌株phen8菌的代谢特性第39-40页
 6.2 Phen8菌的代谢机制第40页
 6.3 Phen8菌的16S rDNA序列分析第40页
参考文献第40-45页
英文摘要第45-47页
附图第47-52页

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