摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
前言 | 第11-26页 |
1. 组蛋白乙酰基转移酶(HAT)和组蛋白去乙酰化酶(HDAC) | 第11-12页 |
·HAT | 第11-12页 |
·HDAC | 第12页 |
2. HDAC 抑制剂 | 第12-15页 |
·HDAC 抑制剂的分类 | 第13页 |
·HDAC 抑制剂的抗肿瘤作用及机制 | 第13-15页 |
·HDAC 抑制剂的抗炎症活性及机制 | 第15页 |
3. 辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA) | 第15-16页 |
4. 细胞凋亡与检测 | 第16-17页 |
5. 细胞自噬(Autophagy) | 第17-18页 |
6. 本课题的研究目的和意义 | 第18-19页 |
参考文献 | 第19-26页 |
第一部分 HDAC 抑制剂 SAHA 对 Jurkat T 细胞生长和凋亡的影响 | 第26-45页 |
1. 实验材料与设备 | 第26-28页 |
·细胞株 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26-28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
2.实验方法与步骤 | 第28-31页 |
·细胞培养 | 第28页 |
·细胞增殖测定 | 第28-29页 |
·PI 染色法分析细胞周期 | 第29页 |
·AnnexinV-PE 试剂盒检测细胞凋亡 | 第29页 |
·流式细胞仪(FACS)检测线粒体膜电势 | 第29页 |
·蛋白抽提和 Western blotting 分析 | 第29-30页 |
·流式细胞仪分析 | 第30-31页 |
·统计学分析 | 第31页 |
3 实验结果 | 第31-39页 |
·SAHA 对 Jurkat T 细胞增殖的抑制作用 | 第31页 |
·SAHA 诱导 Jurkat T 细胞发生 G2/M 期阻滞和凋亡 | 第31-34页 |
·SAHA 能够降低 Jurkat T 细胞线粒体膜电位 | 第34-36页 |
·SAHA 诱导 Caspase-3 发生活化 | 第36-37页 |
·SAHA 能够诱导 Jurkat T 细胞发生自噬 | 第37-39页 |
4. 讨论 | 第39-42页 |
参考文献 | 第42-45页 |
第二部分 HDAC 抑制剂 SAHA 对小鼠淋巴细胞生长、分化和凋亡的影响 | 第45-65页 |
1. 实验材料与设备 | 第45-47页 |
·实验动物 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45-47页 |
·主要仪器 | 第47页 |
2.实验方法与步骤 | 第47-51页 |
·小鼠淋巴细胞悬液的制备 | 第48页 |
·MTS 法测定细胞增殖 | 第48页 |
·Con A 诱导的小鼠 T 淋巴细胞活化 | 第48页 |
·细胞内因子染色 | 第48-49页 |
·PI 染色法分析细胞周期 | 第49页 |
·AnnexinV-PE 试剂盒检测细胞凋亡 | 第49页 |
·流式细胞仪(FACS)检测线粒体膜电势 | 第49-50页 |
·蛋白抽提和 Western blotting 分析 | 第50-51页 |
·流式细胞仪分析 | 第51页 |
·统计学分析 | 第51页 |
3. 实验结果 | 第51-60页 |
·SAHA 对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用 | 第51-52页 |
·SAHA 对小鼠淋巴细胞 CD69 表达的抑制作用 | 第52-53页 |
·SAHA 抑制小鼠淋巴细胞分泌促炎细胞因子 TNF-α、IL-6 和 IFN-γ | 第53-55页 |
·SAHA 诱导小鼠淋巴细胞发生凋亡 | 第55-57页 |
·SAHA 能够降低小鼠淋巴细胞线粒体膜电位 | 第57-59页 |
·SAHA 能够调节凋亡相关蛋白的表达并引起 H2A.X 磷酸化 | 第59-60页 |
4. 讨论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
全文总结 | 第65-66页 |
附录Ⅰ 主要试剂配制方法 | 第66-68页 |
附录Ⅱ 英文缩略词 | 第68-69页 |
附录Ⅲ 在校期间发表的研究论文 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |