| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 文献综述 | 第7-17页 |
| 前言 | 第17-18页 |
| 1 材料与方法 | 第18-32页 |
| 1．1 材料 | 第18-20页 |
| 1．1．1 菌种和质粒载体 | 第18页 |
| 1．1．2 主要化学试剂 | 第18页 |
| 1．1．3 主要溶液及其配制 | 第18-20页 |
| 1．1．4 主要仪器设备 | 第20页 |
| 1．2 方法 | 第20-32页 |
| 1．2．1 细菌培养条件 | 第20-21页 |
| 1．2．2 菌种保藏 | 第21页 |
| 1．2．3 产Nisin细菌基因组DNA的制备 | 第21-22页 |
| 1．2．4 琼脂糖凝胶电泳分析DNA | 第22页 |
| 1．2．5 引物设计和合成 | 第22页 |
| 1．2．6 PCR扩增 | 第22-25页 |
| 1．2．7 质粒pMG36e的快速抽提 | 第25-27页 |
| 1．2．8 连接反应 | 第27-28页 |
| 1．2．9 大肠杆菌JM109感受态细胞的制备和转化 | 第28-29页 |
| 1．2．10 阳性重组子的筛选与鉴定 | 第29-31页 |
| 1．2．11 重组质粒转化乳酸乳球菌NZ9800及重组质粒的鉴定 | 第31页 |
| 1．2．12 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第31-32页 |
| 2 实验结果 | 第32-36页 |
| 2．1 乳酸乳球菌NIZO R5基因组DNA的提取 | 第32页 |
| 2．2 PCR扩增获得目的基因 | 第32-33页 |
| 2．3 PCR扩增产物的克隆及筛选 | 第33-34页 |
| 2．4 重组质粒的PCR分析 | 第34页 |
| 2．5 重组质粒的双酶切分析 | 第34-35页 |
| 2．6 克隆片段的DNA序列测定 | 第35页 |
| 2．7 重组质粒转化受体菌及酶切分析 | 第35页 |
| 2．8 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-43页 |
| 3．1 基因工程简介 | 第36-37页 |
| 3．2 研究思路 | 第37页 |
| 3．3 PCR技术扩增乳链菌肽前体基因（nisA） | 第37-39页 |
| 3．4 基因克隆的策略 | 第39-40页 |
| 3．5 克隆载体的选择 | 第40-41页 |
| 3．6 nisin前体基因的表达策略 | 第41-43页 |
| 4 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
