摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略词 | 第9-10页 |
第一章 引言 | 第10-18页 |
1.1 植物外源激素对麻疯树花发育的影响 | 第10-11页 |
1.2 赤霉素信号途径相关基因 | 第11-13页 |
1.2.1 赤霉素信号转导途 | 第11-12页 |
1.2.2 GASA基因家族 | 第12-13页 |
1.3 麻疯树花的研究进展 | 第13-15页 |
1.3.1 麻疯树花形态和解剖结构研究方面 | 第13-14页 |
1.3.2 麻疯树花发育的相关基因研究 | 第14-15页 |
1.4 研究目的和研究意义 | 第15-17页 |
1.5 技术路线图 | 第17-18页 |
第二章 JcGASA6的克隆及序列分析 | 第18-48页 |
2.1 实验材料 | 第18-21页 |
2.1.1 麻疯树花蕾 | 第18页 |
2.1.2 实验主要试剂及耗材 | 第18-19页 |
2.1.3 试验主要仪器 | 第19页 |
2.1.4 大肠杆菌培养基 | 第19-20页 |
2.1.4.1 LB固体培养基 | 第19-20页 |
2.1.5 试验所用引物 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-38页 |
2.2.1 麻疯树花蕾总RNA的提取及检测 | 第21-22页 |
2.2.2 cDNA第一链的合成 | 第22-25页 |
2.2.3 JcGASA6基因 3′RACE | 第25-30页 |
2.2.4 JcGASA6基因 5′RACE | 第30-33页 |
2.2.5 JcGASA6全长cDNA克隆 | 第33-38页 |
2.3 结果与分析 | 第38-46页 |
2.3.1 麻疯树花蕾总RNA的提取及检测 | 第38页 |
2.3.2 麻疯树JcGASA6基因的全长克隆 | 第38-43页 |
2.3.3 麻疯树JcGASA6基因的生物信息学分析 | 第43-46页 |
2.4 讨论 | 第46-48页 |
第三章 JcGASA6在麻疯树花不同发育时期的表达 | 第48-57页 |
3.1 实验材料 | 第48-49页 |
3.1.1 麻疯树花蕾 | 第48页 |
3.1.2 实验主要试剂及耗材 | 第48页 |
3.1.3 试验主要仪器 | 第48-49页 |
3.1.4 试验所用引物 | 第49页 |
3.2 实验方法 | 第49-51页 |
3.2.1 引物设计 | 第49页 |
3.2.2 不同发育时期麻疯树花蕾筛选 | 第49页 |
3.2.3 麻疯树花蕾各时期总RNA的提取及检测 | 第49-50页 |
3.2.4 不同发育时期麻疯树花蕾cDNA的合成 | 第50页 |
3.2.5 实时荧光定量RT-qPCR反应 | 第50-51页 |
3.2.6 JcGASA6基因在不同花发育时期的表达分析 | 第51页 |
3.3 结果与分析 | 第51-56页 |
3.3.1 不同发育时期麻疯树花蕾的筛选 | 第51-52页 |
3.3.2 麻疯树花蕾各时期总RNA的提取及检测 | 第52-53页 |
3.3.3 JcGASA6基因在不同花发育时期的表达情况 | 第53-56页 |
3.4 讨论 | 第56-57页 |
第四章 JcGASA6亚细胞定位分析 | 第57-71页 |
4.1 实验材料 | 第57-59页 |
4.1.1 材料、载体与菌株 | 第57页 |
4.1.2 实验主要试剂 | 第57-59页 |
4.2 实验方法 | 第59-66页 |
4.2.1 引物设计 | 第59页 |
4.2.2 质粒的提取 | 第59-60页 |
4.2.3 载体pBWA(V)HS-GASA6-osgfp的构建 | 第60-64页 |
4.2.4 质粒pBWA(V)HS-GASA6-osgfp的抽提 | 第64页 |
4.2.5 水稻原生质体的转化 | 第64-66页 |
4.3 结果与分析 | 第66-70页 |
4.3.2 JcGASA6蛋白初步定位 | 第68-69页 |
4.3.3 JcGASA6蛋白精确定位 | 第69-70页 |
4.4 讨论 | 第70-71页 |
第五章 JcGASA6原核表达研究 | 第71-98页 |
5.1 实验材料 | 第71-72页 |
5.1.1 材料、载体与菌株 | 第71页 |
5.1.2 实验主要试剂 | 第71-72页 |
5.1.3 试验主要仪器 | 第72页 |
5.2 实验方法 | 第72-82页 |
5.2.1 引物设计 | 第72页 |
5.2.2 质粒的提取 | 第72-73页 |
5.2.3 原核表达载体pCold II-JcGASA6的构建 | 第73-76页 |
5.2.4 质粒pCold II-JcGASA6在大肠杆菌系统中的表达 | 第76-81页 |
5.2.5 JcGASA6蛋白质分析 | 第81-82页 |
5.3 结果与分析 | 第82-96页 |
5.3.1 原核表达载体pCold II-JcGASA6的构建 | 第82-85页 |
5.3.2 质粒pCold II-JcGASA6在大肠杆菌系统中的表达 | 第85-92页 |
5.3.4 JcGASA6与AtGASA氨基酸序列比对及进化树的构建 | 第92-96页 |
5.4 讨论 | 第96-98页 |
第六章 结论与展望 | 第98-100页 |
6.1 主要结论 | 第98-99页 |
6.2 创新点 | 第99页 |
6.3 展望 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
参考文献 | 第101-109页 |