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麻疯树GASA6基因克隆及其原核表达分析

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
缩略词第9-10页
第一章 引言第10-18页
    1.1 植物外源激素对麻疯树花发育的影响第10-11页
    1.2 赤霉素信号途径相关基因第11-13页
        1.2.1 赤霉素信号转导途第11-12页
        1.2.2 GASA基因家族第12-13页
    1.3 麻疯树花的研究进展第13-15页
        1.3.1 麻疯树花形态和解剖结构研究方面第13-14页
        1.3.2 麻疯树花发育的相关基因研究第14-15页
    1.4 研究目的和研究意义第15-17页
    1.5 技术路线图第17-18页
第二章 JcGASA6的克隆及序列分析第18-48页
    2.1 实验材料第18-21页
        2.1.1 麻疯树花蕾第18页
        2.1.2 实验主要试剂及耗材第18-19页
        2.1.3 试验主要仪器第19页
        2.1.4 大肠杆菌培养基第19-20页
            2.1.4.1 LB固体培养基第19-20页
        2.1.5 试验所用引物第20-21页
    2.2 实验方法第21-38页
        2.2.1 麻疯树花蕾总RNA的提取及检测第21-22页
        2.2.2 cDNA第一链的合成第22-25页
        2.2.3 JcGASA6基因 3′RACE第25-30页
        2.2.4 JcGASA6基因 5′RACE第30-33页
        2.2.5 JcGASA6全长cDNA克隆第33-38页
    2.3 结果与分析第38-46页
        2.3.1 麻疯树花蕾总RNA的提取及检测第38页
        2.3.2 麻疯树JcGASA6基因的全长克隆第38-43页
        2.3.3 麻疯树JcGASA6基因的生物信息学分析第43-46页
    2.4 讨论第46-48页
第三章 JcGASA6在麻疯树花不同发育时期的表达第48-57页
    3.1 实验材料第48-49页
        3.1.1 麻疯树花蕾第48页
        3.1.2 实验主要试剂及耗材第48页
        3.1.3 试验主要仪器第48-49页
        3.1.4 试验所用引物第49页
    3.2 实验方法第49-51页
        3.2.1 引物设计第49页
        3.2.2 不同发育时期麻疯树花蕾筛选第49页
        3.2.3 麻疯树花蕾各时期总RNA的提取及检测第49-50页
        3.2.4 不同发育时期麻疯树花蕾cDNA的合成第50页
        3.2.5 实时荧光定量RT-qPCR反应第50-51页
        3.2.6 JcGASA6基因在不同花发育时期的表达分析第51页
    3.3 结果与分析第51-56页
        3.3.1 不同发育时期麻疯树花蕾的筛选第51-52页
        3.3.2 麻疯树花蕾各时期总RNA的提取及检测第52-53页
        3.3.3 JcGASA6基因在不同花发育时期的表达情况第53-56页
    3.4 讨论第56-57页
第四章 JcGASA6亚细胞定位分析第57-71页
    4.1 实验材料第57-59页
        4.1.1 材料、载体与菌株第57页
        4.1.2 实验主要试剂第57-59页
    4.2 实验方法第59-66页
        4.2.1 引物设计第59页
        4.2.2 质粒的提取第59-60页
        4.2.3 载体pBWA(V)HS-GASA6-osgfp的构建第60-64页
        4.2.4 质粒pBWA(V)HS-GASA6-osgfp的抽提第64页
        4.2.5 水稻原生质体的转化第64-66页
    4.3 结果与分析第66-70页
        4.3.2 JcGASA6蛋白初步定位第68-69页
        4.3.3 JcGASA6蛋白精确定位第69-70页
    4.4 讨论第70-71页
第五章 JcGASA6原核表达研究第71-98页
    5.1 实验材料第71-72页
        5.1.1 材料、载体与菌株第71页
        5.1.2 实验主要试剂第71-72页
        5.1.3 试验主要仪器第72页
    5.2 实验方法第72-82页
        5.2.1 引物设计第72页
        5.2.2 质粒的提取第72-73页
        5.2.3 原核表达载体pCold II-JcGASA6的构建第73-76页
        5.2.4 质粒pCold II-JcGASA6在大肠杆菌系统中的表达第76-81页
        5.2.5 JcGASA6蛋白质分析第81-82页
    5.3 结果与分析第82-96页
        5.3.1 原核表达载体pCold II-JcGASA6的构建第82-85页
        5.3.2 质粒pCold II-JcGASA6在大肠杆菌系统中的表达第85-92页
        5.3.4 JcGASA6与AtGASA氨基酸序列比对及进化树的构建第92-96页
    5.4 讨论第96-98页
第六章 结论与展望第98-100页
    6.1 主要结论第98-99页
    6.2 创新点第99页
    6.3 展望第99-100页
致谢第100-101页
参考文献第101-109页

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