英文缩写 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-15页 |
前言 | 第15-17页 |
文献回顾 | 第17-49页 |
第一部分:慢性粒细胞白血病的分子致病机制 | 第17-28页 |
一 bcr-abl融合基因的分子生物学特性 | 第17-21页 |
二 bcr-abl融合基因诱导的慢性粒细胞白血病发生 | 第21-22页 |
三 与bcr-abl融合基因致病性相关的功能区 | 第22-24页 |
四 bcr-abl融合基因诱导的几种重要的信号传导途径 | 第24-28页 |
第二部分:慢性粒细胞白血病治疗现状及进展 | 第28-40页 |
一 慢性粒细胞白血病的常规治疗 | 第28-34页 |
(一) 慢性粒细胞白血病的临床分期 | 第28-29页 |
(二) 慢性粒细胞白血病的常规治疗 | 第29-34页 |
二 慢性粒细胞白血病的基因治疗策略 | 第34-40页 |
第三部分:慢性粒细胞白血病bcr-abl基因免疫的研究进展 | 第40-49页 |
一 基因疫苗的发展状况 | 第40-42页 |
二 基因疫苗诱导特异性CTL的分子机制 | 第42-46页 |
三 基因免疫有关的表达载体 | 第46-47页 |
四 基因免疫的接种途径 | 第47-48页 |
五 基因免疫的优越性 | 第48-49页 |
实验材料 | 第49-54页 |
一 质粒与细胞系 | 第49-50页 |
二 主要试剂 | 第50-51页 |
三 主要溶液 | 第51-53页 |
四 主要仪器 | 第53-54页 |
实验方法 | 第54-67页 |
一 PCR引物设计与合成 | 第54-55页 |
二 重组克隆载体pGEM3Zf/bcr-abl的构建及DNA序列分析 | 第55-57页 |
三 重组真核表达载体的构建及鉴定 | 第57-62页 |
(一) 真核表达载体pcDNA3.1/bcr-abl的构建 | 第57-59页 |
(二) 与本实验有关的分子生物学实验 | 第59-62页 |
四 pcDNA3.1/bcr-abl在COS-7细胞中的表达 | 第62-63页 |
(一) 电穿孔法介导的重组真核表达载体细胞转染 | 第62-63页 |
(二) RT-PCR检测COS-7细胞中bcr-abl mRNA的表达 | 第63页 |
五 稳定转染细胞系p815/pcDNA3.1-bcr-abl的建立 | 第63-64页 |
六 bcr-abl基因免疫 | 第64-65页 |
七 pcDNA3.1/bcr-abl诱导特异性CTL杀伤实验 | 第65-67页 |
实验结果 | 第67-76页 |
一 PCR扩增bcr-abl融合基因片段 | 第67页 |
二 重组克隆载体pGEM3Zf的构建 | 第67-68页 |
三 DNA序列分析 | 第68-71页 |
四 真核表达载体pcDNA3.1/bcr-abl的构建及鉴定 | 第71-72页 |
五 COS-7转化细胞中bcr-abl mRNA水平的表达检测 | 第72-73页 |
六 p815细胞中bcr-abl mRNA的表达检测 | 第73-74页 |
七 bcr-abl基因免疫诱导特异性CTL杀伤 | 第74-76页 |
讨论 | 第76-87页 |
一 PCR引物设计 | 第77-79页 |
二 含bcr-abl融合基因的重组克隆载体及真核表达载体的构建 | 第79-80页 |
三 电穿孔技术介导的bcr-abl融合基因转染 | 第80-82页 |
四 bcr-abl融合基因的瞬时及稳定表达 | 第82-83页 |
五 bcr-abl融合基因免疫诱导的特异性CTL杀伤实验 | 第83-85页 |
六 存在的问题及展望 | 第85-87页 |
小结 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-100页 |
附录 | 第100页 |