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慢性粒细胞白血病bcr-abl融合基因克隆、表达及其免疫诱导特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)杀伤功能的实验研究

英文缩写第1-8页
中文摘要第8-11页
ABSTRACT第11-15页
前言第15-17页
文献回顾第17-49页
 第一部分:慢性粒细胞白血病的分子致病机制第17-28页
  一 bcr-abl融合基因的分子生物学特性第17-21页
  二 bcr-abl融合基因诱导的慢性粒细胞白血病发生第21-22页
  三 与bcr-abl融合基因致病性相关的功能区第22-24页
  四 bcr-abl融合基因诱导的几种重要的信号传导途径第24-28页
 第二部分:慢性粒细胞白血病治疗现状及进展第28-40页
  一 慢性粒细胞白血病的常规治疗第28-34页
   (一) 慢性粒细胞白血病的临床分期第28-29页
   (二) 慢性粒细胞白血病的常规治疗第29-34页
  二 慢性粒细胞白血病的基因治疗策略第34-40页
 第三部分:慢性粒细胞白血病bcr-abl基因免疫的研究进展第40-49页
  一 基因疫苗的发展状况第40-42页
  二 基因疫苗诱导特异性CTL的分子机制第42-46页
  三 基因免疫有关的表达载体第46-47页
  四 基因免疫的接种途径第47-48页
  五 基因免疫的优越性第48-49页
实验材料第49-54页
 一 质粒与细胞系第49-50页
 二 主要试剂第50-51页
 三 主要溶液第51-53页
 四 主要仪器第53-54页
实验方法第54-67页
 一 PCR引物设计与合成第54-55页
 二 重组克隆载体pGEM3Zf/bcr-abl的构建及DNA序列分析第55-57页
 三 重组真核表达载体的构建及鉴定第57-62页
  (一) 真核表达载体pcDNA3.1/bcr-abl的构建第57-59页
  (二) 与本实验有关的分子生物学实验第59-62页
 四 pcDNA3.1/bcr-abl在COS-7细胞中的表达第62-63页
  (一) 电穿孔法介导的重组真核表达载体细胞转染第62-63页
  (二) RT-PCR检测COS-7细胞中bcr-abl mRNA的表达第63页
 五 稳定转染细胞系p815/pcDNA3.1-bcr-abl的建立第63-64页
 六 bcr-abl基因免疫第64-65页
 七 pcDNA3.1/bcr-abl诱导特异性CTL杀伤实验第65-67页
实验结果第67-76页
 一 PCR扩增bcr-abl融合基因片段第67页
 二 重组克隆载体pGEM3Zf的构建第67-68页
 三 DNA序列分析第68-71页
 四 真核表达载体pcDNA3.1/bcr-abl的构建及鉴定第71-72页
 五 COS-7转化细胞中bcr-abl mRNA水平的表达检测第72-73页
 六 p815细胞中bcr-abl mRNA的表达检测第73-74页
 七 bcr-abl基因免疫诱导特异性CTL杀伤第74-76页
讨论第76-87页
 一 PCR引物设计第77-79页
 二 含bcr-abl融合基因的重组克隆载体及真核表达载体的构建第79-80页
 三 电穿孔技术介导的bcr-abl融合基因转染第80-82页
 四 bcr-abl融合基因的瞬时及稳定表达第82-83页
 五 bcr-abl融合基因免疫诱导的特异性CTL杀伤实验第83-85页
 六 存在的问题及展望第85-87页
小结第87-88页
致谢第88-89页
参考文献第89-100页
附录第100页

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