| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-33页 |
| ·次生代谢物在医药领域的重要性 | 第15页 |
| ·分子生物学的出现对研究和发展天然产物的重要性 | 第15页 |
| ·代谢工程 | 第15-18页 |
| ·遗传改造的酿酒酵母生产具有药用价值的小分子化合物 | 第18-26页 |
| ·黄酮类和别的苯丙烷代谢途径上的天然产物 | 第18-22页 |
| ·萜类 | 第22-26页 |
| ·代谢物在细胞水平上的分析 | 第26-31页 |
| ·酶学测定方法 | 第26-27页 |
| ·色谱质谱联用测定法 | 第27-31页 |
| ·数据挖掘 | 第31-32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 第二章 遗传改造酿酒酵母萜类生物合成途径分子生 物学的方法建立 | 第33-62页 |
| ·前言 | 第33-38页 |
| ·材料和方法 | 第38-44页 |
| ·菌株及常用质粒载体 | 第38页 |
| ·试剂（盒）、酶及引物 | 第38-41页 |
| ·培养基 | 第41-44页 |
| ·自配的主要标准试剂 | 第44-45页 |
| ·仪器和设备 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-55页 |
| ·酵母菌的活化 | 第46页 |
| ·敲除盒的构建 | 第46-51页 |
| ·感受态酿酒酵母的制备 | 第51页 |
| ·酿酒酵母的转染（LiAc/SS-DNA/PEG 酵母转染法） | 第51-52页 |
| ·单基因敲除酵母转化子的PCR 快速筛选鉴定 | 第52-53页 |
| ·双敲除酵母菌株的构建 | 第53页 |
| ·Ura3 基因的剔除 | 第53-54页 |
| ·Ura3 基因剔除的验证 | 第54页 |
| ·DNA 或RNA 的定量分析 | 第54页 |
| ·YPD 培养液中生长曲线实验 | 第54页 |
| ·生长动力学实验 | 第54-55页 |
| ·结果 | 第55-60页 |
| ·敲除盒的构建 | 第55-56页 |
| ·鉴定 | 第56-58页 |
| ·新菌株的确定 | 第58页 |
| ·时间生长曲线实验(time-growth curve) | 第58-59页 |
| ·生长动力学研究 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60页 |
| ·小结 | 第60-62页 |
| 第三章 LC–MS 测定酿酒酵母中GGPP 的含量的方法建立 | 第62-73页 |
| ·前言 | 第62-63页 |
| ·仪器与试剂 | 第63页 |
| ·仪器 | 第63页 |
| ·试剂 | 第63页 |
| ·酿酒酵母中GGPP 的含量测定 | 第63-71页 |
| ·实验条件 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-64页 |
| ·结果 | 第64-71页 |
| ·讨论 | 第71-72页 |
| ·pH 对质谱响应的影响 | 第71页 |
| ·柱温对峰形的影响 | 第71页 |
| ·遗传改造对于GGPP 含量的影响 | 第71-72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 第四章 GC–MS 测定萜类生物合成途径上各代谢物的方法建立及其在酿酒酵母中的应用 | 第73-116页 |
| ·前言 | 第73页 |
| ·酵母前处理方法研究 | 第73-84页 |
| ·仪器和试剂 | 第75页 |
| ·方法与结果 | 第75-84页 |
| ·酵母中萜类生物合成途径上各中间体的含量测定 | 第84-111页 |
| ·仪器和试剂 | 第85页 |
| ·方法和结果 | 第85-106页 |
| ·样品测定 | 第106-111页 |
| ·讨论 | 第111-114页 |
| ·小结 | 第114-116页 |
| 第五章 建立荧光分析和化学发光分析细胞有机体生理活动的方法 | 第116-136页 |
| ·前言 | 第116-117页 |
| ·罗丹明6G(rhodamine 6G)考察酵母菌膜转运蛋白的外排能力 | 第117-121页 |
| ·试剂 | 第117页 |
| ·仪器 | 第117页 |
| ·方法 | 第117-118页 |
| ·结果 | 第118-120页 |
| ·讨论 | 第120-121页 |
| ·利用 JC-1 考察酵母菌膜电位 | 第121-125页 |
| ·试剂 | 第121页 |
| ·仪器 | 第121-122页 |
| ·方法 | 第122页 |
| ·结果 | 第122-124页 |
| ·讨论 | 第124-125页 |
| ·利用 DCFH-DA 检测内源性活性氧 | 第125-129页 |
| ·试剂 | 第125页 |
| ·仪器 | 第125页 |
| ·方法 | 第125-126页 |
| ·结果 | 第126-129页 |
| ·讨论 | 第129页 |
| ·化学发光测量ATP 含量 | 第129-136页 |
| ·试剂 | 第129-130页 |
| ·仪器 | 第130页 |
| ·方法 | 第130-131页 |
| ·结果 | 第131-134页 |
| ·讨论 | 第134-136页 |
| 研究总结 | 第136-139页 |
| 参考文献 | 第139-152页 |
| 附录: 论文研究中常用的载体图谱 | 第152-154页 |
| 致谢 | 第154页 |
