| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 引言 | 第8-14页 |
| ·果蔬褐化 | 第8-10页 |
| ·果蔬褐化对食品加工业的影响 | 第8页 |
| ·食品加工中常用的抑制果蔬褐化的方法 | 第8-9页 |
| ·基因工程抑制果蔬褐化的研究 | 第9-10页 |
| ·植物体内存在大量的酚类物质及多酚氧化酶 | 第9页 |
| ·植物中存在的多酚氧化酶的分子生物学性质 | 第9页 |
| ·植物中多酚氧化酶基因的克隆与表达 | 第9-10页 |
| ·马铃薯薯块褐化 | 第10-11页 |
| ·马铃薯的多酚氧化酶 | 第10页 |
| ·马铃薯的多酚氧化酶基因及其表达 | 第10-11页 |
| ·马铃薯多酚氧化酶的生理功能 | 第11页 |
| ·基因工程研究薯块褐化的进展 | 第11页 |
| ·基因沉默和基因沉默技术 | 第11-14页 |
| ·基因沉默的发现 | 第11-12页 |
| ·植物中的转录后基因沉默 | 第12页 |
| ·基因沉默技术在植物转基因中的发展 | 第12-14页 |
| 2 材料和方法 | 第14-26页 |
| ·材料 | 第14-15页 |
| ·植物材料 | 第14页 |
| ·质粒和菌种 | 第14页 |
| ·化学试剂 | 第14页 |
| ·酶及抗体 | 第14页 |
| ·PCR引物 | 第14-15页 |
| ·植物激素、抗生素及除草剂 | 第15页 |
| ·实验仪器 | 第15页 |
| ·方法 | 第15-26页 |
| ·多酚氧化酶基因POT33 的克隆 | 第15-17页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第15-16页 |
| ·引物设计与PCR扩增 | 第16页 |
| ·原核表达载体 pET-28a(+)-POT33 的构建 | 第16-17页 |
| ·重组质粒 pET-28a(+)-POT33 中 POT33 的测序 | 第17页 |
| ·植物双元高效沉默载体的构建 | 第17-22页 |
| ·中间载体pKANNABAL-ihpPOT33 的构建 | 第17-20页 |
| ·组成型高效沉默载体pMBW330-ihpPOT33 的构建及转化 | 第20-21页 |
| ·薯块特异性高效沉默载体 pGB121s-ihpPOT33 的构建及转化 | 第21-22页 |
| ·农杆菌介导的马铃薯转化 | 第22-23页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第23页 |
| ·再生植株的多酚氧化酶活性检测 | 第23-24页 |
| ·多酚氧化酶的提取 | 第23-24页 |
| ·多酚氧化酶活性的定量检测 | 第24页 |
| ·再生植株的Western检测 | 第24-26页 |
| 3 结果 | 第26-35页 |
| ·多酚氧化酶基因POT33 的克隆 | 第26-27页 |
| ·高效沉默双元载体的构建及鉴定 | 第27-31页 |
| ·带有反向重复的POT33 部分序列的重组载体pKANNABAL-ihpPOT33 的构建和鉴定 | 第27-29页 |
| ·组成型沉默的双元载体pMBW330-ihpPOT33 的构建及鉴定 | 第29-30页 |
| ·薯块中诱导沉默的双元载体 pGB121s-ihpPOT33 的构建及鉴定 | 第30-31页 |
| ·农杆菌介导的马铃薯转化 | 第31-32页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第32-33页 |
| ·再生植株的Western检测 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| ·RNA干扰技术在多倍体研究上的意义 | 第35-36页 |
| ·多酚氧化酶低表达的马铃薯再生植株的获得及鉴定 | 第36-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 附录 | 第42-44页 |
| 致谢 | 第44页 |
