摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
前言 | 第12-13页 |
1 环境雌激素诱导鱼类卵黄原蛋白产生及其机制研究进展 | 第13-23页 |
·卵黄原蛋白概述 | 第13页 |
·诱导鱼类产生VTG 的环境雌激素 | 第13-14页 |
·以VTG 为生物标志物的环境雌激素筛选方法 | 第14-15页 |
·生化检测法 | 第14-15页 |
·细胞培养 | 第15页 |
·分子生物学检测法 | 第15页 |
·环境雌激素诱导VTG 产生与结构的相关性 | 第15-20页 |
·烷基酚类化合物 | 第15-16页 |
·植物雌激素 | 第16-18页 |
·合成雌激素 | 第18-19页 |
·多氯联苯类化合物 | 第19页 |
·邻苯二甲酸酯类化合物 | 第19-20页 |
·VTG 产生及其诱导机制 | 第20-21页 |
·直接与雌激素受体结合的诱导机制 | 第20-21页 |
·间接与雌激素受体结合的诱导机制 | 第21页 |
·研究展望 | 第21-23页 |
2 金鱼卵黄原蛋白 mRNA 特性研究 | 第23-39页 |
·材料与方法 | 第23-31页 |
·实验动物 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·样本采集 | 第24页 |
·RNA 提取 | 第24页 |
·RNA 浓度测定和电泳检测 | 第24-25页 |
·AMV-RT 反应体系 | 第25页 |
·引物设计 | 第25-27页 |
·PCR 反应 | 第27-28页 |
·PCR 扩增条带的凝胶回收与测序 | 第28-29页 |
·扩增片段的克隆 | 第29-31页 |
·扩增cDNA 序列的特异性检测 | 第31页 |
·结果与分析 | 第31-38页 |
·电泳检测RNA 质量 | 第31-32页 |
·金鱼肝脏VTG mRNA 特异性序列的克隆 | 第32-33页 |
·金鱼肝脏扩增cDNA 片段特异性比对 | 第33-38页 |
·讨论 | 第38-39页 |
3 久效磷对雄性金鱼VTG 的诱导 | 第39-43页 |
·材料与方法 | 第39-41页 |
·实验动物 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39页 |
·主要仪器 | 第39-40页 |
·久效磷暴露实验 | 第40页 |
·取样及样品处理 | 第40页 |
·VTG 免疫印迹实验 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
4 久效磷诱导雄性金鱼 VTG mRNA 表达的检测 | 第43-53页 |
·材料与方法 | 第43-48页 |
·实验动物 | 第43页 |
·主要试剂 | 第43-44页 |
·主要仪器 | 第44页 |
·MCP 和E_2 暴露实验 | 第44页 |
·取样及样品处理 | 第44页 |
·久效磷和E2 暴露组金鱼肝脏总RNA 的提取 | 第44页 |
·Northern-blot 检测久效磷暴露金鱼VTG mRNA 的表达 | 第44-48页 |
·结果与分析 | 第48-51页 |
·久效磷及E_2 暴露组金鱼肝脏总RNA 的提取 | 第48-49页 |
·质粒的提取 | 第49页 |
·DNA 模板的获得 | 第49-50页 |
·RNA 探针的地高辛标记 | 第50-51页 |
·Northern blot 结果 | 第51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
个人简历 | 第60-61页 |
发表的学术论文 | 第61页 |