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金鱼(Carassius auratus)卵黄原蛋白mRNA特性及其在环境雌激素筛选中的应用

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
前言第12-13页
1 环境雌激素诱导鱼类卵黄原蛋白产生及其机制研究进展第13-23页
   ·卵黄原蛋白概述第13页
   ·诱导鱼类产生VTG 的环境雌激素第13-14页
   ·以VTG 为生物标志物的环境雌激素筛选方法第14-15页
     ·生化检测法第14-15页
     ·细胞培养第15页
     ·分子生物学检测法第15页
   ·环境雌激素诱导VTG 产生与结构的相关性第15-20页
     ·烷基酚类化合物第15-16页
     ·植物雌激素第16-18页
     ·合成雌激素第18-19页
     ·多氯联苯类化合物第19页
     ·邻苯二甲酸酯类化合物第19-20页
   ·VTG 产生及其诱导机制第20-21页
     ·直接与雌激素受体结合的诱导机制第20-21页
     ·间接与雌激素受体结合的诱导机制第21页
   ·研究展望第21-23页
2 金鱼卵黄原蛋白 mRNA 特性研究第23-39页
   ·材料与方法第23-31页
     ·实验动物第23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要仪器第23-24页
     ·样本采集第24页
     ·RNA 提取第24页
     ·RNA 浓度测定和电泳检测第24-25页
     ·AMV-RT 反应体系第25页
     ·引物设计第25-27页
     ·PCR 反应第27-28页
     ·PCR 扩增条带的凝胶回收与测序第28-29页
     ·扩增片段的克隆第29-31页
     ·扩增cDNA 序列的特异性检测第31页
   ·结果与分析第31-38页
     ·电泳检测RNA 质量第31-32页
     ·金鱼肝脏VTG mRNA 特异性序列的克隆第32-33页
     ·金鱼肝脏扩增cDNA 片段特异性比对第33-38页
   ·讨论第38-39页
3 久效磷对雄性金鱼VTG 的诱导第39-43页
   ·材料与方法第39-41页
     ·实验动物第39页
     ·主要试剂第39页
     ·主要仪器第39-40页
     ·久效磷暴露实验第40页
     ·取样及样品处理第40页
     ·VTG 免疫印迹实验第40-41页
   ·结果与分析第41页
   ·讨论第41-43页
4 久效磷诱导雄性金鱼 VTG mRNA 表达的检测第43-53页
   ·材料与方法第43-48页
     ·实验动物第43页
     ·主要试剂第43-44页
     ·主要仪器第44页
     ·MCP 和E_2 暴露实验第44页
     ·取样及样品处理第44页
     ·久效磷和E2 暴露组金鱼肝脏总RNA 的提取第44页
     ·Northern-blot 检测久效磷暴露金鱼VTG mRNA 的表达第44-48页
   ·结果与分析第48-51页
     ·久效磷及E_2 暴露组金鱼肝脏总RNA 的提取第48-49页
     ·质粒的提取第49页
     ·DNA 模板的获得第49-50页
     ·RNA 探针的地高辛标记第50-51页
     ·Northern blot 结果第51页
   ·讨论第51-53页
5 结论第53-54页
参考文献第54-59页
致谢第59-60页
个人简历第60-61页
发表的学术论文第61页

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