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TaqMan-MGB探针双重荧光定量PCR方法绝对定量MDV-Ⅰ和HVT

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-14页
文献综述第14-25页
 1 马立克氏病的研究进展第14-19页
   ·MD 病原学第14-15页
   ·MD 的发病机理第15-17页
   ·MDV 的基因组学和蛋白组学第17-18页
   ·MDV 的毒力演化第18-19页
 2 马立克氏病疫苗的研究进展第19-21页
   ·疫苗类型第19页
   ·MD 疫苗的免疫机理第19-20页
   ·MD 疫苗抗肿瘤作用的可能机理第20页
   ·马立克氏病疫苗免疫失败的主要原因第20-21页
 3 实时荧光定量PCR 技术(FQ-PCR)的研究进展第21-24页
   ·原理第21-22页
   ·荧光定量方法的类型第22-23页
   ·实时荧光定量PCR 技术的应用第23-24页
 4 结语第24-25页
试验部分第25-54页
 1 引言第25-26页
 2 材料与方法第26-38页
   ·材料第26-28页
     ·毒株、菌种与质粒第26页
     ·主要试剂第26页
     ·主要仪器第26页
     ·鸡胚和实验动物第26页
     ·临床病料第26-27页
     ·试剂配制第27-28页
   ·方法第28-38页
     ·MDV-1 UL36 基因和MDV-3 Bcl-2 蛋白基因的克隆与序列测定第28-32页
     ·MDV 双重荧光定量PCR 标准品的建立第32-36页
     ·临床发病鸡AGP、PCR 及FQ-PCR 的检测第36页
     ·实验免疫攻毒鸡羽囊病毒的检测第36-38页
 3 结果与分析第38-51页
   ·MDV-1 UL36 基因和MDV-3 Bcl-2 蛋白基因的克隆与测序结果第38-41页
     ·UL36 基因和Bcl-2 蛋白基因的PCR 扩增第38页
     ·重组质粒的鉴定第38-40页
     ·DNA 测序结果与原始序列的比较第40-41页
   ·MDV 双重荧光定量PCR 标准品的建立第41-47页
     ·pBJ-U 和pHV-B 阳性质粒OD 值的测定结果第41页
     ·pBJ-U 和pHV-B 阳性质粒DNA 拷贝数的计算结果第41页
     ·荧光PCR 引物扩增目的片段的验证第41-42页
     ·双重定量PCR 不交叉反应的试验结果第42-43页
     ·MDV 双重FQ-PCR 检测方法的稳定性试验结果第43-44页
     ·MDV 双重FQ-PCR 检测方法的敏感性试验结果第44-46页
     ·MDV 双重FQ-PCR 检测方法的特异性试验结果第46-47页
   ·临床发病鸡的AGP、PCR 和FQ-PCR 检测结果第47-48页
     ·羽囊AGP 检测结果第47页
     ·临床发病鸡的PCR 和FQ-PCR 检测结果第47-48页
   ·实验免疫攻毒鸡的AGP 和FQ-PCR 的检测第48-51页
     ·羽囊的AGP 检测结果第48页
     ·荧光定量PCR 检测结果第48-51页
 4 讨论第51-54页
   ·MDV 双重荧光定量PCR 方法的建立第51-52页
   ·临床发病鸡不同组织样品的检测第52页
   ·FQ-PCR 对实验免疫攻毒鸡羽囊样品的检测第52-54页
结论第54-55页
参考文献第55-60页
致谢第60-61页
作者简介第61页

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