| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-30页 |
| ·甲壳动物内分泌系统的研究 | 第12-18页 |
| ·甲壳动物内分泌结构的研究 | 第12-14页 |
| ·甲壳动物眼柄激素的研究 | 第14-17页 |
| ·甲壳动物高血糖激素 | 第15页 |
| ·甲壳动物蜕皮抑制激素 | 第15-16页 |
| ·甲壳动物性腺抑制激素 | 第16页 |
| ·甲壳动物大颚器抑制激素 | 第16-17页 |
| ·中华绒螯蟹眼柄视上神经节结构的研究 | 第17-18页 |
| ·中华绒螯蟹性早熟机制的研究 | 第18-22页 |
| ·中华绒螯蟹性早熟的自身因素 | 第19-20页 |
| ·中华绒螯蟹性早熟的环境因素 | 第20-21页 |
| ·中华绒螯蟹性早熟的人为因素 | 第21-22页 |
| ·cDNA文库的构建方法 | 第22-29页 |
| ·差减cDNA文库 | 第22-24页 |
| ·全长cDNA文库 | 第24-25页 |
| ·其他构建文库的方法 | 第25-26页 |
| ·抑制消减杂交法(SSH) | 第26-29页 |
| ·研究目的和意义 | 第29-30页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第30-45页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要实验仪器 | 第30-31页 |
| ·接头和引物序列 | 第31-32页 |
| ·cDNA synthesis Primer | 第31页 |
| ·Adaptor 1/Adaptor 2R | 第31-32页 |
| ·PCR Primer 1 | 第32页 |
| ·Nested PCR Primer 1/Nested PCR Primer 2R | 第32页 |
| ·中华绒螯蟹看家基因Beta-actin序列 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-45页 |
| ·中华绒螯蟹眼柄视上神经节和肌肉总RNA的提取 | 第32-34页 |
| ·cDNA的合成 | 第34-35页 |
| ·反转录cDNA第一链的合成 | 第34页 |
| ·cDNA第二链的合成 | 第34-35页 |
| ·Rsa Ⅰ酶切双链cDNA | 第35页 |
| ·接头连接 | 第35-36页 |
| ·Tester cDNA接头连接效率检测 | 第36-37页 |
| ·杂交 | 第37-39页 |
| ·第一次杂交 | 第37-38页 |
| ·第二次杂交 | 第38-39页 |
| ·PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·第一次PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·第二次PCR扩增 | 第40页 |
| ·消减杂交效率检测 | 第40-41页 |
| ·消减文库的构建与效价评价 | 第41-44页 |
| ·PCR产物纯化 | 第41-42页 |
| ·PCR产物与T-载体连接(T/A克隆) | 第42页 |
| ·连接产物转化 | 第42-43页 |
| ·阳性重组菌落的分离培养 | 第43页 |
| ·PCR扩增鉴定克隆插入片段大小 | 第43-44页 |
| ·消减文库序列分析 | 第44-45页 |
| 第三章 实验结果和讨论 | 第45-64页 |
| ·总RNA的提取 | 第45-47页 |
| ·紫外分光光度计检测结果 | 第45-46页 |
| ·1.0%琼脂糖凝胶电泳检测结果 | 第46-47页 |
| ·Rsa Ⅰ酶切效果检测 | 第47-48页 |
| ·Tester cDNA接头连接效率检测 | 第48-49页 |
| ·PCR扩增结果 | 第49-51页 |
| ·第一次扩增 | 第49-50页 |
| ·第二次扩增 | 第50-51页 |
| ·消减效率的检测 | 第51-52页 |
| ·PCR产物纯化电泳检测结果 | 第52-53页 |
| ·消减文库质量的检测 | 第53-55页 |
| ·蓝白斑筛选阳性克隆 | 第53页 |
| ·PCR扩增检测消减文库的克隆插入片断大小 | 第53-55页 |
| ·消减cDNA序列分析 | 第55-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-74页 |
| 致谢 | 第74页 |