| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-22页 |
| ·植物谷胱甘肽转移酶的研究进展 | 第10-13页 |
| ·谷胱甘肽转移酶的分布和分类 | 第10页 |
| ·谷胱甘肽转移酶的结构特征 | 第10-11页 |
| ·谷胱甘肽转移酶的催化机理 | 第11-12页 |
| ·谷胱甘肽转移酶的诱导表达及其功能 | 第12-13页 |
| ·转谷胱甘肽转移酶基因植物的研究进展 | 第13页 |
| ·植物半胱氨酸合成酶的研究进展 | 第13-20页 |
| ·植物半胱氨酸的合成和调节 | 第13-14页 |
| ·半胱氨酸复合体的结构 | 第14-16页 |
| ·SAT/OAS-TL复合体及调控机理 | 第16-17页 |
| ·转SAT和OAS-TL基因植物的研究进展 | 第17-20页 |
| ·关于西伯利亚蓼的研究 | 第20页 |
| ·本课题的研究背景、目的和意义 | 第20-22页 |
| 2 西伯利亚蓼GST和CS基因的序列分析及盐胁迫下表达特性的研究 | 第22-34页 |
| ·材料和方法 | 第22-24页 |
| ·植物材料及盐胁迫处理 | 第22页 |
| ·实验试剂 | 第22页 |
| ·GST和CS基因的序列分析 | 第22页 |
| ·荧光定量RT-PCR对盐胁迫下GST和CS基因转录表达特征的分析 | 第22-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-33页 |
| ·西伯利亚蓼GST全长基因序列分析 | 第24-28页 |
| ·西伯利亚蓼CS全长基因序列分析 | 第28-30页 |
| ·盐胁迫和去胁迫下GST和CS基因的荧光定量RT-PCR分析 | 第30-33页 |
| ·本章小结 | 第33-34页 |
| 3 西伯利亚蓼GST在大肠杆菌中的表达及其耐受盐胁迫的特征 | 第34-39页 |
| ·材料和方法 | 第34-36页 |
| ·菌株及表达载体 | 第34页 |
| ·实验试剂 | 第34-35页 |
| ·BL21-pET28a-GST原核表达载体的构建及转化 | 第35页 |
| ·BL21-pET28a-GST蛋白的诱导表达 | 第35-36页 |
| ·盐胁迫下表达GST蛋白的大肠杆菌生长曲线测定 | 第36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-38页 |
| ·大肠杆菌表达载体pET28a-GST重组质粒的构建及鉴定 | 第36-37页 |
| ·GST的原核表达分析 | 第37-38页 |
| ·盐胁迫下表达GST蛋白的大肠杆菌生长曲线测定 | 第38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 4 西伯利亚蓼CS在酿酒酿酒中的表达及其耐受盐胁迫的特征 | 第39-44页 |
| ·材料和方法 | 第39-41页 |
| ·菌株、表达载体及培养基 | 第39页 |
| ·试验试剂 | 第39页 |
| ·pYES2-CS酵母重组质粒的构建及转化 | 第39-40页 |
| ·西伯利亚蓼CS基因在酵母中的表达 | 第40页 |
| ·西伯利亚蓼CS基因转酵母的耐盐性分析 | 第40-41页 |
| ·转西伯利亚蓼CS基因酵母半胱氨酸和谷胱甘肽含量的测定 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-43页 |
| ·pYES2-CS重组质粒的构建及鉴定 | 第41页 |
| ·CS基因在酵母中的RT-PCR分析检测 | 第41-42页 |
| ·西伯利亚蓼CS基因在酵母中的耐盐性分析 | 第42页 |
| ·转CS基因酵母中谷胱甘肽和半胱氨酸含量的测定 | 第42-43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 5 西比利亚蓼GST和CS基因在酵母中的共表达和功能分析 | 第44-56页 |
| ·材料和方法 | 第44-47页 |
| ·菌株、表达载体以及培养基 | 第44-45页 |
| ·实验试剂 | 第45页 |
| ·pYES2-GST、pYES2-CS和pYES2-GST-CS酵母重组质粒的构建及转化 | 第45-46页 |
| ·西伯利亚蓼GST和CS基因在酵母中的表达 | 第46页 |
| ·转基因酵母的耐盐和重金属性分析 | 第46页 |
| ·转基因酵母抗氧化酶类相关基因定量RT-PCR分析及相应酶活性检测 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-55页 |
| ·双价酵母质粒的酶切和PCR验证 | 第47-48页 |
| ·转基因酵母耐盐性分析 | 第48-49页 |
| ·盐胁迫下抗氧化酶类基因荧光定量RT-PCR分析和抗氧化酶类活性检测 | 第49-50页 |
| ·转基因酵母耐重金属性分析 | 第50-53页 |
| ·重金属胁迫下抗氧化酶类基因荧光定量RT-PCR分析和抗氧化酶类活性检测 | 第53-55页 |
| ·本章小结 | 第55-56页 |
| 6 西伯利亚蓼GST和CS基因在烟草中的表达和功能分析 | 第56-71页 |
| ·材料和方法 | 第56-61页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·菌株与质粒 | 第56页 |
| ·酶及生化试剂 | 第56页 |
| ·单价表达载体pROK Ⅱ-GST和pROK Ⅱ-CS的构建 | 第56页 |
| ·双价表达载体pROK Ⅱ-GST-CS的构建 | 第56-57页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第57页 |
| ·农杆菌的转化 | 第57页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第57-58页 |
| ·转基因烟草植株的分子鉴定 | 第58-59页 |
| ·转基因烟草植株的耐盐性分析 | 第59-60页 |
| ·转基因烟草植株的叶盘耐重金属性分析 | 第60-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-70页 |
| ·植物表达载体pROK Ⅱ-GST、pROK Ⅱ-CS和双价表达载体pROK Ⅱ-GST-CS的构建及鉴定 | 第61-62页 |
| ·转基因烟草植株的分子鉴定 | 第62-64页 |
| ·转基因烟草植株的耐盐碱分析 | 第64-70页 |
| ·转单价、双价烟草与非转基因植株抗重金属性分析 | 第70页 |
| ·本章小结 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 附录1 | 第79-80页 |
| 附录2 | 第80-81页 |
| 附录3 | 第81-82页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
