| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 第一部分 综述鸡传染性法氏囊病的研究进展 | 第10-14页 |
| 第二部分 IBDV与SIgMλ轻链特异结合的VOPBA鉴定 | 第14-27页 |
| 1 材料与方法 | 第14-21页 |
| ·毒株、菌株及载体 | 第14-15页 |
| ·试剂配制 | 第15页 |
| ·DT40细胞培养 | 第15页 |
| ·SIgMλ轻链基因的克隆与分析 | 第15-18页 |
| ·原核表达载体pET28a-λ的构建及鉴定 | 第18-19页 |
| ·SIgMλ轻链在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达 | 第19-20页 |
| ·IBDV与重组SIgMλ轻链特异性结合的VOPBA分析 | 第20-21页 |
| 2 结果 | 第21-26页 |
| ·SIgMλ基因的克隆,序列分析 | 第21-24页 |
| ·重组表达载体pET28a-λ的构建 | 第24页 |
| ·融合表达蛋白分子量及等电点预测 | 第24页 |
| ·重组SIgMλ轻链蛋白的诱导表达 | 第24-26页 |
| ·重组SIgMλ轻链蛋白的western Blot鉴定 | 第26页 |
| ·重组SIgMλ轻链蛋白与不同毒力的IBDV特异结合 | 第26页 |
| 3 讨论 | 第26-27页 |
| 第三部分 靶向DT40细胞SIgMλ轻链基因的置换型打靶载体的构建 | 第27-37页 |
| 1 材料和方法 | 第27-31页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·DT40细胞培养 | 第28页 |
| ·β-actin启动子及SIgMλ轻链基因侧翼同源序列的克隆 | 第28-29页 |
| ·Neomycin基因部分CDS序列的克隆 | 第29页 |
| ·β-actin启动子在DT40细胞启动活性鉴定 | 第29页 |
| ·置换型打靶载体的构建 | 第29页 |
| ·打靶载体的线性化 | 第29-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-36页 |
| ·鸡β-actin启动子的克隆与鉴定 | 第31-32页 |
| ·SIgMλ轻链基因侧翼同源序列的克隆分析 | 第32页 |
| ·Neomycin基因部分CDS序列的克隆 | 第32页 |
| ·β-actin启动子驱动的绿色荧光蛋白基因在DT40细胞中的表达 | 第32-33页 |
| ·SIgMλ轻链基因打靶载体pCDNA-act-neo-HR的构建结果 | 第33-35页 |
| ·打靶载体的线性化 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 附录 | 第43-44页 |
