| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-20页 |
| 英文缩略词表 | 第20-22页 |
| 第一章 C57/BL6J小鼠主动脉血管内皮细胞的培养与鉴定 | 第22-28页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·主要实验试剂 | 第22页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第22-23页 |
| ·用于细胞培养的溶液的配制 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-25页 |
| ·结果 | 第25-26页 |
| ·血管内皮细胞的原代培养与鉴定 | 第25-26页 |
| ·小鼠传代培养血管内皮细胞生长曲线 | 第26页 |
| ·讨论 | 第26-28页 |
| 第二章 AP-2α真核表达载体的构建与鉴定 | 第28-40页 |
| ·材料和方法 | 第28-30页 |
| ·仪器设备 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌DH5α由本实验室保存 | 第29页 |
| ·载体和工具酶 | 第29页 |
| ·大肠杆菌培养基按《分子克隆》方法配制 | 第29-30页 |
| ·其他试剂 | 第30页 |
| ·溶液配制 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-35页 |
| ·PCR克隆AP-2α基因片段 | 第30-32页 |
| ·AP-2α编码片段与pCMV-Myc载体的连接反应与转化 | 第32-33页 |
| ·CaC12法制备大肠杆菌的感受态细胞以及转化 | 第33-34页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·AP-2α全长编码序列扩增 | 第35-36页 |
| ·pCMV-Myc-AP-2α表达质粒的构建 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 AP-2α在小鼠血管内皮细胞中上调VEGF的表达 | 第40-55页 |
| ·材料与方法 | 第40-42页 |
| ·仪器设备 | 第40页 |
| ·材料与试剂 | 第40-42页 |
| ·实验方法 | 第42-47页 |
| ·载体构建和SiRNA合成 | 第42-43页 |
| ·细胞培养与瞬时转染 | 第43-44页 |
| ·RNA抽提及相对定量RT-PCR | 第44-45页 |
| ·免疫沉淀和Western Blot检测 | 第45-46页 |
| ·DNA ladder检测 | 第46-47页 |
| ·流式分析 | 第47页 |
| ·统计学分析 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-51页 |
| ·RNA提取效果的检测 | 第47-48页 |
| ·AP-2a对小鼠血管内皮细胞VEGFA表达的影响 | 第48-49页 |
| ·小鼠血管内皮细胞中VEGF的变化对细胞凋亡的影响 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-55页 |
| 第四章 VEGF及SiRNA和AP-2α对动脉粥样硬化斑块的影响 | 第55-72页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·仪器设备 | 第55页 |
| ·实验动物与细胞 | 第55-56页 |
| ·主要实验试剂 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-60页 |
| ·研究所用的寡核苷酸 | 第56-57页 |
| ·细胞培养与瞬时转染 | 第57页 |
| ·动物饲养 | 第57页 |
| ·尾静脉注射 | 第57页 |
| ·动物取材 | 第57页 |
| ·免疫组化染色 | 第57-58页 |
| ·血脂测定 | 第58页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR检测基因表达 | 第58-60页 |
| ·统计学分析 | 第60页 |
| ·结果 | 第60-64页 |
| ·干预结果 | 第60-61页 |
| ·ApoE-/-小鼠一般情况 | 第61页 |
| ·免疫组化结果 | 第61-62页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR和Western blot | 第62-64页 |
| ·讨论 | 第64-72页 |
| ·siRNA机制与特点 | 第64-67页 |
| ·ApoE基因缺陷小鼠在动脉粥样硬化中的应用 | 第67-68页 |
| ·动脉粥样硬化斑块与血管新生 | 第68页 |
| ·血管内皮细胞生长因子与粥样斑块内新生血管形成 | 第68-71页 |
| ·AP-2α与动脉粥样硬化 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-87页 |
| 综述一 | 第87-95页 |
| 综述二 | 第95-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 攻读博士学位期间的主要研究成果 | 第108页 |
