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嗜酸氧化亚铁硫杆菌ATCC 23270碱激反应的全基因组表达谱研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 绪论第12-29页
   ·嗜酸氧化亚铁硫杆菌与微生物冶金第12页
   ·嗜酸氧化亚铁硫杆菌的分子生物学机理研究第12-17页
     ·嗜酸氧化亚铁硫杆菌氧化系统第13-15页
     ·嗜酸氧化亚铁硫杆菌碳代谢模型第15-16页
     ·嗜酸氧化亚铁硫杆菌对硫化矿的浸出机理第16-17页
   ·碱激蛋白研究进展及胞内外pH动态平衡学说第17-19页
   ·全基因组芯片技术及其在微生物研究中的应用第19-23页
     ·全基因组芯片概况第19页
     ·应用于全基因组芯片中的模式生物研究第19-20页
     ·全基因组芯片在微生物研究中的应用第20-23页
     ·全基因组芯片在微生物研究中的挑战与前景第23页
   ·实时荧光定量PCR第23-27页
     ·实时荧光定量PCR探针类型第24-26页
     ·管家基因(Housekeeping gene)的确定第26页
     ·实时荧光定量PCR的优缺点第26-27页
   ·本论文的研究目的、意义及内容第27-29页
     ·本论文的研究目的和意义第27-28页
     ·本论文的研究内容第28页
     ·本论文课题资助情况第28-29页
第二章 A.ferrooxidans ATCC 23270全基因组芯片的构建与评估第29-42页
   ·材料与方法第29-36页
     ·细菌的培养与菌体收集第29页
     ·核酸的提取与纯化第29-31页
     ·PCR扩增及产物纯化第31-32页
     ·寡核昔酸探针(50-mer)的设计第32页
     ·芯片的构建第32-33页
     ·核酸的荧光标记与芯片杂交第33-35页
     ·芯片扫描与图像处理第35-36页
   ·结果与分析第36-41页
     ·最适杂交温度评估第36-37页
     ·特异性评估第37-38页
     ·评估芯片对基因表达谱的检测性能第38-39页
     ·灵敏度检测及其定量潜能评估第39-41页
   ·讨论第41-42页
第三章 A.ferrooxidans ATCC 23270碱激反应的全基因组表达谱分析第42-57页
   ·材料与方法第43-45页
     ·细菌的培养第43页
     ·细菌的碱激处理第43页
     ·生长曲线以及pH变化的测定第43-44页
     ·总RNA的提取、纯化,荧光标记,芯片杂交与图像处理第44页
     ·芯片数据分析第44-45页
   ·结果与分析第45-56页
     ·A.ferrooxidans ATCC 23270应对碱激时的生长表征第45-46页
     ·总RNA质量分析第46-47页
     ·芯片杂交结果分析第47-49页
     ·差异表达基因的功能分类第49-56页
   ·讨论第56-57页
第四章 利用Real-time PCR方法验证芯片数据第57-64页
   ·材料与方法第57-61页
     ·反转录cDNA合成第57-58页
     ·PCR引物设计及标准曲线的制作第58-59页
     ·Real-time PCR检测第59-61页
   ·结果与分析第61-63页
     ·总RNA质量分析第61页
     ·引物质量检测结果第61-63页
     ·Real-time PCR结果与芯片结果比较分析第63页
   ·讨论第63-64页
第五章 碱激相关基因启动子及其模体预测第64-70页
   ·材料与方法第65-66页
     ·供试材料第65页
     ·碱激相关基因启动子区预测第65-66页
     ·Weblogo启动子模体预测第66页
   ·结果与分析第66-68页
     ·细胞膜相关基因的启动子区特征分析与启动子模体特征分析第66-67页
     ·转运与结合蛋白相关基因的启动子区特征分析与启动子模体特征分析第67-68页
   ·讨论第68-70页
第六章 结论第70-72页
参考文献第72-79页
致谢第79-80页
攻读学位期间发表的学术论文第80页

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