| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-29页 |
| ·链霉菌生物合成抗生素调控基因的研究 | 第11-20页 |
| ·链霉菌抗生素生物合成基因簇 | 第11-12页 |
| ·链霉菌抗生素生物合成调控基因对次级代谢的调控 | 第12-17页 |
| ·途径特异性调控基因 | 第12-14页 |
| ·全局性调控基因 | 第14页 |
| ·双组分信号传导系统调控基因 | 第14-15页 |
| ·其他调控基因 | 第15-17页 |
| ·链霉菌抗生素生物合成调控基因对细胞分化的调控 | 第17-19页 |
| ·链霉菌抗生素生物合成调控基因对抗生素产量的提高 | 第19-20页 |
| ·吸水链霉菌产物雷帕霉素的理化性质和药理机制 | 第20-23页 |
| ·雷帕霉素的理化性质 | 第20页 |
| ·雷帕霉素的免疫抑制机制 | 第20-22页 |
| ·雷帕霉素的构效关系 | 第22-23页 |
| ·吸水链霉菌产物雷帕霉素的生物合成 | 第23-25页 |
| ·雷帕霉素生物合成途径 | 第23页 |
| ·雷帕霉素生物合成基因簇 | 第23-25页 |
| ·课题研究内容和意义 | 第25-29页 |
| ·研究背景和意义 | 第25-27页 |
| ·研究内容和路线 | 第27-29页 |
| 第2章 E.coli工程菌的构建 | 第29-35页 |
| ·引言 | 第29-30页 |
| ·实验材料与试剂 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-34页 |
| ·E.coli感受态制备与DNA操作 | 第31-32页 |
| ·E.coli培养与抗性筛选 | 第32页 |
| ·质粒少量快速提取 | 第32-33页 |
| ·电泳检测 | 第33-34页 |
| ·实验结果 | 第34-35页 |
| 第3章 E.coli和Streptomyces hygroscopicus TYQ0915接合转移 | 第35-39页 |
| ·引言 | 第35-36页 |
| ·实验材料与试剂 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-38页 |
| ·E.coli发酵和Streptomyces hygroscopicus TYQ0915收集孢子 | 第36-37页 |
| ·E.coli和Streptomyces hygroscopicus TYQ0915接合转移 | 第37-38页 |
| ·实验结果 | 第38-39页 |
| ·接合转移参数优化 | 第38页 |
| ·E.coli和Streptomyces hygroscopicus TYQ0915接合转移 | 第38-39页 |
| 第4章 接合子的分析 | 第39-48页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·实验材料与试剂 | 第39-41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·双抗性筛选 | 第41页 |
| ·链霉菌总基因快速提取 | 第41页 |
| ·引物设计 | 第41页 |
| ·PCR扩增 | 第41-43页 |
| ·DNA纯化和回收 | 第43页 |
| ·测序和分析 | 第43页 |
| ·实验结果 | 第43-47页 |
| ·Streptomyces hygroscopicus AVH1124分析 | 第43-45页 |
| ·Streptomyces hygroscopicus ORM1226分析 | 第45-46页 |
| ·Streptomyces hygroscopicus AFH2028分析 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第5章 异源调控基因aveR、orfX和afsR对次级代谢产物产量的调控 | 第48-57页 |
| ·实验材料与试剂 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·吸水链霉菌培养、菌体定量、发酵和保藏 | 第49页 |
| ·甲醇粗提 | 第49-50页 |
| ·细胞干重测定 | 第50页 |
| ·HPLC检测 | 第50-51页 |
| ·实验结果 | 第51-57页 |
| ·发酵培养基的优化 | 第51-53页 |
| ·发酵时间的选择 | 第53-55页 |
| ·异源调控基因aveR、orfX和afsR调控雷帕霉素产量的分析 | 第55-57页 |
| 第6章 异源调控基因aveR、orfX和afsR的其他影响 | 第57-69页 |
| ·实验材料与试剂 | 第57-58页 |
| ·实验方法 | 第58-60页 |
| ·八种培养基下菌株生物形态特征观察 | 第58-59页 |
| ·搭片法显微镜和扫描电镜观察孢子和菌丝 | 第59页 |
| ·接合子稳定性、抗性分析 | 第59-60页 |
| ·实验结果 | 第60-69页 |
| ·异源调控基因aveR、orfX和afsR对生物形态特征和生长周期的影响 | 第60-64页 |
| ·异源调控基因对S.hygroscopicus菌丝、孢子和自溶的影响 | 第64-68页 |
| ·接合子稳定性、抗性分析 | 第68-69页 |
| 第7章 AveR、OrfX和AfsR调控功能的探讨 | 第69-80页 |
| ·实验方法 | 第69-71页 |
| ·结合生物信息学探讨AveR调控蛋白的调控功能 | 第71-73页 |
| ·LAL调控蛋白家族保守序列的预测 | 第73-74页 |
| ·结合生物信息学探讨OrfX调控蛋白的调控功能 | 第74-78页 |
| ·OrfX调控蛋白功能结构域的预测 | 第74-75页 |
| ·OrfX调控S hygroscopicus TYQ0915的调控功能探讨 | 第75页 |
| ·结合生物信息学探讨AfsR调控蛋白调控功能 | 第75-77页 |
| ·aveR、orfX和afsR调控基因拷贝数的极限探讨 | 第77-78页 |
| ·小结 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 附录 | 第87-95页 |
| 附录1 雷帕霉素高产接合子初筛方法的优化 | 第87-92页 |
| 附录2 LAL调控蛋白家族比对 | 第92-94页 |
| 附录3 美国ISCC-NBS标准色彩(白色至黑色) | 第94-95页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果 | 第95-96页 |
