| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| ·木聚糖及其结构 | 第10页 |
| ·木聚糖酶的分子生物学 | 第10-16页 |
| ·木聚糖酶的分子结构域 | 第11-13页 |
| ·木聚糖酶的理化性质 | 第13页 |
| ·木聚糖酶的家族 | 第13-14页 |
| ·木聚糖酶的催化机制 | 第14-15页 |
| ·木聚糖酶的诱导性 | 第15-16页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第16-18页 |
| ·在饲料行业中的应用 | 第16页 |
| ·在制浆造纸行业中的应用 | 第16-17页 |
| ·在酿酒行业中的应用 | 第17页 |
| ·在食品行业中的应用 | 第17-18页 |
| ·在其他方面的应用 | 第18页 |
| ·立题依据及研究目的 | 第18-20页 |
| 第二章 来源于真菌Bispora betulina的木聚糖酶的基因克隆 | 第20-36页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·菌株与质粒 | 第20页 |
| ·引物设计、合成与核酸序列测定 | 第20页 |
| ·试剂盒、酶与生化试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·培养基与溶液 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-28页 |
| ·B.betulina产木聚糖酶能力验证 | 第21-23页 |
| ·提取B.betulina的基因组DNA | 第23页 |
| ·设计简并引物 | 第23页 |
| ·木聚糖酶基因片段的克隆 | 第23-24页 |
| ·通过TAIL-PCR获得完整基因 | 第24-26页 |
| ·分析获得的完整序列 | 第26页 |
| ·提取B.betulina的总RNA | 第26-27页 |
| ·木聚糖酶基因cDNA的克隆 | 第27-28页 |
| ·比较木聚糖酶cDNA序列的相似性 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-34页 |
| ·B.betulina产木聚糖酶能力验证 | 第28页 |
| ·简并引物的设计 | 第28-29页 |
| ·木聚糖酶基因片段的克隆 | 第29页 |
| ·木聚糖酶完整基因的克隆与分析 | 第29-31页 |
| ·木聚糖酶基因cDNA的克隆 | 第31页 |
| ·木聚糖酶基因序列的分析 | 第31-34页 |
| ·讨论与小结 | 第34-36页 |
| 第三章 木聚糖酶基因Xyn11BB在毕赤酵母中的表达纯化及酶学性质研究 | 第36-54页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·菌株与质粒 | 第36页 |
| ·引物设计、合成与核酸序列测定 | 第36页 |
| ·试剂盒、酶与生化试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·培养基与溶液 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-45页 |
| ·构建重组表达载体pPIC9-Xyn11BB | 第37-38页 |
| ·重组载体电击转化毕赤酵母 | 第38-40页 |
| ·测定木聚糖酶活力 | 第40页 |
| ·木聚糖酶基因Xyn11BB在毕赤酵母中的表达 | 第40-41页 |
| ·重组木聚糖酶rXyn11BB的纯化 | 第41-43页 |
| ·重组木聚糖酶rXyn11BB的质谱鉴定 | 第43页 |
| ·重组木聚糖酶rXyn11BB的酶学性质研究 | 第43-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-52页 |
| ·构建毕赤酵母重组表达载体 | 第45-46页 |
| ·重组载体电击转化毕赤酵母 | 第46页 |
| ·绘制木糖的标准曲线 | 第46-47页 |
| ·木聚糖酶基因Xyn11BB在毕赤酵母中的表达 | 第47页 |
| ·重组木聚糖酶rXyn11BB的纯化 | 第47-48页 |
| ·重组木聚糖酶rXyn11BB的质谱鉴定 | 第48页 |
| ·重组木聚糖酶rXyn11BB的酶学性质研究 | 第48-52页 |
| ·讨论与小结 | 第52-54页 |
| 第四章 来源于嗜碱细菌Nesterenkonia xinjiangensis木聚糖酶的基因克隆 | 第54-62页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·菌株与质粒 | 第54页 |
| ·引物设计、合成与核酸序列测定 | 第54页 |
| ·试剂盒、酶与生化试剂 | 第54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| ·培养基与溶液 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-56页 |
| ·N.xinjiangensis产木聚糖酶能力验证 | 第55页 |
| ·提取N.xinjiangensis的基因组DNA | 第55页 |
| ·设计简并引物 | 第55页 |
| ·木聚糖酶基因片段的克隆 | 第55-56页 |
| ·通过TAIL-PCR获得完整基因 | 第56页 |
| ·分析获得的完整序列 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-61页 |
| ·N.xinjiangensis产木聚糖酶能力验证 | 第56-57页 |
| ·简并引物的设计 | 第57页 |
| ·木聚糖酶基因片段的克隆 | 第57页 |
| ·木聚糖酶完整基因的克隆 | 第57-58页 |
| ·木聚糖酶基因序列的分析 | 第58-61页 |
| ·讨论与小结 | 第61-62页 |
| 第五章 木聚糖酶基因xyn11NX在大肠杆菌中的表达纯化及酶学性质研究 | 第62-75页 |
| ·实验材料 | 第62页 |
| ·菌株与质粒 | 第62页 |
| ·引物设计、合成与核酸序列测定 | 第62页 |
| ·试剂盒、酶与生化试剂 | 第62页 |
| ·主要仪器 | 第62页 |
| ·培养基与溶液 | 第62页 |
| ·实验方法 | 第62-67页 |
| ·构建重组表达载体pET-22b(+)-xyn11NX | 第63-64页 |
| ·重组载体电击转化大肠杆菌 | 第64-65页 |
| ·木聚糖酶基因xyn11NX在大肠杆菌中的表达 | 第65页 |
| ·重组木聚糖酶rXyn11NX的纯化 | 第65-66页 |
| ·重组木聚糖酶rXyn11NX的质谱鉴定 | 第66页 |
| ·重组木聚糖酶rXyn11NX的酶学性质研究 | 第66-67页 |
| ·结果与分析 | 第67-73页 |
| ·去除xyn11NX的信号肽编码序列 | 第67页 |
| ·构建重组表达载体pET-22b(+)-xyn11NX | 第67-68页 |
| ·木聚糖酶基因xyn11NX在大肠杆菌中的表达 | 第68-69页 |
| ·重组木聚糖酶rXyn11NX的纯化 | 第69页 |
| ·重组木聚糖酶rXyn11NX的质谱鉴定 | 第69页 |
| ·重组木聚糖酶rXyn11NX的酶学性质研究 | 第69-73页 |
| ·讨论与小结 | 第73-75页 |
| 第六章 全文结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
