| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-18页 |
| ·食物过敏及其症状 | 第11页 |
| ·食物过敏原的种类和性质 | 第11-12页 |
| ·水产品中存在的过敏原 | 第12页 |
| ·小清蛋白(Parvalbumin) | 第12页 |
| ·原肌球蛋白(Tropomyosin) | 第12页 |
| ·精氨酸激酶 | 第12-14页 |
| ·过敏原的检测 | 第14-15页 |
| ·胶体金免疫层析技术 | 第15-17页 |
| ·GICA 的基本原理及技术特点 | 第16页 |
| ·GICA 的应用方向 | 第16-17页 |
| ·本文的研究目的和内容 | 第17-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-32页 |
| ·实验材料 | 第18-21页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·试剂 | 第18页 |
| ·实验所用溶液及其配制 | 第18-20页 |
| ·仪器 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-32页 |
| ·肌浆蛋白的制备 | 第21页 |
| ·精氨酸激酶的纯化 | 第21页 |
| ·精氨酸激酶基因克隆及序列分析 | 第21-25页 |
| ·精氨酸激酶的原核表达及纯化 | 第25-28页 |
| ·SDS-PAGE、2D-PAGE 及Western blot 分析 | 第28-31页 |
| ·基质辅助激光解析/飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析 | 第31页 |
| ·点杂交(Dot-blot)检测天然及重组AK 蛋白 | 第31页 |
| ·GICA 检测天然及重组AK 蛋白 | 第31-32页 |
| 第3章 结果与分析 | 第32-50页 |
| ·精氨酸激酶的纯化及检测 | 第32-37页 |
| ·肌浆蛋白的提取及分析 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE, 2D-PAGE 及Western-blot 分析 | 第32-34页 |
| ·纯化的天然AK 的MALDI-TOF MS 鉴定 | 第34-37页 |
| ·精氨酸激酶基因克隆及序列分析 | 第37-41页 |
| ·目的基因的克隆与鉴定 | 第37-39页 |
| ·重组质粒的PCR 验证 | 第39-40页 |
| ·AK 序列的测定与分析 | 第40-41页 |
| ·精氨酸激酶的原核表达与纯化 | 第41-48页 |
| ·表达质粒的构建与鉴定 | 第41-43页 |
| ·GST-AK 的诱导表达 | 第43-46页 |
| ·重组AK 的MALDI-TOF MS 鉴定 | 第46-48页 |
| ·天然及重组AK 的点杂交鉴定 | 第48页 |
| ·天然及重组AK 的免疫胶体金检测 | 第48-50页 |
| 第4章 讨论 | 第50-54页 |
| ·精氨酸激酶的分离纯化 | 第50页 |
| ·精氨酸激酶的克隆与表达 | 第50-51页 |
| ·精氨酸激酶的过敏性分析 | 第51-52页 |
| ·结论 | 第52页 |
| ·研究展望 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第59页 |
