| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略语中英文对照 | 第13-14页 |
| 第一章 人乳铁蛋白的研究进展 | 第14-24页 |
| 1 分布与含量 | 第14页 |
| 2 结构与特性 | 第14-15页 |
| 3 乳铁蛋白的代谢 | 第15页 |
| 4 乳铁蛋白基因的克隆及结构分析 | 第15-16页 |
| 5 生物学功能分析 | 第16-21页 |
| ·参与铁代谢,促进铁吸收 | 第16-17页 |
| ·抑菌作用 | 第17页 |
| ·抗病毒生物学活性 | 第17-18页 |
| ·免疫调节中的作用 | 第18页 |
| ·促进细胞繁殖 | 第18页 |
| ·调控基因表达 | 第18-19页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第19页 |
| ·抗氧化活性 | 第19页 |
| ·重组人乳铁蛋白在国外的研究现状 | 第19-20页 |
| ·乳铁蛋白的应用前景展望 | 第20-21页 |
| 参考文献 | 第21-24页 |
| 第二章 乳腺表达载体的研究进展 | 第24-37页 |
| 1 乳腺表达载体构建的基础理论 | 第24-28页 |
| ·启动子 | 第24-25页 |
| ·5’和3’非翻译区 | 第25页 |
| ·内含子对转基因动物表达效率的影响 | 第25-26页 |
| ·增强子在分子生物学上的作用 | 第26-27页 |
| ·位置效应对转基因动物表达效率的影响 | 第27-28页 |
| ·翻译后修饰及功能基因选择 | 第28页 |
| 2 乳腺表达载体的启动子及其调控序列 | 第28-35页 |
| ·乳清酸蛋白基因 | 第28-29页 |
| ·β-乳球蛋白基因(β-lactoglobulin BLG) | 第29页 |
| ·酪蛋白 | 第29-31页 |
| ·人工染色体 | 第31页 |
| ·体细胞打靶技术 | 第31-34页 |
| ·乳腺生物反应器的应用前景及所存在的问题 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-37页 |
| 第三章 人乳铁蛋白cDNA基因乳腺表达载体的构建及其生物学功能分析 | 第37-58页 |
| 1 材料与方法 | 第38-49页 |
| ·试验材料 | 第38-42页 |
| ·试验方法 | 第42-49页 |
| 2 结果 | 第49-53页 |
| ·乳腺表达载体pGBC-hLF-Neo的鉴定 | 第49-50页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞GMC和C127细胞的培养 | 第50-51页 |
| ·G418对山羊乳腺上皮细胞和最小致死量的测定结果 | 第51页 |
| ·两种乳腺上皮细胞的转染及目的基因在基因组中的整合鉴定 | 第51页 |
| ·RT-PCR检测hLF基因在激素诱导培养的转基因细胞中的表达 | 第51-52页 |
| ·western-blot检测目的蛋白的分泌情况 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 第四章 稳定整合人乳铁蛋白cDNA山羊胎儿成纤维细胞的制备 | 第58-74页 |
| 1 材料与方法 | 第59-63页 |
| ·试验材料 | 第59页 |
| ·试验方法 | 第59-63页 |
| 2 结果 | 第63-69页 |
| ·乳腺表达载体的构建及其鉴定 | 第63-67页 |
| ·外源基因转染山羊胎儿成纤维细胞 | 第67-68页 |
| ·条件培养液对转基因细胞克隆生长结果的影响 | 第68-69页 |
| ·多重PCR鉴定转基因阳性克隆细胞 | 第69页 |
| 3 讨论 | 第69-72页 |
| 参考文献 | 第72-74页 |
| 第五章 人乳铁蛋白基因打靶载体的构建与山羊乳腺上皮细胞表达检测 | 第74-90页 |
| 1 材料与方法 | 第75-80页 |
| ·试验材料 | 第75页 |
| ·试验方法 | 第75-80页 |
| 2 结果 | 第80-85页 |
| ·hLF基因β-casein位点打靶载体的构建 | 第80-83页 |
| ·转基因阳性细胞PCR检测结果 | 第83-84页 |
| ·RT-PCR检测hLF基因在激素诱导培养的转基因细胞中的表达 | 第84-85页 |
| 3 讨论 | 第85-88页 |
| ·基因打靶方式的选择与应用 | 第85-86页 |
| ·基因打靶载体设计的原则与技巧 | 第86页 |
| ·正负筛选标记基因Neo和tk的合理使用 | 第86-87页 |
| ·打靶载体在山羊乳腺上皮细胞中的表达情况 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-90页 |
| 全文结论 | 第90-92页 |
| 发表文章 | 第92-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
