| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第13-29页 |
| 1.1 伊马替尼的发现及临床治疗进展 | 第13-24页 |
| 1.1.1 cKIT 阳性的胃肠间质瘤(GISTs) | 第13-17页 |
| 1.1.2 BCR-ABL融合的慢性髓细胞白血病(CML) | 第17-20页 |
| 1.1.3 PDGFR激酶驱动的慢性嗜酸性粒细胞白血病(CEL) | 第20-24页 |
| 1.2 伊马替尼耐药及脱靶毒性的应对策略 | 第24-29页 |
| 1.2.1 老药重定位 | 第24-26页 |
| 1.2.2 药物设计 | 第26-29页 |
| 第2章 老药重定位:克服GISTs耐药性突变的高活性cKIT激酶抑制剂的发现和作用机制研究 | 第29-73页 |
| 2.1 引言 | 第29页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第29-35页 |
| 2.2.1 细胞系与细胞培养 | 第29-30页 |
| 2.2.2 实验材料及设备 | 第30-35页 |
| 2.3 实验方法和步骤 | 第35-49页 |
| 2.3.1 构建cKIT野生型和突变型BaF3稳转细胞系 | 第35页 |
| 2.3.2 卡博替尼的分子对接模式 | 第35页 |
| 2.3.3 cKIT wt和cKIT T670I的蛋白纯化 | 第35-36页 |
| 2.3.4 卡博替尼的抗细胞增殖活性检测 | 第36-37页 |
| 2.3.5 卡博替尼的体外酶活生化检测 | 第37-38页 |
| 2.3.6 卡博替尼对cKIT介导的信号通路的影响 | 第38-42页 |
| 2.3.7 卡博替尼对细胞周期的影响 | 第42-43页 |
| 2.3.8 卡博替尼对细胞凋亡的影响 | 第43-44页 |
| 2.3.9 GIST-T1、GIST-5R异种移植瘤模型及BaF3 cKIT-T670I、BaF3cKIT-N822K同种异体移植瘤模型的构建 | 第44页 |
| 2.3.10 人GISTs肿瘤样本的处理过程 | 第44-45页 |
| 2.3.11 免疫组织化学法 | 第45-48页 |
| 2.3.12 免疫荧光染色法 | 第48-49页 |
| 2.4 实验结果 | 第49-71页 |
| 2.4.1 卡博替尼新适应症的发现 | 第49页 |
| 2.4.2 卡博替尼对cKIT激酶原发性突变和继发性突变的抑制活性 | 第49-54页 |
| 2.4.3 cKIT T670I突变体对卡博替尼敏感的结构基础 | 第54-55页 |
| 2.4.4 卡博替尼在cKIT激酶依赖性GISTs细胞系中的抗增殖活性 | 第55-64页 |
| 2.4.5 卡博替尼在体内的抗肿瘤作用 | 第64-69页 |
| 2.4.6 卡博替尼对GISTs病人原代细胞的影响 | 第69-71页 |
| 2.5 结论与讨论 | 第71-73页 |
| 第3章 针对CML耐药性突变的高活性BCR-ABL激酶抑制剂CHMFL-48的发现研究 | 第73-95页 |
| 3.1 引言 | 第73页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第73-76页 |
| 3.2.1 细胞系与细胞培养 | 第73-74页 |
| 3.2.2 实验材料及设备 | 第74-76页 |
| 3.3 实验方法和步骤 | 第76-80页 |
| 3.3.1 构建ABL野生型和突变型BaF3稳转细胞系 | 第76页 |
| 3.3.2 CHMFLL-48的分子对接模式 | 第76页 |
| 3.3.3 ABL wt和ABL T315I的蛋白纯化 | 第76-77页 |
| 3.3.4 CHMFL-48的抗细胞增殖活性检测 | 第77页 |
| 3.3.5 CHMFL-48的体外酶活生化检测 | 第77页 |
| 3.3.6 CHMFL-48对BCR-ABL介导的信号通路的影响 | 第77页 |
| 3.3.7 CHMFL-48对细胞周期的影响 | 第77-78页 |
| 3.3.8 CHMFL-48对细胞凋亡的影响 | 第78页 |
| 3.3.9 CHMFL-48的药代动力学研究 | 第78-79页 |
| 3.3.10 K562异种移植瘤模型及BaF3 p210-T315I同种异体移植瘤模型的构建 | 第79页 |
| 3.3.11 CML病人原代细胞培养 | 第79-80页 |
| 3.4 实验结果 | 第80-93页 |
| 3.4.1 CHMFL-48对BCR-ABL激酶/突变的抑制活性 | 第80-83页 |
| 3.4.2 CHMFL-48的选择性检测 | 第83-84页 |
| 3.4.3 ABLT315I和F317L突变体对CHMFL-48敏感的结构基础 | 第84-86页 |
| 3.4.4 CHMFL-48在BCR-ABL激酶依赖性CML细胞系中的抗增殖活性 | 第86-89页 |
| 3.4.5 CHMFL-48的药物代谢动力学研究 | 第89-90页 |
| 3.4.6 CHMFL-48的体内抗肿瘤作用 | 第90-92页 |
| 3.4.7 CHMFL-48对CML病人原代细胞的影响 | 第92-93页 |
| 3.5 结论与讨论 | 第93-95页 |
| 第4章 针对CEL的高活性高选择性PDGFR激酶抑制剂CHMFL-73的发现研究 | 第95-105页 |
| 4.1 引言 | 第95页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第95-97页 |
| 4.2.1 细胞系与细胞培养 | 第95页 |
| 4.2.2 实验材料及设备 | 第95-97页 |
| 4.3 实验方法和步骤 | 第97-98页 |
| 4.3.1 CHMFL-73的抗细胞增殖活性检测 | 第97页 |
| 4.3.2 CHMFL-73对PDGFR介导的信号通路的影响 | 第97页 |
| 4.3.3 CHMFL-73对细胞周期的影响 | 第97页 |
| 4.3.4 CHMFL-73对细胞凋亡的影响 | 第97-98页 |
| 4.3.5 CHMFL-73的药代动力学研究 | 第98页 |
| 4.3.6 EOL-1异种移植瘤模型的构建 | 第98页 |
| 4.4 实验结果 | 第98-102页 |
| 4.4.1 CHMFL-73的选择性检测 | 第98-99页 |
| 4.4.2 CHMFL-73在PDGFR激酶依赖性EOL-1细胞中的抗增殖活性 | 第99-101页 |
| 4.4.3 CHMFL-73的药物代谢动力学研究 | 第101-102页 |
| 4.4.4 CHMFL-73的体内抗肿瘤作用 | 第102页 |
| 4.5 结论与讨论 | 第102-105页 |
| 总结与展望 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-123页 |
| 附录: 英文缩略词表 | 第123-125页 |
| 致谢 | 第125-127页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第127页 |
