| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-31页 |
| 1.1 ASF概述 | 第15-17页 |
| 1.1.1 非洲猪瘟的流行史 | 第16-17页 |
| 1.1.2 ASF的传播特征 | 第17页 |
| 1.2 ASFV概述 | 第17-19页 |
| 1.3 ASFV免疫逃逸蛋白研究进展 | 第19-23页 |
| 1.3.1 病毒蛋白调控宿主细胞蛋白表达 | 第19-20页 |
| 1.3.2 病毒蛋白抑制Ⅰ型干扰素信号通路及NF-κB信号通路 | 第20-21页 |
| 1.3.3 病毒蛋白调控细胞凋亡 | 第21-23页 |
| 1.3.4 病毒其它免疫抑制蛋白 | 第23页 |
| 1.4 cGAS-STING DNA识别信号通路 | 第23-29页 |
| 1.4.1 抗病毒天然免疫 | 第23-24页 |
| 1.4.2 DNA模式受体及其重要接头蛋白 | 第24-25页 |
| 1.4.3 cGAS-STING信号通路 | 第25-26页 |
| 1.4.4 病毒逃逸cGAS-STING介导的抗病毒天然免疫 | 第26-29页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第29-31页 |
| 第二章 ASFV Georgia 2007株多基因家族免疫抑制基因筛选 | 第31-46页 |
| 2.1 材料 | 第31-33页 |
| 2.1.1 菌株和细胞培养相关材料 | 第31-32页 |
| 2.1.2 质粒以及质粒构建相关材料 | 第32页 |
| 2.1.3 试剂盒 | 第32页 |
| 2.1.4 其他主要材料 | 第32页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第32-33页 |
| 2.1.6 主要试剂的配置 | 第33页 |
| 2.2 主要方法 | 第33-38页 |
| 2.2.1 质粒的构建 | 第33-35页 |
| 2.2.2 质粒提取 | 第35-36页 |
| 2.2.3 荧光定量PCR | 第36-37页 |
| 2.2.4 细胞培养和传代 | 第37页 |
| 2.2.5 瞬时转染 | 第37页 |
| 2.2.6 双荧光素酶报告基因检测 | 第37-38页 |
| 2.2.7 统计分析 | 第38页 |
| 2.3 结果与分析 | 第38-44页 |
| 2.3.1 ASFV Georgia 2007株MGF360免疫抑制基因的筛选 | 第38-39页 |
| 2.3.2 ASFV Georgia 2007株MGF505免疫抑制基因的筛选 | 第39-40页 |
| 2.3.3 ASFV Georgia 2007株MGF110免疫抑制基因的筛选 | 第40-42页 |
| 2.3.4 ASFV Georgia 2007株MGF100和MGF300免疫抑制基因的筛选 | 第42-43页 |
| 2.3.5 ASFV-G-ΔMGF缺失MGF360和MGF505免疫抑制基因的筛选 | 第43-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 ASFV-SY18 MGF360-12L蛋白对cGAS-STING信号通路抑制作用研究 | 第46-65页 |
| 3.1 材料 | 第46-48页 |
| 3.1.1 菌株、细胞和病毒及培养相关材料 | 第46页 |
| 3.1.2 质粒以及质粒构建相关材料 | 第46-47页 |
| 3.1.3 抗体和试剂盒 | 第47页 |
| 3.1.4 SDS-PAGE以及Western-blot相关试剂 | 第47页 |
| 3.1.5 其他主要材料 | 第47页 |
| 3.1.6 主要仪器 | 第47页 |
| 3.1.7 主要试剂的配置 | 第47-48页 |
| 3.2 主要方法 | 第48-53页 |
| 3.2.1 质粒的构建 | 第48-50页 |
| 3.2.2 质粒提取 | 第50页 |
| 3.2.3 荧光定量PCR | 第50-51页 |
| 3.2.4 细胞培养和传代 | 第51页 |
| 3.2.5 瞬时转染 | 第51-52页 |
| 3.2.6 Western blot分析 | 第52-53页 |
| 3.2.7 双荧光素酶报告基因检测 | 第53页 |
| 3.2.8 VSV-GFP病毒的扩增与滴定 | 第53页 |
| 3.2.9 统计分析 | 第53页 |
| 3.3 结果与分析 | 第53-63页 |
| 3.3.1 ASFV MGF360-12L抑制cGAS-STING介导IFN-β和NF-κB的转录激活 | 第53-55页 |
| 3.3.2 MGF360-12L抑制TBK1和IRF3-5D诱导的IFN-β表达 | 第55-57页 |
| 3.3.3 MGF360-12L抑制TBK1 mRNA水平 | 第57页 |
| 3.3.4 MGF360-12L抑制TBK1和IKKβ介导的NF-κB信号通路 | 第57-59页 |
| 3.3.5 MGF360-12L抑制IFN-β介导的免疫应答和抗病毒作用 | 第59-60页 |
| 3.3.6 MGF360-12L抑制IFN-β介导的ISGs表达 | 第60-61页 |
| 3.3.7 MGF360-12L免疫抑制功能区域的鉴定 | 第61-63页 |
| 3.4 讨论 | 第63-65页 |
| 第四章 ASFV-SY18 DP96R蛋白对CGAS-STING信号通路抑制作用研究 | 第65-78页 |
| 4.1 材料 | 第65-66页 |
| 4.1.1 菌株、细胞和病毒 | 第65页 |
| 4.1.2 质粒以及质粒构建相关材料 | 第65页 |
| 4.1.3 主要抗体、试剂及试剂盒 | 第65-66页 |
| 4.1.4 SDS-PAGE以及Western-blot相关试剂 | 第66页 |
| 4.1.5 其他主要材料 | 第66页 |
| 4.1.6 主要仪器 | 第66页 |
| 4.1.7 主要试剂的配置 | 第66页 |
| 4.2 方法 | 第66-68页 |
| 4.2.1 质粒构建与提取 | 第66-67页 |
| 4.2.2 荧光定量PCR | 第67页 |
| 4.2.3 细胞培养、传代和瞬时转染 | 第67页 |
| 4.2.4 病毒抑制试验 | 第67-68页 |
| 4.2.5 Western blot分析 | 第68页 |
| 4.2.6 双荧光素酶报告基因检测 | 第68页 |
| 4.2.7 统计学分析 | 第68页 |
| 4.3 结果与分析 | 第68-76页 |
| 4.3.1 DP96R蛋白抑制cGAS/STING介导的IFN-β和NF-κB活化 | 第68-71页 |
| 4.3.2 DP96R抑制TBK1介导的IFN产生和NF-κB活化 | 第71-72页 |
| 4.3.3 DP96R抑制TBK1和IKKβ介导NF-κB激活 | 第72-73页 |
| 4.3.4 DP96R抑制TBK1磷酸化及TBK1介导的抗病毒效应 | 第73-75页 |
| 4.3.5 DP96R蛋白免疫抑制功能结构域的鉴定 | 第75-76页 |
| 4.4 讨论 | 第76-78页 |
| 第五章 全文结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-91页 |
| 附录 | 第91-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 作者简历 | 第101页 |
