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肿瘤转移相关基因S100A6、Rab5a在宫颈癌中的表达及其临床意义

英文缩略词表第1-10页
中文摘要第10-13页
英文摘要第13-17页
第一章 宫颈癌淋巴结转移的临床研究进展第17-81页
 1. 概述第17-24页
 2. 淋巴结转移是宫颈癌的一个影响因素第24-25页
 3. 淋巴系统的生理与解剖第25-26页
 4. 宫颈癌淋巴结转移的解剖学途径第26-28页
 5. 宫颈癌转移细胞特性的基础研究第28-30页
   ·肿瘤细胞的运动性第28-29页
   ·肿瘤细胞的粘连性第29页
   ·肿瘤细胞的增殖性第29-30页
 6. 宫颈癌的淋巴结转移过程和分子机理第30-39页
   ·宫颈癌淋巴结转移过程第30页
   ·癌细胞进入淋巴结后的情况和淋巴结的反应第30-31页
   ·宫颈癌细胞淋巴结转移的生物学特性第31-32页
   ·恶性肿瘤浸润转移的主要步骤第32-39页
     ·原发恶性肿瘤的浸润第33-34页
       ·细胞转化的和肿瘤细胞的增殖第33页
       ·肿瘤细胞的分离第33页
       ·粘附并破坏细胞外基质和基底膜第33-34页
       ·肿瘤细胞运动第34页
     ·恶性肿瘤细胞的迁移第34-36页
       ·恶性肿瘤细胞粘附到脉管基底膜第34-36页
       ·穿过脉管壁进入循环系统第36页
     ·恶性肿瘤细胞的转移第36-39页
       ·肿瘤细胞逃脱免疫监视在循环系统中生长第36-37页
       ·肿瘤细胞锚定粘附并破坏脉管壁第37-38页
       ·转移灶的形成第38页
       ·转移的休眠第38页
       ·肿瘤细胞转移的器官选择性第38-39页
   ·宫颈癌淋巴结转移的分子机理第39页
 7. 肿瘤相关基因第39-48页
   ·肿瘤转移基因(tumer metastatic genes)第40-43页
     ·MTA1基因第40页
     ·ras基因第40-41页
     ·c met癌基因第41页
     ·ezrin蛋白第41-42页
     ·缺氧诱导因子1(HIF 1)第42-43页
     ·S100A6基因(详见后述)第43页
     ·Rab5a基因(详见后述)第43页
   ·肿瘤转移抑制基因第43-48页
     ·nm23基因第43-44页
     ·MHC基因第44-45页
     ·KAI1基因第45-48页
     ·CDH1基因第48页
 8. 黏附因子与恶性肿瘤的浸润转移第48-56页
   ·层粘连蛋白第49-50页
   ·钙粘蛋白家族(cadherins)第50-51页
   ·整合素(integrins)第51-53页
   ·免疫球蛋白超家族(immunoglobulin superfamily)第53页
   ·选择素(selectins)家族第53-55页
   ·CD44第55-56页
 9. 血管的生成与肿瘤的浸润转移第56-59页
   ·血管内皮细胞生长因子(VEGF)第57-58页
   ·碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)第58-59页
 10. 蛋白溶解酶与恶性肿瘤浸润转移第59-64页
   ·基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)第59-61页
   ·纤维蛋白溶解酶及其调节因子第61-62页
   ·组织蛋白酶(cathepsins)第62-64页
     ·组织蛋白酶D(Cathepsin D,CD)第63页
     ·组织蛋白酶B(Cathepsin B,CB)第63页
     ·组织蛋白酶L(Cathepsin L,CL)第63-64页
 11. 宫颈癌淋巴结转移的诊断第64-73页
   ·超声对转移性淋巴结的诊断价值第65-66页
   ·CT对转移性淋巴结的诊断价值第66-67页
   ·MRI对转移性淋巴结的诊断价值第67-68页
   ·PET对转移性淋巴结的诊断价值第68-69页
   ·淋巴造影对转移性淋巴结的诊断价值第69-70页
   ·放射性免疫显像(radioimmunoimaging,R Ⅱ)第70-71页
   ·免疫组化第71-72页
   ·选择性淋巴结活检及系统性淋巴结清除手术第72-73页
 12. 宫颈癌的治疗第73-81页
   ·手术治疗第74-76页
     ·手术适应证第74页
     ·手术禁忌证第74页
     ·手术类型第74-76页
   ·放疗第76页
   ·化疗第76-77页
   ·淋巴化疗第77-78页
   ·免疫治疗第78-79页
   ·生物治疗第79页
   ·基因治疗第79-81页
第二章 肿瘤转移相关基因S100A6和RAB5A研究进展第81-89页
 1. 概述第81-82页
 2. Rab5a基因的研究进展第82-86页
 3. S100A6基因研究进展第86-88页
 4. 主要研究内容及拟解决的问题第88-89页
第三章 荧光定量PCR研究宫颈癌S100A6和Rab5a mRNA表达情况第89-118页
 1. 目的第89页
 2. 材料和方法第89-94页
   ·PCR原理和背景第89-91页
   ·宫颈组织来源第91-92页
   ·主要试剂和配制第92-93页
     ·主要试剂第92页
     ·主要试剂的配制第92-93页
   ·实验主要仪器设备第93-94页
   ·用具处理第94页
 3. 实验步骤和方法第94-106页
   ·不同病变分组的宫颈组织总RNA的提取第94-95页
     ·原理第94页
     ·实验步骤第94-95页
     ·总RNA的定量及纯度测定第95页
   ·cDNA合成第95-96页
   ·引物的设计第96-98页
   ·质粒的构建第98-104页
     ·Real-time PCR第98-100页
     ·DNA测序第100页
     ·PCR产物的纯化与回收第100-101页
     ·测序所得序列在Internet上使用NCBI服务器进行分析比对第101页
     ·感受态大肠杆菌DH-5α的制备第101页
     ·目的基因与载体的连接第101-102页
     ·产物转化至感受态DH-5a第102-103页
     ·质粒DNA的快速提取第103-104页
   ·荧光定量PCR第104-106页
   ·统计学方法第106页
 4. 结果第106-114页
   ·总RNA的定量及纯度测定第106-107页
   ·扩增S100A6、Rab5a基因,琼脂糖凝胶电泳检测扩增情况第107-108页
   ·荧光定量PCR检测宫颈标本中S100A6和Rab5a mRNA的表达量第108-110页
   ·PCR产物比对和所构建质粒的测序结果第110-112页
   ·荧光定量PCR检测宫颈组织中S100A6 mRNA的表达阳性率第112页
   ·荧光定量PCR检测宫颈组织中的Rab5a mRNA的表达阳性率第112页
   ·荧光定量PCR检测宫颈组织中的S100A6 mRNA的表达量第112-113页
   ·荧光定量PCR技术检测宫颈组织中的Rab5a mRNA的表达量第113-114页
 5. 讨论第114-117页
 6. 小结第117-118页
第四章 免疫组化技术对宫颈癌S100A6和Rab5a蛋白检验并比较第118-132页
 1. 目的第118-119页
 2. 材料和方法第119-123页
   ·原理第119-121页
   ·材料第121页
   ·主要试剂和设备第121-122页
   ·Super PicTure法(一步法)免疫组化染色步骤第122-123页
 3. 结果判定第123-124页
 4. 结果第124-129页
   ·组织免疫组化结果第124-127页
   ·应用免疫组化检测标本组织中S100A6蛋白的表达情况第127-128页
   ·应用免疫组化检测标本组织中Rab5a蛋白的表达情况第128-129页
 5. 讨论第129-131页
 6. 小结第131-132页
参考文献第132-145页
致谢第145页

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