| 英文缩略表 | 第10-12页 |
| 摘要 | 第12-13页 |
| Abstract | 第13页 |
| 第一章 前言 | 第14-28页 |
| 1.1 肥胖症 | 第14页 |
| 1.2 脂肪组织的种类 | 第14-15页 |
| 1.3 细胞分化 | 第15-18页 |
| 1.3.1. 转录因子的调控作用 | 第15-16页 |
| 1.3.2. 表观遗传修饰 | 第16-17页 |
| 1.3.3. 表观遗传修饰与细胞分化 | 第17页 |
| 1.3.4. 组蛋白甲基化 | 第17-18页 |
| 1.3.5. 组蛋白甲基化对脂肪细胞分化的调控 | 第18页 |
| 1.4 DOT1L与H3K79甲基化以及细胞分化关系 | 第18-21页 |
| 1.4.1. DOT1L与H3K79的甲基化 | 第18-19页 |
| 1.4.2. DOT1L对细胞分化的影响 | 第19-20页 |
| 1.4.3. DOT1L调控基因表达 | 第20-21页 |
| 1.5 Paf1C与基因转录调控 | 第21-23页 |
| 1.5.1. Paf1C与DOT1L的关系 | 第21-22页 |
| 1.5.2. RNAPolⅡ启动子附近暂停现象 | 第22-23页 |
| 1.5.3. PAF1与PolⅡ暂停现象 | 第23页 |
| 1.6 3T3-L1细胞分化 | 第23-26页 |
| 1.6.1. 3T3-L1细胞分化过程中的基因转录调控 | 第23-24页 |
| 1.6.2. PPARγ与C/EBPα在脂肪细胞分化过程中的核心作用 | 第24-26页 |
| 1.6.3. 3T3-L1细胞诱导分化的方法及脂肪滴检测 | 第26页 |
| 1.7 研究内容及意义 | 第26-28页 |
| 1.7.1. 研究内容 | 第26页 |
| 1.7.2. 研究的意义 | 第26-28页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第28-58页 |
| 2.1 实验药品试剂资源与仪器 | 第28-31页 |
| 2.1.1. 细胞株、菌株以及质粒资源 | 第28页 |
| 2.1.2. 主要实验仪器和耗材 | 第28-30页 |
| 2.1.3. 主要试剂和材料 | 第30-31页 |
| 2.2 常用溶液配方 | 第31-37页 |
| 2.2.1. 大肠杆菌感受态细胞的制备及细菌培养相关溶液 | 第31-32页 |
| 2.2.2. 质粒DNA制备相关溶液 | 第32-33页 |
| 2.2.3. 细胞的培养、转染、感染等实验相关溶液 | 第33-34页 |
| 2.2.4. 生化实验相关溶液 | 第34-36页 |
| 2.2.5. Western Blot相关溶液 | 第36-37页 |
| 2.3 实验方法 | 第37-58页 |
| 2.3.1. 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| 2.3.2. 质粒转化 | 第38页 |
| 2.3.3. 碱裂解法小量提取质粒DNA | 第38-39页 |
| 2.3.4. 中量提取质粒DNA | 第39-41页 |
| 2.3.5. DNA限制性内切酶酶切 | 第41-42页 |
| 2.3.6. DNA样品的琼脂糖凝胶电泳 | 第42-43页 |
| 2.3.7. 琼脂糖胶回收DNA | 第43页 |
| 2.3.8. DNA的连接 | 第43-44页 |
| 2.3.9. PCR | 第44-45页 |
| 2.3.10. shRNA的构建 | 第45-46页 |
| 2.3.11. 细胞培养 | 第46-47页 |
| 2.3.12. 细胞瞬时转染 | 第47-48页 |
| 2.3.13. 慢病毒包装感染 | 第48-49页 |
| 2.3.14. 细胞的药物处理 | 第49页 |
| 2.3.15. 3T3-L1的加药诱导分化 | 第49-50页 |
| 2.3.16. 核分级分离(Nucleic fractionation) | 第50-51页 |
| 2.3.17. 细胞核组分抽提 | 第51页 |
| 2.3.18. 全细胞裂解液 | 第51-52页 |
| 2.3.19. 免疫共沉淀(Co-Immunop recipitation) | 第52页 |
| 2.3.20. 免疫印记实验(Western blot) | 第52-53页 |
| 2.3.21. 细胞油红染色(oil red O) | 第53-54页 |
| 2.3.22. 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第54-58页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第58-69页 |
| 3.1 DOT1L是3T3-L1细胞分化所必需的 | 第58-59页 |
| 3.2 DOT1L不通过H3K79甲基化调控3T3-L1细胞分化 | 第59-62页 |
| 3.3 DOT1L作为转录因子参与3T3-L1细胞的分化 | 第62-63页 |
| 3.4 DOT1L和PAF1有相互作用 | 第63-64页 |
| 3.5 敲低PAF1的表达抑制3T3-L1的分化 | 第64-66页 |
| 3.6 讨论与展望 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
