摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩略语 | 第11-15页 |
第一部分:ING4对血管内皮细胞增殖、迁移及HIF-1α抑制作用的机制研究 | 第15-35页 |
1 前言 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-25页 |
2.1 实验材料 | 第16-18页 |
2.1.1 主要仪器,见表1-1 | 第16-17页 |
2.1.2 主要试剂,见表1-2 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-25页 |
2.2.1 细胞传代培养 | 第18页 |
2.2.2 CoCl_2模拟缺氧环境 | 第18页 |
2.2.3 实验分组 | 第18页 |
2.2.4 细胞转染 | 第18-19页 |
2.2.5 MTT实验检测细胞增殖 | 第19页 |
2.2.6 Transwell实验 | 第19-20页 |
2.2.7 Real time PCR | 第20-22页 |
2.2.8 Western blot | 第22-24页 |
2.2.9 统计学分析 | 第24-25页 |
3 结果 | 第25-32页 |
3.1 ING4对HUVECs的增殖、迁移及血管形成相关因子表达的影响 | 第25-30页 |
3.1.1 Real time PCR检测转染效率 | 第25页 |
3.1.2 MTT实验检测细胞增殖 | 第25-26页 |
3.1.3 Transwell实验检测细胞迁移 | 第26-28页 |
3.1.4 Real time PCR实验检测ING4对血管形成相关因子mRNA的表达产生的影响 | 第28-29页 |
3.1.5 Western blot实验检测血管形成相关因子的蛋白表达 | 第29-30页 |
3.2 ING4对HIF-1α的调节作用 | 第30-32页 |
3.2.1 Real time PCR实验检测ING4对HIF-1α表达的影响 | 第30-31页 |
3.2.2 Western blot实验检测ING4对HIF-1α表达的影响 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-34页 |
5 结论 | 第34-35页 |
第二部分:MicroRNA-214下调ING4促进肺腺癌细胞增殖及侵袭的机制研究 | 第35-63页 |
1 前言 | 第35-37页 |
2 材料与方法 | 第37-46页 |
2.1 实验材料 | 第37-38页 |
2.1.1 主要仪器,见表1-1 | 第37页 |
2.1.2 主要试剂,见表1-2 | 第37-38页 |
2.2 实验方法 | 第38-46页 |
2.2.1 临床标本收集 | 第38页 |
2.2.2 细胞传代培养 | 第38页 |
2.2.3 实验分组 | 第38-39页 |
2.2.4 细胞转染 | 第39-40页 |
2.2.5 MTT实验 | 第40页 |
2.2.6 集落形成实验 | 第40页 |
2.2.7 Transwell实验 | 第40-41页 |
2.2.8 划痕实验 | 第41页 |
2.2.9 Real time PCR | 第41-43页 |
2.2.10 Western blot | 第43-45页 |
2.2.11 统计学分析 | 第45-46页 |
3 结果 | 第46-61页 |
3.1 miR-214在肺癌组织中表达上调 | 第46-47页 |
3.1.1 miR-214在肺癌组织中的表达 | 第46-47页 |
3.2 miR-214对肺腺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭及血管生成相关因子的影响 | 第47-52页 |
3.2.1 miR-214在肺癌细胞系中的表达 | 第47-48页 |
3.2.2 Real time PCR检测转染效率 | 第48页 |
3.2.3 MTT实验检测细胞的增殖率 | 第48页 |
3.2.4 集落形成实验检测细胞增殖 | 第48-49页 |
3.2.5 Transwell实验检测细胞侵袭 | 第49-50页 |
3.2.6 划痕实验检测细胞迁移 | 第50页 |
3.2.7 Real time PCR实验检测miR-214对血管形成相关因子mRNA表达的影响 | 第50-51页 |
3.2.8 Western blot实验检测miR-214对血管形成相关因子蛋白表达的影响 | 第51-52页 |
3.3 miR-214对ING4的调控作用 | 第52-61页 |
3.3.1 Real time PCR实验检测miR-214对ING4表达的影响 | 第52-53页 |
3.3.2 Western blot实验检测miR-214对ING4表达的影响 | 第53-54页 |
3.3.3 荧光素酶报告质粒检测miR-214对ING4表达的影响 | 第54-55页 |
3.3.4 统计分析肺癌组织中miR-214与ING4表达水平之间的关系 | 第55-56页 |
3.3.5 Real time PCR实验检测共转染miR-214与ING4对VEGF、MMP-2、HIF-1α表达的影响 | 第56-61页 |
4 讨论 | 第61-62页 |
5 结论 | 第62-63页 |
本研究创新性的自我评价 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
综述 | 第70-79页 |
参考文献 | 第75-79页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第79-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
个人简介 | 第81页 |